藿贞散对小鼠免疫力的影响
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《中兽医医药杂志》2015年第三期
1实验方法
1.1实验动物分组及处理实验小鼠购回后，适应性饲养3d，随机分成4组，每组20只，雌雄各半，Ⅰ-Ⅲ组为实验组，分别在饲料中添加2433mg/kg、4867mg/kg和9737mg/kg的藿贞散（根据生产中猪的推荐用量折算为中剂量，上、下各推一个梯度为高剂量和低剂量），Ⅳ组为空白对照组，不添加任何药物。
1.2小鼠生长性能的测定实验小鼠按10g/d•只饲料量、每天傍晚饲喂1次，连续饲养21d。喂料前称量体质量和剩余饲料，记录小鼠体质量和每天的饲料消耗量，计算日增重和料肉比。
1.3小鼠力竭游泳时间的测定饲喂21d后，在小鼠尾部系上质量为小鼠体质量10%的铅丝，置恒温水浴箱中游泳[水深不少于30cm，水温（25±0.5）℃，以小鼠尾部不能接触箱底为度]，记录小鼠游泳时间，至小鼠沉于水面下10s不能上浮为止。
1.4血细胞计数力竭游泳实验结束后，让小鼠适当恢复，每组取10只（雌雄各5只），每只采血2份，每份1-1.5mL，其中一份注入混有EDTA抗凝剂的离心管中，用全血自动分析仪测定血细胞数。
1.5吞噬指数测定取各组另外10只小鼠（雌雄各5只），尾静脉注射印度墨汁0.1mL/10g（4倍稀释），分别于注射墨汁后2min和10min采血20μL，并迅速加入到0.1％Na2CO3溶液2mL中，摇匀。用紫外分光光度计于600nm波长处测定光密度值（OD），按公式（1）计算吞噬指数。式中α为吞噬指数，k为炭廓清指数，OD1为第1次注射墨汁时的光密度值，OD2为第2次注射墨汁时的光密度值，T1为第1次注射墨汁的时间，T2为第2次注射墨汁的时间。
1.6小鼠肝脏指数、脾脏指数测定将测定完吞噬指数后的小鼠称重后处死，分别取肝脏和脾脏，用滤纸吸干水分，用电子称重器称重，分别按公式（2）、（3）计算小鼠肝脏指数、脾脏指数。
1.7小鼠血清溶菌酶活力测定力竭游泳实验小鼠采血1-1.5mL，静置10min后，3000r/min离心10min，收集血清，用小鼠溶菌酶检测试剂盒按说明书操作，测定其血清溶菌酶活力。
2结果
2.1藿贞散对小鼠生长性能和力竭游泳时间的影响在相同条件下，低剂量组小鼠平均日增重最高，对照组小鼠平均日增重最低；对照组小鼠料肉比最高，其次是中剂量组与低剂量组，高剂量组最低；力竭游泳时间低剂量组最高，对照组最低，但差异不显著（P>0.05）。小鼠生长性能和力竭游泳时间见表1。
2.2藿贞散对小鼠吞噬指数及肝脏指数、脾脏指数的影响在相同条件下，中剂量组小鼠吞噬指数显著高于其他3组（0.01<P≤0.05），低剂量组与高剂量组均高于对照组；小鼠肝脏指数中对照组最低，与其他3组比较差异极显著（P≤0.01），低剂量组最高，中剂量组与高剂量组差异不显著（P>0.05）；小鼠脾脏指数中，3个剂量组均极显著高于对照组（P≤0.01），低剂量组最高。小鼠吞噬指数与肝脏指数、脾脏指数见表2。
2.3小鼠血细胞计数与血清溶菌酶活力测定结果在相同条件下，低剂量组小鼠白细胞数量高于其他3组（0.01<P≤0.05），对照组最低；低剂量组小鼠红细胞数量最高（0.01<P≤0.05），对照组最低，中剂量组与高剂量组很接近；高剂量组小鼠血清溶菌酶活力最高（0.01<P≤0.05），对照组最低。小鼠血细胞计数与血清溶菌酶活力测定结果见表3。
3讨论
在现代养殖工业化生产中，日增重与料肉比是评价畜禽生长性能的重要依据，日增重值直接反应畜禽生长性能；料肉比的值越高，说明畜禽消耗的饲料多，饲料报酬低；而机体的抗疲劳能力与其免疫力有关。从实验结果来看，实验组小鼠平均日增重高于对照组，低剂量组最高（0.01<P≤0.05）；实验组小鼠料肉比高于对照组，高剂量组最低。实验组小鼠力竭游泳时间试验组高于对照组，低剂量组最高（P>0.05)，表明藿贞散可增强小鼠的免疫力，同时有促生长作用。机体在受到病原微生物入侵时，免疫功能通常由细胞免疫、体液免疫以及非特异性免疫反应组成。吞噬指数代表了细胞的吞噬能力，反映机体的免疫状态。脾脏为外周免疫器官，肝脏为最大消化器官，同时也参与机体的免疫，故肝脾指数是反映机体免疫功能的最基本和最常规的指数[4]，机体免疫功能在一定程度上会随免疫器官指数上升而增加。从实验结果来看，各实验组小鼠的吞噬指数、肝脏指数和脾脏指数均高于对照组。由此可得，藿贞散对小鼠免疫力有增强之效。血清溶菌酶是中性粒细胞、单核巨噬细胞合成并能迅速释放到细胞外的一种水解酶，在抗感染中是一种重要的非特异性免疫因子，是机体非特异性免疫反应的重要指标。机体抗感染时，血细胞也是机体防御系统的一个重要部分，白细胞数量的增加表明机体对抗外来细菌与病毒入侵的能力增强；红细胞亦含有许多与免疫有关的物质。从实验结果来看，各实验组小鼠的白细胞计数、红细胞计数均显著高于对照组，血清溶菌酶活力显著高于对照组。由此可得，藿贞散对小鼠免疫力有增强之效。
4结论
综上所述，藿贞散对小鼠的免疫力有明显的提高作用，并有较强的促生长功效。
作者：罗召 张明军 冯力 谢江铃 严美君 黄鹦 黄萍 李志辉 彭涛 单位：湖南农业大学 湖南农业大学东方科技学院