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南京市建邺区疑似食物中毒的实验室检测与分析

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摘要:目的 了解食物中毒的细菌污染情况并进行分析,为食物中毒处理提供依据。方法 收集南京市建邺区2015年6起疑似食物中毒的有关数据,运用实验室检测技术,进行致病菌分析。结果 84份样品中3份肛拭子检出金黄色葡萄球菌,1份食品检出金黄色葡萄球菌,未检出其他致病菌。结论 6起疑似食物中毒事件中,2起确定检测出金黄色葡萄球菌。食物中毒事件并非偶然,应加强监督和相应技术指导,减少此类食物中毒事件的发生。

关键词:食物中毒;金黄色葡萄球菌;细菌鉴定;实验室检测

南京市建邺区2015年全年共发生6起疑似食物中毒事件,2015年1月7日某幼儿园有十多名幼儿在食堂进食后发生伴有恶心、呕吐,腹泻,发烧等症状的食物中毒事件;4月28日我中心收到举报,十多人在某酒店聚餐后多人呕吐,腹泻;5月17日莫某在某熟食店买熟食回家进食,导致家人多发生腹泻;8月5日收到食物中毒投诉样品,在某酒店聚餐多人腹泻;10月16日某中学学生在食堂进食后,多名学生发生恶心,腹泻等食物中毒症状;10月19日某幼儿园在食堂进食后发生呕吐,腹泻等食物中毒症状。经流行病学调查,立即对可疑食物,生物样品和接触样本进行采集,检测,结果报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 六起疑似食物中毒事件中,刮取砧板表面残渣,采集厨师手表面样品共18份,均保存于生理盐水中送检;剩余食物31份;患者肛拭子35份,共计84份样品。

1.2试剂 BPW缓冲液,SC、TTB、BS、志贺增菌肉汤、XLD、3%氯化钠碱性蛋白胨水、7.5%氯化钠胰酪胨大豆肉汤、Baird-Parker、血平板、血浆凝固酶试剂和营养琼脂均为北京陆桥技术股份有限公司生产;副溶血型弧菌显色培养基、金黄色葡萄球菌显色培养基均为上海欣中生物工程有限公司生产;ATB 20E生化试剂条为法国梅里埃公司生产。以上试剂均在有效期内使用,并经过质量控制。金黄色葡萄球菌标准菌株(ATCC 25923)和血浆凝固酶阴性的表皮葡萄球菌(ATCC 26096)为江苏省疾病预防控制中心提供。

1.3主要仪器 ATB Expression自动细菌鉴定仪为法国梅里埃公司生产。

1.4检测方法 根据流行病学调查和临床表现主要检测沙门、志贺、金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌,检测方法按照《食品安全国家标准食品微生物学检验》GB/4789.4-2010、GB/4789.5-2012、GB/4789.10-2010、GB/4789.7-2013进行检验。

2 结果

2.1一般情况 1月7号某幼儿园送检的剩余食物和患者的肛拭子以及8月5日某饭店送检的患者肛拭子经分离后,在BP平板上可疑菌落直径为2~3 mm,颜色呈黑色,边缘为淡色,周围为一浑浊带,在其外层有一透明圈,用接种针接触菌落有似奶油状至树胶样的硬度;在血平板上可疑菌落较大,圆形、光滑凸起、湿润、金黄色,菌落周围可见完全透明溶血圈。

2.2细菌鉴定 从1份剩余食物样品和3份患者肛拭子样品中检出的可疑菌落均为革兰氏染色阳性葡萄状球菌,溶血(+),血浆凝固酶(+),API 32 STAPH鉴定为金黄色葡萄球菌(非常好的鉴定结果)%id=99.0/T=0.99,见图1。

