关于胆道感染细菌学的检验与耐药性分析
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【摘要】 目的 探讨胆道感染患者胆汁中的细菌种类和耐药性，为临床治疗提供一定依据。方法 对我院2011年2月至2013年2月收治200例胆道感染患者进行胆汁取样、培养，并将病原菌进行分离、鉴别、测试其耐药性。结果 200分样本中阳性样本113例，检测结果显示病原病有261株，其中革兰阳性菌78株，占总数29.89%，革兰阴性菌183株，占总数70.11%。数量较多病原菌分别有大肠埃希菌、粪肠球菌等。其中革兰阴性菌对亚胺培南的耐药性最低，对头孢唑林的耐药性最高；革兰阳性菌对利福平的耐药性最高，而对于万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺没有耐药性。结论 胆道感染疾病的致病菌种类较多，但占比较大的为革兰阴性菌，在进行针对性治疗时，应使用病原菌耐药性较差的亚胺培南、万古霉素等。
胆道感染是外科中极为常见疾病，其与胆石症关系密切。多由于进入胆道的细菌在结石及外来压迫等机械性梗阻因素和伴随充血、水肿等因素刺激下异常繁殖而引起胆道炎症。严重时会导致多个器官功能受损，危及生命。胆汁中细菌种类繁多，对于该疾病治疗一般采用抗菌药物，但是由于抗菌药物产业不断发展，各种药品使用频率变化，细菌耐药性也会发生相应变化[1]。是否能够准确掌握细菌种类、分布及各种病原菌耐药性，对于有针对性合理用药，提高该类疾病治疗效果有着重要意义。本院2011年2月至2013年2月收治200例胆道感染患者进行胆汁取样、细菌培养，将病原菌进行分离、鉴别，并进一步测试其耐药性，具体报告如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料 261株病原菌均为我院2011年2月至2013年2月收治200例胆道感染患者胆汁样本。200例患者中，男115例，年龄为23-63岁，平均年龄为47±1.5岁；女85例，年龄为25-73岁，平均年龄为45±2.1岁。该200例患者中化脓性胆管炎患者56例，占总数28%，胆总管结石103例，占总数51.5%，急性胆囊炎患者26例，占总数13%，其他胆囊疾病15例，占总数7.5%。
1.2 检验方法
1.2.1 所需设备 在进行病原菌的检测时，仪器与试剂均使用法国生物梅里埃公司生产VITEK 2-compact型全自动微生物分析仪，VITEK 2 GN TEST KIT和VITEK 2 GP TEST KIT鉴定卡，AST-GN13和AST-GP67药敏卡。测试细菌对药物的耐药性使用是英国OXOID公司药物敏感用纸及贝瑞特公司生产的MH平板。在整个检验过程中，所使用的质控菌株有铜绿假单胞菌ATCC27853、大肠埃希菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌ATCC29213，粪肠球菌ATCC29212。
1.2.2 病原菌分离鉴别及敏感性测试过程 先将胆汁的样本接种于血琼脂平板及麦康凯培养基，35°恒温下培养24h进行接种。观察其变化，待其分离及纯化以后，则使用VITEK 2-compact型全自动微生物分析仪和K-B法联合对菌种分析与鉴别。在对其进行药物敏感性测试时，操作过程严格按照全国临床检验操作规范进行，其测试结果判断项目及标准，应以临床实验室标准委员会制定相关标准为准[2]。
2 结果
2.1 各种菌株数量分布 200分样本中阳性样本113例，经过严格的检定后，检测结果显示病原病菌数量261株，其中革兰阳性菌78株，占总数29.89%，革兰阴性菌183株，占总数70.11%，具体菌种分布，见表1。
2.2 病原菌对于各种药物的耐药性测试 革兰氏阴性菌对于头孢唑林的耐药性最高，其他依次为头孢呋辛钠、左旋氧氟沙星、庆大霉素、头孢噻肟等，耐药率最低亚胺培南。其中大肠埃希菌对于头孢唑林耐药率最高，其他依次为庆大霉素、头孢呋辛钠、左旋氧氟沙星、头孢噻肟，耐药率最低亚胺培南。克雷伯菌属对于头孢呋辛钠耐药性最高，其他依次为头孢唑林、左旋氧氟沙星、三唑巴坦、头孢他啶，耐药率最低为阿米卡星、舒巴坦及亚胺培南。病原菌对于各种药物耐药率具体数据见表2。
3 结论
一般健康人体胆汁是处于无菌状态，但是在胆道出现病理性堵塞时，由于人体肠道与胆道相互连接，肠道内病原菌会迅速通过经门静脉或以淋巴系统为介质逆行至胆道，胆道细菌来源于肠道[3]。因此，在该项调查分析中，导致胆道感染病原菌，革兰氏阴性杆菌主要种类为大肠埃希菌、假单胞菌属、克雷伯菌属，革兰氏阳性球菌现对较少，主要为肠球菌属中的粪肠球为主。该菌亦为条件致病菌。调查分析结果表明，胆汁中菌群种类与肠道细菌基本相同。
抗生素生产和使用已经十分普遍，该趋势也直接影响到胆道感染患者胆汁中病原菌分布状况。革兰氏阴性杆菌中与大肠埃希菌的占比最大，约占总数40.23%，革兰氏阳性球菌中肠球菌属最多，约占总数17.24%，肠球菌占比与早先研究报告数据有上升，与某学者连续十年动态研究调查报告情况是一致[4]。
大肠埃希菌对于头孢唑林、头孢呋辛钠、左旋氧氟沙星、庆大霉素、头孢噻肟耐药性较高，该类抗菌药物临床上较为常用，该情况与胆道病原菌耐药性有一定联系。因此，在治疗胆道感染疾病时，尽量避免使用头孢菌素及上述药物[5]。大肠埃希菌、克雷伯菌及其他病原菌对于亚胺培南耐药性均较小，抗菌效果显著，但其也存在许多缺陷，如价格昂贵，在新陈代谢上，胆汁无法将其清除，而需要肾脏进行代谢排出，造成肾脏负担，因此应尽量少用。肠球菌对于万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺耐药性较低，一般推荐使用。病情较轻患者可以使用利奈唑胺，如果患者病情较为严重，可以使用万古霉素。
参考文献
[1] 蔡秀军，刘金钢，张学文.胆道感染及其处理原则[J].中国实用外科杂志，2011，31（09）：877-879.
[2] 胡胜军，罗利飞.胆道感染的常见病原菌构成及耐药性变迁[J].中国药物与临床，2011，11（07）：825-827.
[3] 田道容.65例胆汁培养结果及药敏试验分析[J].临床合理用药杂志，2011，4（06）：77-78.
[4] 李柏中，潘少敏，胡辛兰.胆道感染235株病原菌分布及耐药性分析[J].福建医药杂志，2011，33（01）：78-79.
[5] 姜艳梅，刘新元，王晶，肖晓光，王楠，袁宏.5年胆道感染患者胆汁中病原菌的分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2011，21（03）：596-598.