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摘 要:模拟野生羊肚菌的生态习性,进行了不同培养料的配比栽培试验,采用简单的挖畦,培养料内增加棉籽壳、复合微量元素成分等综合栽培技术措施促成羊肚菌正常出菇,提高产量最高生物学效率达67%。
关键词:羊肚菌;栽培;初报
1 羊肚菌生育环境及产生子实体条件调查
对辉南县青顶子林场果园边的林内生长羊肚菌的生态条件进行了观察、测定,发现该地出子实体时间为5月份,月平均气温8~12℃,最高气温20~22℃,最低气温3~6℃。土壤湿度为23.2%,pH值6.8,空气相对湿度78%,地表温度为11.9℃,0~10cm土层温度为11.6℃。这样的气候条件产生的子实体数量多。通过对果园生长羊肚菌的地带进行调查,发现昼夜温差大(10~17℃),土壤pH值6~7,偏碱性,形成羊肚菌的子实体越多。
2 菌种制作
2.1 母种制作
2.1.1 母种培养基配方。PDA培养基:土豆200g、琼脂20g、蔗糖20g、磷酸二氢钾1.0g、硫酸镁0.5g、加蒸馏水至1000ml。麦芽浸膏培养基:(MA)麦芽浸膏25g、琼脂20g,加蒸馏水1000ml。葡萄糖硝酸钠琼脂培养基:葡萄糖30g、硝酸钠1.5g、硫酸镁0.5g、磷酸氢二钾1.0g、硫酸亚铁0.01g、琼脂20g,加蒸馏水至1000ml。蔗糖硝酸钾琼脂培养基:蔗糖50g、硝酸钾10g、磷酸二氢钾5g、硫酸镁2.5g、氯化铁0.02g、琼脂20g,加蒸馏水至1000ml。腐殖质土壤浸出液培养基:腐殖质土壤浸出液300ml,菌材浸出液100ml,子实体浸出液100ml、葡萄糖5.0g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁0.5g、尿素0.5g、石膏粉1.0g、琼脂10g。
土壤浸出液制法:±200g,加水500ml,煮沸过滤补水至300ml。菌材浸出液制法:菌材50g,加水300ml,煮沸过滤,补水至100ml,羊肚菌子实体浸出液制法:子实体25g,加水300ml。煮沸过滤,补水到100ml。将3种浸出液合并加入其它组分,补水至500ml。通过筛选,最优培养基为腐殖质土壤浸出液培养基,菌丝在其斜面培养基上7~10天长满试管。其次是PDA培养基,菌丝在其斜面上8~12天长满试管。依次是葡萄糖硝酸钠琼脂培养基、蔗糖硝酸钾琼脂培养基、麦芽浸膏培养基,菌丝在其斜面上长满试管分别为10、14、15天。
2.1.2 孢子分离。在锥形烧瓶内盛腐殖质土壤浸出液培养基,分离时,将已经表面灭菌的羊肚菌子实体倒挂在锥形烧瓶内,距培养基表面2~3cm,瓶口塞上棉花,室温16~18℃条件下,约经24小时,可见烟雾状子囊孢子射落到培养基上。取出子实体,将培养物放在20℃条件下,当孢子发育成星芒状菌落时,转入斜面培养基上,经纯化,再转入斜面培养基上培养,约经7~10天菌丝长满试管,待接种用。
2.1.3 组织分离。从新鲜的羊肚菌子实体内,取一小块组织,植在斜面培养基上,在20~25℃条件下培养,待试管长满菌丝后,纯化,再接入斜面培养基上,约经7~10天菌丝长满试管,待用。
2.2 原种制作
①原种培养基:棉籽壳78%、米糖20%、石膏1%、糖1%,另加2%的腐殖质土。②原种制作方法:将母种试管划分成若干小块,取黄豆粒大小块放入原种培养基中,在室温20~22℃条件下培养,大约30~40天,菌丝长满瓶,放在阴凉处待用。③栽培种培养基:棉籽壳75%、米糖20%、石膏2%、石灰1%,另加2%腐殖质土。④栽培种制作方法:将蚕豆大小块的原种接种到栽培种培养基内,在室温20~25℃条件下培养30~40天,菌丝长满瓶放在阴凉处待用。
3 栽培技术
3.1 培养料配方筛选
①棉籽壳65%、锯末25%、米糖5%、石膏1%、石灰1%、腐殖质土3%,不加复合元素。②棉籽壳75%、米糖10%、石膏1%、石灰1%,腐殖质土3%,加MA复合元素。③棉籽壳65%、米糖5%、锯末25%、石膏1%、石灰1%、腐殖质土3%,加MA复合元素。④棉籽壳60%、锯末20%、米糖15%、石膏1%、石灰1%、腐殖质土3%,加MA复合元素。
3.2 室内栽培试验
3.2.1 室内栽培方法。将几种培养料分别搅拌,加复合元素MA、MB、MC、MD。不加复合元素为对照,培养料的含水量为65%,装瓶,高压灭菌,凉后接入栽培种,放在室温20~25℃条件下培养30~40天,待长满菌丝后进行出菇处理。
3.2.2 室内出菇试验。将长好菌丝的罐头瓶,每天晚上拿到4~6℃环境中培养出菇试验,白天拿到18~22℃的室内培养试验,经1个月的变温刺激,产生子实体。
4 结论
不同配方的培养基都能培育出羊肚菌的菌丝,但腐殖质土壤浸出液培养基培育出的菌丝最茁壮及浓密,其次是PDA培养基。羊肚菌的菌丝在不同培养基内均能生长,尤其在棉籽壳占有75%的混合培养基内长势好,形成的子实体多且茁壮,菌肉厚,证明棉籽壳的成分适宜羊肚菌菌丝生长及形成子实体。培养料内加入复合元素,是促进羊肚菌子实体形成及提高产量的关键。室内栽培羊肚菌形成子实体的重要条件是昼夜温差大(8~11℃),又加复合元素MA。