丹参中丹酚酸B含量的测定方法
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇丹参中丹酚酸B含量的测定方法范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
摘要：丹参是一种唇形科植物丹参的根茎和干燥根部分，而丹酚酸B则是从丹参中分离提取的一种也具有新木质素骨架和咖啡酰缩酚酸结构的水溶性成分。单分散有抗前列腺肿瘤、抗氧化清除自由基、抗肝纤维化和放置神经推行性疾病等效用，其开发利用的前景极为广阔。
由《中国药典》2005版和当前报道中丹酚酸B测定方法中可知，供试品溶液制备手段，是采用75%甲醇，进行1 h的加热回流后提取，并采取HPLC测定其含量[1]。这种测定丹参中丹酚酸B含量的方法，具有良好的重现性，然而操作比较复杂，耗时较长，有方法改进的必要。
1材料和仪器
从广州广弘中药材有限公司中购得丹参药材，且通过中药鉴定，确定其为唇形科植物丹参根茎和干燥根，与2005年版的《中国药典》中相关规定相符合。其中，甲醇是色谱纯，水为纯净水，其他试剂都是分析纯。仪器则采用由安捷伦科技有限公司生产的Agilent1100高效液相色谱仪，及上海科导SK1200H超声波提取器。
2方法和结果
2.1丹酚酸B供试液制备方法
2.1.1回流提取法 去本品中粉0.2 g，在去本品粉末的测定水分，通过精密称定后，将其放置在色锥形的容量瓶中，再加入50 ml的75%甲醇，称定重量后，行1 h的加热回流，取出放冷后，再行重量称定，使用75%的甲醇不足所减失的重量，将其摇匀，再滤过，将滤液取出，即得，其编号定为1。
2.1.2超声提取法 取本品中粉0.2 g，同时去本品粉末的测定水分四分，通过精密称定后，将其分别放置在四个100 ml的容量瓶中，再加入4 ml的75%乙醇，提取10，20，30，40 min，再精密量取其中的1 ml提取物，放置在100 ml的量瓶例，将甲醇加至刻度，摇匀后即得，其编号定为2，3，4，5。
2.2使用HPLC测定超声提取法和回流提取法中丹酚酸B含量
2.2.1色谱条件 色谱柱为Symmetry C18（4.6 mm ×150 mm，5 m）；流速为1.0 ml/min；柱温为35℃；检测波长为286 mm；流动相为甲醇.乙腈.甲酸水 （30：10：1：59）；理论半数根据丹酚酸B峰值计算，且要高于2000。
2.2.2制备对照品溶液 去对照品丹酚酸B 1.4 mg，加入甲醇后，制成10 ml溶液，其浓度为0.14 mg/ml。
2.2.3制作标准曲线 取丹酚酸B的对照品溶液2，4，5，10，12，14 μl，分别对其进样，测定其峰面积，使用峰面积Y对进样量X进行线性回归，其回归方程为Y=160.93X-6.976，R=0.9999.结果显示丹酚酸B为0.28～0.12 μg时，和峰面积线性关系较好。
2.2.4精密度试验和重现性实验 取5 μl的样品溶液，经过6次的重复进样后，结果显示丹酚酸B的峰面积为0.28%；去本组丹酚酸B制备的5份供试液测定进样，结果显示丹酚酸B的峰面积为1.26%。
2.2.5稳定性考察 取5 μl的样品溶液，在制备后及2、4、12、24 h进行测定，结果显示丹酚酸B的峰面积为1.82%，可见溶液在24h比较稳定。
2.2.6回收率实验 在5份样品溶液中，加入1.7 ml的丹酚酸B对照品溶液，经测定，其凭借回收率是95.5%，其峰面积是1.14%。结果显示，采取超声提取法，提取10，20，30，40 min的效果，与《中国药典》中加热回流1 h的丹酚酸提取效果相同。
3讨论
使用超声波所产生空化现象，可以细化各类物质及制造乳浊液，同时可加速植物中有效成分进入溶剂，增加有效成分提取率[2]。超声可转为热能，使得药物组织中温度骤然提升，以此加速植物中有效成分溶解。同时，超声波还可通过使用超声压强和辐射压强引发的机械作用解聚生物分子，以此将植物细胞壁上有效成分溶解在溶剂中。
超声波所产生的空化现象还会产生显微气泡，而气泡"定向扩散"可形成共振腔，从而破坏生物大分子和细胞膜，增加其有效成分扩撒速度。此外，超声波还能破坏药物细胞，将溶媒渗入药物细胞中，以此加速药物中有效成分在溶媒中的溶解速度，提升有效成分提出率[3]。
和《中国药典》中的方法相比，本组测定方法继承了其优点，又改进了其中缺陷，不仅可保障丹酚酸B的提取率，还能缩短提取时间，且其丹酚酸B测定结果和《中国药典》中的差异没有统计学意义。可见，这种丹酚酸B提取法是一种高产、快速的新型药物提取法，值得推广。
参考文献：
[1]许永，赵成.不同提取方法对丹参中丹酚酸B含量测定的影响[J].安徽医药，2009，13（10）：1193-1194.
[2]谢王乙子.丹参叶片不定芽的诱导及其成苗中丹酚酸B含量的测定[J].雅安：四川农业大学，2010.
[3]仇雅静.对《中国药典》2005年版丹参中丹酚酸 B含量测定方法的探讨[J].中国药品标准，2009，10（1）：9-10.