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食用菌菌种在培养过程中均会不同程度的发生诸如绿霉、青霉、曲霉、根霉、毛霉以及细菌等杂菌污染,高温季节尤为严重。生产过程中由于杂菌的侵害,往往会引起减产甚至绝收。因此,寻找杂菌污染的原因,对于提高栽培的成功率和提高经济效益具有重要的意义。正常情况下,二级菌种和三级菌种的污染率在5%以下,如果超出了这一范围,就需要我们查找原因了。造成菌种污染的原因如下:
(1)灭菌不彻底:培养料灭菌不彻底会造成杂菌污染,一般3~5天即可出现污染现象。而灭菌不彻底也是由于下列几个原因引起的:
①霉菌操作不当:一般杂菌的菌丝体与孢子经过常压100℃、6~8小时或121℃、0.5~2小时均能杀死。目前食用菌培养料往往采用常压灭菌法或高压灭菌法。常压灭菌对谷粒、粪草等材料的灭菌难度较大,不容易完全达到灭菌的效果;而高压灭菌法效果则要好得多。采用高压灭菌时,关键是把锅内冷空气排尽,否则,锅内不能达到饱和的蒸汽压,灭菌的温度也达不到要求。采用常压灭菌时,灭菌仓的周围最好砌成圆形,以便灶内升温均匀,灶顶砌成圆拱形,这样冷凝水沿四壁下流而不会打湿菌种瓶(袋)。另外蒸汽不足、温度不高等也是常压灭菌不彻底的因素。
②培养料性质的影响:制种所需材料的种类、培养料中的含菌量、含水量以及酸碱度等都能影响灭菌效果。灭菌时,要根据培养料配方的不同,选择相应的灭菌时间。选用的培养料一定要新鲜无霉变。从培养料灭菌前微生物含量来看,微生物数量越高则灭菌时间越长,反之则短,所以培养料配制完毕后必须及时灭菌,装袋后的菌种千万不要过夜后再上锅灭菌,以免微生物大量繁殖,导致料内的含菌量升高,并且会造成料中营养损失。水的热传导性能比木屑、粪草等固体要强,如果培养料内水分均匀适宜,则灭菌效果好。培养料中应避免出现“夹心料”(即培养料中含有未吸水的干料)。灭菌锅内的蒸汽对夹心料的穿透能力较弱,容易出现灭菌死角,达不到灭菌的目的。另外,培养料的酸碱度也影响灭菌的效果,偏酸的培养料比中性和偏碱性的灭菌时间要短。
③菌种瓶(袋)堆放不当:菌种瓶(袋)在灭菌锅内的堆放形式可影响灭菌的效果。在排放时要留有一定的空隙,以便蒸汽的流通和升温。对菌种袋装的培养料灭菌时,由于塑料袋受热后容易变形变软,如装料不紧,叠压堆放时则菌袋之间的空隙会减少,影响灭菌的效果。
④菌种瓶或菌种袋的影响:制种时一般选择菌种瓶或菌种袋。塑料袋传热速度快,而玻璃瓶则传热速度慢,在相同培养料,使用相同的灭菌方法时,瓶装料要比袋装料灭菌时间稍长一些。另外,个别容器密封不严或细小破损,也可以导致杂菌的污染。
(2)接种操作不规范:食用菌接种过程需要严格的无菌操作,如操作不规范则极易造成培养料的杂菌污染。污染的杂菌一般是接种室空气中杂菌、菌袋表面的杂菌以及接种人员的体表杂菌等。操作不规范引起培养料污染的特点,是杂菌在培养料表面生长,一般发生在菌袋开口处以及接种处。因此必须要严格遵守无菌操作规程,接种室要用“菌室专用消毒王”进行严格的消毒处理。
(3)菌种带杂菌:用于扩大培养的原种本身必须是纯菌,这样才能保证菌种的单一性。如果菌种本身不纯,可造成批量污染,生产中的一批菌种中,集中在一起的菌种都出现污染,而且污染的部位在菌种块处,污染出现较早,接种3~5天即可出现。因此我们在制种时应尽量采用生命力强、菌龄适宜、抗逆性强的优良菌种原种。
(4)培养室不洁净:培养料不洁净、空气不流通、室内潮湿,也可感染杂菌。这种情况下污染率相对较低,但随着培养时间的延长,污染率会逐渐增加。大量污染出现比较晚,一般在接种10天后出现。