儿童轮状病毒感染现状调查探讨
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轮状病毒(rotavirus，RV)感染引起的婴幼儿急性胃肠炎越来越受到重视，我国每年有近4万名儿童因RV感染导致的急性胃肠炎死亡，约占中国5岁以下儿童总死亡人数的12%。RV属于呼肠弧病毒成员，抗原血清组A，B和C都被认为是导致胃肠炎的致病原，其中A组是5岁以下儿童急性胃肠炎的主要致病原［1］。RV感染临床症状有很大差异，从无症状感染到严重脱水腹泻。研究表明RV能与其他病毒、细菌和寄生虫进行混合感染［2］。该病毒通过粪口、密切接触和污染物进行传播，其主要流行季节为冬季［3］。国内外针对RV肠炎流行病学调查的文献多限于某一区域范围，而各地区存在一定差异性，为了调查九江地区A组RV肠炎的流行情况及影响因素，特开展本项调查。
1对象和方法
1．1调查对象2012年11月至2014年12月在九江市妇幼保健院以急性胃肠炎收治的门诊及住院患儿。患儿诊断标准按照世界卫生组织(WorldHealthOrganization，WHO)指导原则［4］:排便次数在24h内大于或等于3次，大便性状改变(呈稀便、水样便、黏液样或稀糊样等)，排除标准:在纳入标本中排除脓血便，确诊为其他疾病(如肺炎、幼儿急疹等)患儿的粪便标本。所有患儿均采集粪便进行RV、诺瓦克病毒(norovirus)、腺病毒(adeno-virus)、星状病毒(Astrovirus)、致泻大肠埃希氏菌(DiarrheagenicEscherichiacoli)、志贺氏菌(Shigellaspp)、沙门氏菌(Salmonella)检查。粪便样本保存在无菌容器中并贮存在－20℃的专用冰箱内，3d内检测。粪便样本RV检出阳性的患儿为病例组，阴性的患儿为对照组。1．2检测方法1．2．1病毒检测方法采用酶联免疫吸附实验(Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)检测RV抗原，RV的ELISA阳性样品通过逆转录聚合酶链反应(RT－PCR)进行基因分型，来确定G(VP7)和P(VP4)基因型［4］。采用RT－PCR检测诺瓦克病毒病毒和星状病毒，采用PCR检测肠道腺病毒。1．2．2细菌检测方法致泻大肠埃希氏菌、志贺氏菌、沙门氏菌的检测和鉴定通过常规培养程序［5］进行。1．3问卷调查采用自行设计的调查表，在患儿就诊期间对患儿基本情况及临床表现进行调查和登记，调查员均经过统一培训。调查表项目包括基本信息项目(年龄、性别、居住地)，临床表现(发热、呕吐、呕吐腹泻次数、脱水情况及入院前抗生素使用情况)。1．4统计分析数据录入Excel2007，采用SPSS17．0软件进行统计分析，率的比较用卡方检验，检验水准:α=0．05。
2结果
2．1感染基本情况共调查2148名患儿，每名患儿均采集粪便。患儿年龄中位数为5．6个月(0～60个月)。男性占59．1%(1269/2148)，女性占40．9%(879/2148)。2148份粪便样品中，1522份样品检测出病原体，占70．9%。病原体检出率分别为:RV29．0%(623/2148)、致泻大肠埃希氏菌16．8%(361/2148)、志贺氏菌4．4%(94/2148)、沙门氏菌4．1%(88/2148)、其他细菌7．8%(167/2148);检测到的其它病毒包括腺病毒6．4%(137/2148)，星状病毒4．5%(97/2148)和诺瓦克病毒8．2%(176/2148)。RV阳性病例中男孩检出率33．0%(419/1269)，女孩检出率23．2%(204/879)，不同性别间病毒检出差异有统计学意义(χ2=24．27，P=0．00)。RV阳性患儿通常伴随有混合感染，混合感染所占的比率为35．5%(221/623)，其中细菌感染比例最高，占21．0%(131/623)。见表1。2．2临床表现RV感染的所有患儿均有腹泻症状，平均持续时间为4．15d，84．3%(525/623)感染RV的患儿腹泻水样便，腹泻在24h内超过3次的占75．1%(468/623)。其次是呕吐，占52．6%(328/623)，在24h内呕吐超过3次的占36．1%(225/623)。RV阳性患儿其他症状还包括发热、上呼吸道感染和脱水。病例组和对照组患儿临床症状差异均有统计学意义(P＜0．05)。见表2。20．6%(443/2148)的患儿在入院前口服过抗生素，主要口服的抗生素包括阿莫西林，占4．6%(99/2148);阿奇霉素占4．0%(86/2148);头孢拉定占3．5%(75/2148);氟哌酸占2．2%(47/2148);以及其他药物(不能具体说出名称)占6．3%(136/2148)。
3讨论
调查结果表明，患儿中RV检出率29．0%，这与文献［6－7］报道结果类似。本文显示RV感染组患儿的腹泻、呕吐次数及脱水情况发生率均高于对照组，因RV主要经粪－口传播，故做好儿童的手卫生，对减少腹泻病原体的感染具有较大意义。随着对RV感染研究的不断进展，病毒混合感染越来越受到人们的重视。调查结果显示，RV阳性患儿常伴随其他病毒和细菌感染，检出率为35．5%，高于文献［6］报道结果。混合感染的因素包括常见的肠道致病菌和其他肠道病毒，国外文献还显示存在寄生虫感染［8－9］。肠道的微生态菌群可以抑制病原体过度繁殖，对宿主的健康、营养和免疫等方面都发挥着重要作用，当RV感染时会引起机体肠道菌群失调［10］，导致其合并肠道细菌感染的几率增加;同样，肠道细菌感染时也会因细菌感染本身或应用抗生素引起菌群失调，而导致其合并RV感染的几率增加，从而使病情进一步加重，甚至迁延不愈。本项研究表明20．6%的患儿就医前在出现腹泻，呕吐或者上感症状时服用过抗生素，并且患儿监护人普遍缺乏抗生素相关知识，这可能会导致细菌的检出率偏低，从而间接的增加了肠道感染病原体中病毒的构成比例，容易出现抗生素相关性腹泻(AAD)，AAD的机制复杂，目前认为主要是由于抗生素的滥用破坏了肠道菌群的生态平衡而引起的。在婴幼儿时期，由于肠道菌群分布不均匀和不稳定，血清免疫球蛋白和胃肠道分泌型IgA均较低，当婴幼儿患病时，其肠道菌群的稳定性进一步下降，容易引发AAD［11］。
作者：熊飞宇 叶韶勤 贺娟