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26例EDTA依赖性血小板减少症患者的比较分析

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摘要:目的 分析EDTA依赖性血小板减少的现象并推测其原因。方法 对26例edta依赖性血小板减少患者重新采血,手工计数血小板(Plt)与白细胞(WBC),并按时间梯度上机检验Plt与WBC的计数变化,同时检验其ESR和免疫球蛋白含量。结果 采血后10 min内,上机检测EDTA抗凝血,,其Plt及WBC计数结果与手工法的差异无统计学意义(P>0.05),采血30 min以后,仪器法计数结果与手工法的差异有统计学意义(P

关键词:EDTA依赖性血小板减少;血小板;白细胞;红细胞沉降率;C-反应蛋白

ICSH建议,临床血常规检查计数全血细胞需用EDTA盐抗凝,肝素、枸橼酸盐等抗凝剂均不适用,因此临床血常规均采用紫帽EDTA抗凝管来采集。EDTA依赖性血小板减少症患者近年来常见报道,其发生已经成为临床Plt计数误诊的最主要因素,正常人群中该现象的发生率为0.09%~0.21%,与免疫系统紊乱密切相关,但具体原因目前尚不明确[1]。本研究对26例EDTA依赖性血小板减少症(EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia,EDTA-PTCP)患者的血常规进行分析,讨论其仪器计数的Plt和WBC数量与采样后标本存放时间的关系,同时对其ESR、C-反应蛋白及三个亚型的血清免疫球蛋白含量进行检测。

1资料与方法

1.1一般资料 收集2012年9月~2014年6月至我院住院并确认为EDTA-PTCP的患者及我院体检科健康体检者的资料。EDTA-PTCP组(患者组)共26例,其中男l1例,女15例,年龄平均(49±17)岁,健康志愿组共30例,男12例,女l8例,年龄平均(45±16)岁。

1.2仪器和试剂 SYSMEX-XE5000全自动五分类血细胞分析仪; Beckman Coulter AU2700全自动生化分析仪及IgA、IgG、IgM试剂(伊利康速率散射比浊法);C-反应蛋白试剂(西班牙BioSystems);Olympus公司CHS双目显微镜;血沉仪;EDTA-K2、枸橼酸钠抗凝管;所有仪器均为原装配套试剂,仪器室内质控正常在控,能力验证结果满意。

1.3方法 抽取26例EDTA-PTCP患者的清晨空腹静脉血,按要求注入EDTA-K2及含分离胶试管。EDTA-K2抗凝管立即混匀后分别于5 min、10 min、30 min、60 min、90 min、l20 min进行仪器法血常规检验。采集患者血液时,所有26例标本分别按《全国临床检验操作规程》进行涂片,通过显微镜镜检,选择有经验的主管检验师计数Plt和WBC含量[2],将其结果作为参考值。ESR及免疫球蛋白含量的检测按对应的SOP文件进行。

1.4统计学方法 采用SPSS 18.0进行统计分析,t检验比较组间差异,P

2结果

2.1患者组Plt和WBC计数 26例EDTA-PTCP阳性患者在采血后不同时间段对样品进行的仪器法检测Plt和WBC计数见表1,与手工计数相比,5 min与10 min时上机检测EDTA-K2抗凝血的Plt和WBC计数,差异无统计学意义(P>0.05),但30 min及以后的差异逐渐变大(P

2.2 ESR、C-反应蛋白及免疫球蛋白检测结果 与对照组相比,患者组IgG、IgM、C-反应蛋白及ESR的检验结果明显高于健康对照组,且差异有统计学意义(P0.05),见表2。

3讨论

自Onder等报道一例EDTA-PTCP现象后,引起了国内外广泛关注[3]。EDTA-PTCP是由于EDTA抗凝血在全自动血细胞计数仪上检测时,EDTA盐诱导血小板聚集、堆积,从而影响血小板计数,使血小板计数偏低[3]。而EDTA-K2是目前公认的血细胞计数的抗凝剂,已广泛用于临床血常规检测。可以确定,发生EDTA-PTCP的原因之一是在EDTA盐作为抗凝剂的前提下,出现的免疫介导的冷抗血小板自身抗体。究其原因,可能与血小板表面存在的某种隐匿性抗原有关[4]。

本研究中,随着采血后时间的延长,患者组血小板聚集逐渐加重,仪器法计数血小板含量逐步减少,而白细胞数在血液采集30 min后明显升高,其可能原因就是因为出现了血小板卫星现象,导致血小板计数减少,仪器误认为聚集的血小板为白细胞而导致白细胞计数的增高。在患者组中,血清IgG、IgM的含量相比健康对照组,有较大增高,ESR,CRP也显著高于对照组,因此可以认为,患者血清中的免疫球蛋白成分及水平与EDTA-PTCP现象有一定的相关性。

血常规是临床检查的最基本项目,临床应用非常广泛。尽管EDTA-PTCP在人群的发生概率很低,但一旦遇到并忽视此类患者,可能造成误诊,给患者及临床诊治工作带来很大困扰。日常工作状态下,采血后10 min进行血常规检验在平常工作中可能较难实现,而超过30 min,血小板计数会减少而白细胞会相对升高,造成检验结果的偏差,甚至出现危急值。因此在日常工作中,检验工作人员必须加强与患者和临床医师的沟通,对无任何出血症状且Plt直方图又发生改变的血小板减少患者,应加强人工推片复检,通过手工法计数血小板和白细胞以排除EDTA依赖性血小板减少的干扰。

参考文献:

[1]张昌峰,朱俊.浅析EDTA依赖性假性血小板减少症病因[J].安徽医药,2009,13(3):302.

[2]叶应妩,王毓三,申子瑜,主编.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:136-143.

[3]Onder O,Weinstcin A,Loyer LW.Pseudothrombocytopenia caused by platelet agglutinins that ale reactive in blood anticoagulated with chelating ageats[J].Blood,1980,56:177-182.

[4]龙聪,郭辉,杨章元.42例EDTA依赖性血小板减少症患者的检测分析[J].海南医学,2012,23(15):100-101.