血管性痴呆大鼠学习记忆功能研究

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇血管性痴呆大鼠学习记忆功能研究范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

摘要：目的：建立血管性痴呆Sprague-Dawley大鼠模型，通过避暗实验观察血管性痴呆模型大鼠不同时间段学习记忆功能。方法：随机分为血管性痴呆组，正常对照组，血管性痴呆组分21d，42d，60 d，3个亚组，每组匹配相对数量的正常大鼠做对照，采用避暗试验方法记录各组大鼠实验数据，研究学习记忆功能。结果：1、血管性痴呆大鼠模型制作成功后大鼠有血管性痴呆认知功能改变表现。模型制作点燃成功率为62.5%，血管性痴呆大鼠模型组与对照组比学习记忆能力明显下降（P

关键词：血管性痴呆;学习记忆;大鼠

痴呆是一种由于各种社会环境因素导致后天智力功能及认知功能特别是学习记忆能力障碍的综合征[1]，呈进行性加重。血管性痴呆（Vascular dementia，VD）系指由于各种复杂原因致使脑血管功能因素导致脑组织损害从而所引起的智能及认知障碍的综合征[2]。病人有近记忆力、远记忆力和即刻记忆力减退，最早期出现的是近记忆力减退。随着记忆力的减退，逐渐出现注意力不集中，时间定向力、计算力和理解力等也有不同程度的减退。本实验动物模型，具有慢性、可复发性的特点，是一种目前极佳的血管性痴呆模型。能基本反映人能血管性痴呆基本特征。本实验建立血管性痴呆大鼠模型，检测大鼠各个时间段学习记忆功能，研究其学习记忆功能。

材料与方法

1、选用6～8周龄健康成年Sprague-Dawley（SD）大鼠40只，体重275±15g均购自新乡医学院动物实验中心。所有大鼠单笼饲养，避免强光、强噪音刺激，24h昼夜循环。1周后进行筛选，筛选后大鼠行严格固定喂食、喂水时间，严格控制食物的量，自由饮水。积极培养本批大鼠统一生活习性及觅食规律。随机分为血管性痴呆组，空白组，假手术组，血管性痴呆组分为21d，42d，60d三个亚组，每组n=8只，假手术组即为手术操作方法与痴呆组一直，不刺激和闭塞血管，目的排除手术本身对认知功能影响。

2、四血管阻断法（4- VO）[3]，将实验大鼠用1%戊巴比妥钠的（0.5mL/100g）腹腔麻醉后，麻醉满意后，将大鼠固定在立体定向仪上，两侧耳杆平行，门齿位置低于外耳扣位置约3.5mm，用大鼠专用褪毛机褪去颈部毛发，用碘伏消毒3遍，范围参照动物无菌手术标准执行，后用无水乙醇脱碘，背侧颈正中切口，细心分离颈部肌肉以及结缔组织，打开动物试验用手术显微镜，放大倍数为4倍，暴露双侧第一颈椎横突翼小孔， 用直径为0.5mm的电凝针，电压为10V，不可过大，以免对大鼠心脏等重要器官影响，从而造成对结果的影响，插入双侧翼小孔烧灼双侧椎动脉造成永久性闭塞;在把大鼠仰卧固定在手术立体定向以上，参照上述标准，使用显微镜下操作，然后腹侧颈正中切口，分离双侧颈总动脉，穿结备用24h后，实验后单笼饲养，饲养环境避免噪音、强光刺激，充足的水分以及食物供应，保持大鼠健康，大鼠死亡率较高，有条件的地方建议实验操作员住在实验室观察48小时，且要求每个大鼠必须在摄像头监视下，24小时后，再次常规动物手术后消毒后，用微动脉瘤术中阻断夹夹闭双侧颈总动脉5min，共夹闭3次，每次间隔1h 术后手术部位施以适量青霉素对抗感染， 4- VO为目前国际公认的VD造模方法它可高度模拟VD的发病特点 ，但存活率相对较低。

