胃癌组织S100A11基因的表达及检测意义分析
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摘要：目的：检测S100A11基因在胃癌组织中的表达情况，探讨其在胃癌组织中的检测意义。方法：选取我院2013年2月～2014年6月收集的52例胃癌和20例正常胃粘膜组织标本为研究对象，应用免疫组化（SP）技术和western blot技术检测s100a11的表达情况，比较S100A11在两组组织中的表达差异。结果：胃癌组织中S100A11蛋白的阳性表达率（69.2%）高于正常胃粘膜组织中的阳性表达率（25%），差异具有统计学意义（P
S100A11（S100C，Calgizzarin）又称钙囊素，为多基因低分子量钙结合S100蛋白家族成员之一。S100蛋白定位于染色体lq21区，常因肿瘤组织在该区段的基因重组、染色体重排而引起表达失控[1]。S100A11参与细胞的增殖、分化和凋亡，与癌症的发生发展密切相关。目前，已有研究表明S100A11在甲状腺癌、食管癌和胰腺癌等恶性肿瘤中的表达较高[2]。基于此，本研究通过SP技术和western blot技术检测S100A11在胃癌中的表达情况，探讨S100A11和胃癌的关系，为胃癌的诊断、治疗及预后提供新的方向。
1 材料与方法
1.1 组织标本 选取我院2013年2月～2014年6月收集的52例胃癌和20例正常胃粘膜组织标本为研究对象，其中男42例，女30例；年龄为33～73岁，平均（55.1±9.7岁）。两组病例组织标本均经我院病理科确诊。所有标本均保存于液氮中。胃癌患者手术前或取材前均无放化疗或局部治疗史。
1.2 试剂 鼠抗人S100A11单克隆抗体、鼠抗人β-actin单克隆抗体、山羊抗鼠IgG均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，DAB显色试剂盒、BCA蛋白定量检测试剂盒和ECL发光试剂盒均购自碧云天生物公司。
1.3 方法
1.3.1 免疫组化染色检测 标本经常规10%福尔马林固定，脱水后经石蜡包埋，切片，厚度为4μm，并将切片敷贴于载玻片上，按试剂盒说明书进行免疫组化操作。PBS作为阴性对照。
1.3.2 Western Blot检测 组织标本加入液氮后迅速磨成粉末后加1ml裂解液，超低温离心提取组织总蛋白，采用BCA法进行蛋白定量。以50μg的总蛋白量加样，PCR仪变性10 min后进行SDS-聚丙烯胺凝胶电泳，将凝胶中蛋白转移至预先用甲醇激活的PVDF膜，约1.5h。TBST洗膜10min×3次，加入脱脂奶粉液4 ℃过夜，滴加一抗（鼠抗人S100A11 单克隆抗体1：1000，鼠抗人β-actin 单克隆抗体1：1000）37 ℃孵育3h，TBST洗膜10min×3次。滴加二抗（山羊抗鼠1：2000）37 ℃孵育1 h，TBST洗膜10 min×3 次；加入ECL发光剂显影。
1.4 判断标准 在光镜下5个不同高倍视野下观察，计数100个细胞，阳性的判断可根据胞核或胞浆中是否呈现粗细不一棕黄至棕褐色颗粒，无着色为阴性，并根据着色强度及胞核着色细胞个数将其分为弱阳性（+）、阳性（++）、强阳性（+++）三个等级。
1.5 统计学方法 应用SPSS16.0统计软件进行数据统计分析，计量资料用（ ）表示，采用t检验，计数资料用采用χ2检验，结果以P < 0.05为有统计学意义。
2 结果
3 讨论
胃癌是全球发病率及病死率最高的恶性肿瘤之一，严重威胁着人类的健康。胃癌发病隐匿，侵袭转移快，病症不明显，加之缺乏有效的早期诊断技术，导致大部分胃癌患者就诊时已发展中晚期，错过了最佳治疗时期[3]。胃癌发生发展是多种基因共同参与的过程，包括了多种癌基因被激活，表达上调。
S100A11是S100 蛋白家族的成员之一，在很多癌组织中有高表达，参与了细胞的增殖、分化和凋亡与癌症的发生发展密切相关。有研究表明，S100A11在直肠癌组织中表达水平高于起正常直肠组织，并随疾病的发展上调其表达量，这些发现有助于判断直肠癌的分期[4]。本组研究表明， S100A11蛋白在胃癌组织的表达高于正常胃粘膜组织，差异无统计学意义（P
参考文献：
[1]、刘迎福， 贺修胜， 徐刚， 等. S100A2蛋白表达与胃癌分化程度的关系研究 [J]. 南华大学学报（医学版）， 2005， 33（1）： 1-3，12.
[2]、狄扬， 陈耀辉， 龙江， 等. 胰腺癌组织中差异表达蛋白的筛选与鉴定 [J]. 外科理论与实践， 2007， 12（5）： 429-433.
[3]、周湘涛. 胃癌组织中S100A11、MMP-9和RECK的表达及意义 [D]； 南华大学， 2011.
[4]、Wang G， Wang X， Wang S， Et Al. Colorectal Cancer Progression Correlates With Upregulation Of S100a11 Expression In Tumor Tissues [J]. International Journal Of Colorectal Disease， 2008， 23（7）： 675-682.