图1 可疑金黄色葡萄球菌API 32 STAPH实验结果

注:URE:尿酶;ADH:精氨酸双水解酶;ODC:鸟氨酸脱羧酶;ESC:七叶灵(水解)GLU:葡萄糖;FRU:果糖;MNE:甘露糖;MAL:麦芽糖;LAC:乳糖(发酵);TRE:海藻糖;MAN:甘露醇;RAF:棉子糖;NIT:硝酸盐(还原);VP:产丙酮;βGAL:β-半乳糖苷酶;ArgA:精氨酸芳胺酶;PAL:碱性磷酸酶;PyrA:吡咯烷基芳胺酶;NOVO:新生霉素(抗性);SAC:蔗糖(发酵);NAG:N-乙酰葡糖胺;TUR:松二糖(发酵);ARA:阿拉伯糖(发酵);βGUR:β-葡糖醛酸酶;RIB:核糖;CEL:纤维二糖。

2.3检验结果 31份剩余食物中有1份检出金黄色葡萄球菌,占比3.2%;35份患者肛拭子中有3份检出金黄色葡萄球菌,占比8.6%;18份砧板及其他可能接触的物表未检出其他致病菌,所有样品均未检出沙门氏菌、志贺氏菌和副溶血性弧菌,见表1。

3 讨论

对于细菌性食物中毒,其通用检测流程,一般都根据患者的临床症状、流行病学特征等具体情况,而选择检测项目。但是由于实际上可能存在多种菌混合污染,个人差异和病原菌菌株不同的原因,导致食物中毒临床症状缺乏典型性,易造成漏检。应用细菌性食物中毒检测流程加上实验室的细菌鉴定,避免了上述不足,提高检测速度和检出率,为临床治疗和疫情的控制提供可靠的依据和赢得宝贵的时间[1]。同时,细菌鉴定能够确切的分析出病原菌的具体种属,这也为食物中毒确诊定性打下坚实的基础。

此次通过实验室检测,收集到的6起疑似食物中毒事情中,有2起确定检测出了金黄色葡萄球菌,检出率为33.3%。另外只在部分患者肛拭子中和1份剩余食物中检出病原菌。病原菌的检出率不够理想,若排除非食物中毒话,原因可能与现场被破坏、无剩余食物、患者用药治疗、未能采集到理想样本等因素有关。因此,要加强对经营户的卫生知识培训,供餐单位、消费者、食品卫生机构要紧密配合,做到食物中毒早发现、早报告、及时采样,以提高病原菌检出率,以更好地控制食物中毒的发生[2]。

本次检测出食物中毒的病原菌皆为金黄色葡萄球菌,且都在公共用餐的地点。由于金黄色葡萄球菌产生的耐热肠毒素经100℃煮沸30 min而不被破坏。一般餐饮烹饪加工只能杀死其菌体,不能灭活其毒素,当人们食物含肠毒素食品就可能会引起食物中毒[3]。另外,金黄色葡萄球菌在自然界广泛存在,其作为我国高发的细菌性食品中毒的病原菌,提示我们把关好食品源头,尤其是一些公共用餐的餐饮单位,要加强卫生控制,做好食品安全保障。食物中毒事件在本地区并非偶然发生,我们应高度重视,科学分析,加强监督和技术指导,减少此类食物中毒事件的发生[4-5]。

参考文献:

[1]俞志祥,陆秋明,陆巧荣,等.细菌鉴定仪在细菌性食物中毒检测中的应用[J].职业与健康,2007,23(12):1002-1003.

[2]黄丽琴,陈辉,黄锐敏,等.深圳市南山区2008年疑似细菌性食物中毒检测分析[J].中国热带医学,2009,9(11):2168.

[3]孟志明,封会茹,赵伟,等.金黄色葡萄球菌引起的食物中毒[J].当代医学,2008,14(22):71-72

[4]罗建平,方英,胡卓,等.株洲市细菌性食物中毒实验室检测结果分析[J].实用预防医学,2010,17(7):1441-1442.

[5]于京平,闫兆凤,李作宁.2010-2013年某地食物中毒事故分析[J].中国预防医学杂志,2015,16(8):659-670. 编辑/罗茗柯