3、学习记忆实验（避暗试验）全部大鼠均采用避暗试验（R.D鼠博士）箱进行行为学测试，设备自带软件分析系统（上海移数信息科技公司）进行学习记忆能力测试。由于大鼠有喜暗的习性，将大鼠背对暗室的洞口放入明室，并开始计时，进行学习实验，大鼠可很快自由进入暗室，此时即为大鼠潜伏期，并记录，同时接通暗室电源，直流电电击，受到电刺激后大鼠会逃出暗室，如此训练10min。大鼠休息24 小时后，暗室铜网板通电，将大鼠同前置于明室，研究大鼠记忆功能，记录大鼠从明室第1次进入暗室的时间即为本次实验大鼠潜伏期（LT），大鼠受电击后会逃避性地跑出暗室，然后记录10min大鼠进入暗室的次数即穿梭次数（EN），并记录和观察大鼠在明暗是活动时间和活动路线距离，共同作为记忆成绩表现为潜伏期和穿梭次数。

4、. 统计学处理及分析 采用SPSS13.5统计软件包进行分析，所得数据以±s表示，数据采用单因素因素方差分析，组间比较用LSD-t检验，p

结 果

模型死亡率较高，模型制作成功率为62.4%。假手术组避暗试验结果LT为（56.00±2.33s）、EN为（3.14±1.11次）， 性血管性痴呆大鼠模型组与对照组比学习记忆能力明显下降（P

表（1） 血管性痴呆模型大鼠避暗试验的LT（s）及EN（次）

模 型 组

空白组

假手术组

21d

42d

60d

LT

47.61±3.33s*

38.23±1.36s

45.99±2.87s*

55.00±2.73s

56.00±2.33s

EN

2.73±0.89次*

5.25±1.15次

2.33±1.25次*

3.28±1.16次

3.14±1.11次

注：血管性痴呆模型组内比较，*示P

讨论

血管性痴呆其主要病理为多发的脑腔隙样梗死病灶，是由于大脑前、中、后动脉的动脉网中小动脉的穿通动脉的阻塞，而导致腔隙性或局灶性梗死，常影响上行激活系统，导致上下行系统不能正常协调，从而引起痴呆[4]。高血压是主要因素，伴有纤维蛋白沉着，后者导致小动脉脂质透明样变性和动脉壁变薄弱，小动脉变长、弯曲和产生内膜下夹层和微动脉瘤。Fisher在尸检中发现相当一部分患者有局限性小软化灶，其边缘有薄层胶质纤维和胶原纤维，腔内组织稀疏，神经细胞大多消失，绝大多数腔隙分布在壳核、尾状核、丘脑、脑室旁白质，也可见于脑桥、小脑，但大脑皮质甚少见[5]。Hachinski在鉴别痴呆病人的病因时，发现不少病人主要病理改变是这种多发的腔隙性梗死，其梗死的体积在50cm3以上。本实验血管性痴呆动物模型在血管性痴呆发作早起学习记忆功能无明显变化，中期多种影响学习记忆功能的因子均被启动，血管性痴呆模型动物表现为学习记忆障碍明显，而长期的血管性痴呆发作，引起脑部自我功能的失调和破坏，模型大鼠认知有部分的恢复，但部分受损功能为永久性的，打破这种平衡，学习记忆功能即会下降。且功能失去后就很难恢复，其病人的生活质量下降。

参考文献 ND， Lemstra AW， Scheltens P， et al. Trajectories of cognitive decline in different types of dementia[J]. Psychol Med. 2014 ;（9）17：1-9 Al-Qazzaz NK， Ali SH， Ahmad SA， et al. Cognitive impairment and memory dysfunction after a stroke diagnosis： a post-stroke memory assessment[J]. Neuropsychiatr Dis Treat. 2014; 9（10）：1677-1691 Xu wenzhong， Qi JH， Zhang PS， et al. Autophagy activation aggravates neuronal injury in the hippocampus of vascular dementia rats[J]. Neural Regen Res. 2014 ;9（13）：1288-1296 Bandyopadhyay TK， Biswas A， Roy A， et al. Neuropsychiatric profiles in patients with Alzheimer's disease and vascular dementia[J]. Ann Indian Acad Neurol. 2014 Jul;17（3）：325-330 Pan W， Song Y， Kwak S， et al. Quantitative Evaluation of the Use of Actigraphy for Neurological and Psychiatric Disorders[J]. Behav Neurol. 2014;1（3）：8972-8982.

作者：郭志波，男，汉族，副主任医师，副教授，医学硕士，从事神经外科基础与临床教学10余年。

[1] 通讯作者：王庆志，男，汉族，医学博士 ，教授，从事基础医学科研及教育20余年。