肠杆菌科产ESBLs细菌的临床耐药研究

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[摘要]目的 研究肠杆菌科产esbls细菌的临床耐药情况。方法 选取我院2014年7月～2016年9月的4265株肠杆菌科病原菌，将其采用生物梅里埃分析仪进行鉴定，确认其为产ESBLs菌株后，对其进行药敏检测，分析产ESBLs细菌在临床各种抗生素中的耐药情况。结果 产ESBLs细菌主要在奇异变形杆菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌中分布，在4265株肠杆菌病原菌中，产ESBLs细菌有2415株，检出率为56.62%，人体脓液、分泌物、尿液、胆汁的检出率较高，产ESBLs细菌在不同标本中的检出率比较，差异有统计学意义（P

[关键词]肠杆菌科；产ESBLs细菌；临床耐药

[中图分类号] R378.2+1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）05（c）-0126-03

[Abstract]Objective To study the clinical drug resistance of Enterobacteriaceae producing ESBLs bacteria.Methods 4265 strains of Enterobacteriaceae pathogenic bacteria in our hospital from July 2014 to September 2016 were selected，biological Meiliai analyzer was used for identification，after identification of ESBLs producing strain，drug sensitivity test was carried out to analyze the drug resistance of ESBLs producing bacteria in clinical antibiotics.Results Among 4265 strains of Enterobacteriaceae，the ESBLs producing bacteria were mainly distributed in Proteus mirabilis，Klebsiella，Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli.There were 2415 strains of ESBLs bacteria，the detection rate was 56.62%.The detection rate of ESBLs bacteria in pus，secretion，urine and bile in human body were higher.There was significant difference in the detection rate of ESBLs bacteria in different samples （P

[Key words]Enterobacteriaceae；Producing ESBLs bacteria；Clinical grug resistance

S着抗生素类药物在临床中被广泛应用，病原菌日渐严重，耐药越发严重。产ESBLs细菌在抗生素中具有多重耐药性[1-2]，因此，我院对肠杆菌科产ESBLs细菌的临床耐药性进行研究，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取我院2014年7月～2016年9月的肠杆菌科检出病原菌，将其采用生物梅里埃分析仪进行鉴定，肠杆菌病原菌共计4265株（排除同位患者在7 d内同一部位的重复菌株）。

1.2方法

1.2.1试剂 抗生素药敏纸片：头孢他啶、头孢噻肟、克拉维酸等。培养基：按照“临床检验操作规程第三版”进行配制。

1.2.2药敏试验方式和细菌培养方式 所检菌株应严格按照我院肠杆菌科鉴定规程进行操作，送检标本经过分离培养后，获得单个菌落，采用梅里埃细菌分析系统对其病原菌进行鉴定，疑似为产ESBLs细菌的病原菌应参照纸片扩散法实施操作：将药敏纸片贴于平板，间距约为24 mm、在35℃培养过夜后，对抑菌环直径进行测量，头部噻肟/克拉维酸-头孢噻肟≥5 mm，既可判定为产ESBLs细菌[3]。

1.3质控菌株

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为卫生部质控菌株。

1.4 观察指标

分析4265株肠杆菌病原菌中的产ESBLs细菌，同时分析产ESBLs菌株在11种抗生素中的耐药性。

1.5统计学处理

采用SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析，计数资料采用χ2检验，以P

2 结果

2.1肠杆菌病原菌中的产ESBLs细菌分析

产ESBLs细菌主要在奇异变形杆菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌中分布，在4265株肠杆菌病原菌中，产ESBLs细菌有2415株，检出率为56.62%，人体脓液、分泌物、尿液、胆汁的检出率较高。产ESBLs细菌在不同标本中的检出率比较，差异有统计学意义（P

