异丙肾上腺素腹腔注射对SD大鼠下颌下腺的影响

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇异丙肾上腺素腹腔注射对SD大鼠下颌下腺的影响范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

【摘 要】目的：建立异丙肾上腺素（IPR）腹腔注射的sd 大鼠模型，观察IPR腹腔注射后腺体的组织学变化。方法：12只SD大鼠随机分成2组：IPR注射组和对照组。IPR注射组按20 mg/kg剂量腹腔内注射盐酸异丙肾上腺素，每天2次，连续注射5 d。对照组则以无菌生理盐水代替盐酸异丙肾上腺素。5d后处死动物，取出腺体。通过HE及免疫组织化学染色观察其组织化学变化。结果：IPR注射5 d 后，腺泡及腺泡细胞体积明显增大，在腺泡和导管细胞之间可见少量细胞表达LN和α6β1，与正常腺体无明显区别。结论：IPR腹腔注射并未增加腺体内干/祖细胞的数量。

【关键词】下颌下腺； 异丙肾上腺素； 干/祖细胞； 组织学

【中图分类号】R285.5 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）07-4261-01

涎腺细胞的增殖和营养与交感副交感的神经刺激、激素的调节有十分密切的关系[1]。β-肾上腺素能激动剂异丙肾上腺素注射后，能够在短时间内促进啮齿类动物涎腺腺泡细胞增殖、肥大[2]；诱导大鼠腮腺闰管细胞分裂增殖，表现出腺泡细胞免疫组织化学性质[3]。本文通过腹腔注射IPR，观察IPR对下颌下腺干/祖细胞的影响。

1 材料与方法

1.1材料

8周龄雄性Sprague-Dawlye大鼠（SD大鼠），180～200g，SPF级，第三军医大学医学实验动物中心提供。盐酸异丙肾上腺素（2ml：1mg，上海禾丰制药有限公司）。一抗：兔抗大鼠层粘蛋白（LN） 多克隆抗体、小鼠抗大鼠整合素α6β1单克隆抗体（ Chemicon International）。二抗：Envision两步法抗兔/鼠通用型免疫组化检测试剂盒，EDTA 抗原修复液，DAB 显色试剂盒。

1.2方法

1.2.1动物模型的建立 12只雄性SD大鼠随机分成2组：IPR注射组和对照组。异丙肾上腺素注射组按20 mg/kg剂量腹腔内注射盐酸异丙肾上腺素，每天2次（8AM，8PM），连续注射5 d。对照组则以无菌生理盐水代替盐酸异丙肾上腺素腹腔注射。5d后处死动物并取出腺体。将获得的腺体进行免疫组织化学染色。

1.2.2免疫组化染色采用两步法，按试剂盒说明进行操作。最后用DAB 显色，苏木精复染。

2 结果

2.2 异丙肾上腺素注射后的组织变化

α6β1免疫细胞化学染色时，两组腺体的腺泡和导管细胞间可见细胞棕黄色染色，胞浆着色。腺泡细胞未见表达，LN免疫细胞化学染色时，两组腺体的腺泡基底膜及其与导管细胞间可见细胞胞浆着色。3 讨论

LN通过其受体的介导，调节细胞的粘附、迁移、增殖和分化，在胚胎发育和组织分化中起关键作用。涎腺发育过程中，其上皮细胞胞浆中含有LN，成年鼠下颌下腺不表达LN[4]。α6β1能够激活细胞周期或促进细胞骨架的重新构建，因此，组织干细胞表达这类整合素[5]。α6β1和LN双阳性细胞是未分化大鼠下颌下腺干/祖细胞的典型特征之一[6]。下颌下腺主导管结扎后，表达整合素α6β1和LN 的细胞位于增生的导管及其周围[7]。在本实验中，我们观察到，整合素α6β1阳性细胞散在分布于闰管与腺泡之间，这些位置的细胞还表达LN，以上的证据说明，这些细胞具有干/祖细胞的特征。但 IPR注射组和对照组中α6β1和LN的表达没有明显区别，提示两组下颌下腺中干/祖细胞数量没有明显改变。本实验采用8周龄SD大鼠，尚未进入成年期，因此基膜区有LN表达。

本研究的结果提示IPR腹腔注射并未增加腺体内干/祖细胞的数量，其对干/祖细胞的影响有待进一步研究。

参考文献

[1] Riva A， Puxeddu R， Loy F， et al. Serous and mucous cells of human submandibular salivary gland stimulated in vitro by isoproterenol， carbachol and clozapine： an LM， TEM， and HRSEM Study[J]. Eur J Morphol. 2003； 41（2）： 83-87

[2]Denny PC， Denny PA. DNA synthesis and cell division. In：Dobrosielski-Vergona K （ed） Biology of the salivary glands. CRC Press， Boca Raton. 1993：263281

[3] Katsumata O， Sato Y， Sakai Y， et al. Intercalated duct cells in the rat parotid gland may behave as tissue stem cells[J]. Anat Sci Int. 2009； 84（3）： 148-54

[4] Lazowski KW， Mertz PM， Redman RS， et al. Temporal and spatial expression of laminin， collagen types IV and I and alpha 6/beta 1 integrin receptor in the developing rat parotid gland[J]. Differentiation. 1994； 56（1-2）：75-82.

[5] Yang L，Faris RA，Hixson DC. Phenotypic heterogeneity within clono-genic ductal cell populations isolated from normalrat liver[J]. Proc Soc Exp Biol Med. 1993； 204（ 3） ： 280-288.

[6] Okumura K， Nakamura K， Hisatomi Y， et al. Salivary gland progenitor cells induced by duct ligation differentiate into hepatic and pancreatic lineages[J]. Hepatology. 2003； 38 （1）： 104-113

[7] 潘光华， 陈伟， 张霓霓， 等. SD 大鼠下颌下腺主导管结扎损伤及再通后的组织学观察[J]. 实用口腔医学杂志， 2012； 28（ 5）： 570-573

基金项目：

湖南省教育厅2012年度科学研究项目（12C1248）