2.2产ESBLs细菌在11种抗生素中的耐药性分析

产ESBLs细菌在部分抗生素之中具有耐药性，大部分抗生素对产ESBLs细菌完全无效，而亚胺培南对产ESBLs菌株敏感（表2）。

3讨论

ESBLs也称为超广谱β-内酰胺酶，在人体鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠杆菌最为常见，其次，在弗劳地枸橼酸菌、铜绿假单胞菌、粘质沙雷氏菌、阴沟肠杆菌中也可见，具有水解灭活青霉素类抗生素、头孢他啶、头孢哌酮、头孢菌素等特点，其活性易被β-内酰胺酶抑制剂、他唑巴坦、舒巴坦、克拉维酸所抑制，而产ESBLs细菌主要分解头孢噻肟的CTX-M型[4]。如果临床发生产ESBLs菌株，易对单环β-内酰胺类抗生素、头孢哌酮、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶产生耐药性。ESBLs在临床实验室有专门的检测方法，若患者药敏报告单注明为产ESBLs菌株，则提示已经过实验室确诊[5]。若患者药敏报告未注明产ESBLs菌株，三代头孢菌素MIC≥2 μg/ml或者符合CAZ≤22 mmm、CRO≤25 mm其中一个，则提示菌株可能产ESBLs[6]。研究显示，单环β-内酰胺类抗生素与第三代头孢菌素广泛应用是导致临床产ESBLs菌株传播以及发生的主要因素，若临床中发生产ESBLs菌株，易在患者和医院以及不同菌株之间相互传播，引起严重后果，同时在治疗过程中应减少单环β-内酰胺类抗生素与第三代头孢菌素的应用，能显著避免产ESBLs菌株产生[7-8]。

本研究分析了我院的4265株肠杆菌病原菌，其中产ESBLs细菌有2415株，检出率为56.62%，人体脓液、分泌物、尿液、胆汁的检出率较高，提示泌尿道感染和呼吸道感染为产ESBLs细菌的主要来源[9]，在11种抗菌药物中，产ESBLs阴性菌株大部分产生耐药性，产ESBLs细菌大部分耐药性为80%，头孢类、哌拉西林、氨苄西林对产ESBLs细菌几乎失效，对阿米卡星部分耐药为8.9%～20.00%，只有亚胺培南对产ESBLs细菌发生敏感，提示产ESBLs细菌不仅对氨曲南、头孢三代具有耐药性，同时也对磺胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类药物具有交叉耐药性，使细菌中复方磺胺、庆大霉素、妥布霉素完全转移至相关质粒上[10-12]。本院建议，若患者一旦确诊为产ESBLs菌株，对于使用抗生素药物治疗的患者，应立即停用单环β-内酰胺类抗生素和第三代头孢菌素治疗。在R床中，对于具有产ESBLs菌株患者，常用的抗生素为亚胺培南、美罗培南、碳青霉烯类[13-15]，其次为头霉素类中的头孢西丁、头孢美唑等，主要是由于ESBLs活性能被舒巴坦、他唑巴坦、克拉维酸等β-内酰胺酶抑制剂所抑制。同时也可以选择β-内酰胺类抗生素以及β-内酰胺酶抑制剂的混合制剂，例如哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、替卡西林/克拉维酸等[16-18]，但是若同时发生AmpC酶、产ESBLs，上述混合制剂均无效，主要是由于AmpC酶对上述抗菌药物具有水解作用，其活性无法被舒巴坦、克拉维酸等β-内酰胺酶抑制剂所抑制[19-20]。

本研究结果显示，产ESBLs细菌主要在奇异变形杆菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌中分布，在4265株肠杆菌病原菌中，产ESBLs细菌有2415株，检出率为56.62%，人体脓液、分泌物、尿液、胆汁的检出率较高，产ESBLs细菌在不同标本中的检出率比较，差异有统计学意义（P

综上所述，在肠杆菌病原菌中产ESBLs细菌占主要菌种，大多数抗菌药物对产ESBLs细菌治疗无效，目前亚胺培南为临床治疗产ESBLs细菌的最后防线，本院建议临床在给予患者使用抗菌药物之前，应监测耐药菌，遵医嘱进行合理用药，为控制和减少产ESBLs细菌的主要手段。

[参考文献]

[1]张晓兵，府伟灵，廖扬，等.临床产ESBLs细菌的耐药特征和基因分型的研究[J].中华医院感染学杂志，2015，15（4）：386-389.

[2]司红彬，宋剑武，王鹏霞，等.救必应中药血清与抗菌药联合对产ESBLs细菌抑菌效果的研究[J].中国畜牧兽医，2015， 42（4）：1009-1014.

[3]宋剑武，陈秋莹，陆云，等.救必应不同提取物与西药联合对产ESBLs细菌作用研究[J].中国畜牧兽医，2014，41（4）：248-251.

[4]张永标，张扣兴，唐英春，等.13种抗生素对产AmpC酶或同时产ESBLs细菌的体外抗菌活性[J].中国抗生素杂志，2013，28（9）：541-544，551.

[5]马莹.产超广谱β内酰胺酶肠杆菌科细菌对磷霉素的耐药机制研究[D].上海：复旦大学，2013.

[6]刘琼，陈雪初，余宇奇，等.肠杆菌科产ESBLs细菌的临床分布和耐药分析[J].实用预防医学，2012，19（1）：116-118.