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[摘要] 目的:用硫酸滴定法测定血浆(血清)中二氧化碳结合力。方法:用0.019 15 N硫酸滴定血浆(血清)中二氧化碳结合力,从1 ml刻度吸管中直接读出结果,并将结果与全自动分析仪测定结果比较。结果:反应终点颜色变化易于掌握,40份标本分别用该法及朗道240全自动分析仪酶法测定,两种方法相比较差异无显著性(t=1.267,P>0.05)。结论:硫酸滴定法简便,快速,准确且反应终点颜色变化易于掌握,很适合急诊化验。
[关键词] 二氧化碳结合力;硫酸滴定法;血浆
Sulphuric acid titration for the plasma(serum)CO2?combining power determination
Abstract:Objective To use sulphuric acid titration for the plasma(serum)CO2?combining power(CO2?CP) determination.Methods To determinate plasma(serum)CO2?CP with 0.01915N H2SO4 and read the results from one millilitre gradual pipette directly and compage the results of the titration with the results of automatic instrument.Results The colour change of reaction endpoint is recognized so easily,concentration of plasma(serum)CO2?CP of 40 samples was determined by enzymatic assay with RANDOX 240 instrument and by the titration respectively.There was no significant difference between the date obtained from the two nethods.Conclusion Sulphuric acid titration is smiple,fast,accurate and colour change of reaction endpoint is sharp,suitable for urgent test.
Key words:CO2?combining power;Sulphuric acid titration;Plasma
鉴于应用盐酸滴定法测定血浆(血清)。二氧化碳结合力终点难于掌握,我们采用硫酸[1]代替盐酸来测定血浆(血清)二氧化碳结合力。其原理:2NaHCO3+H2SO4Na2SO4+2H2CO3H2O+CO2 结果计算公式:血浆二氧化碳结合力ml%=0.01 NH2SO4毫升数×115.8(实验常数)。为了工作方便,我们将硫酸的浓度改变了2次,现介绍如下。
1 材料和方法
1.1 样本来源 40例标本来自门诊和住院患者。
1.2 二氧化碳结合力滴定法测定
1.2.1 试剂 0.04%甲基红指示剂取甲基红40 mg加0.1N NaOH 1.48 ml搅溶或研溶后加水至100 ml,盛于棕色瓶紧塞备用;0.019 15N H2SO4;pH 5.5缓冲液:精确称取KH2PO4 8.691 4 g,Na2HPO4 0.405 3 g,置1 000 ml量瓶中加水溶解后稀释至刻度;生理盐水。以上所有试剂均冰箱保存。
1.2.2 方法 取中试管2支,标明测定管及对照管,各管加入甲基红指示剂1滴。测定管中加入新鲜血清0.1 ml,生理盐水0.5 ml。对照管中加入pH 5.5缓冲液1 ml。将两管分别混匀,用1 ml刻度吸管将硫酸逐滴加入测定管中,滴至与对照管同样颜色为终点。
1.2.3 计算用0.01N H2SO4滴定,报告结果 消耗H2SO4毫升数×115.8(实验常数),单位ml%。为了方便计算,我们根据N1V1=N2V2公式,即0.01×100=N2×115.8,则N2=0.008 6 N,式中100相当于1 ml刻度吸管的100个刻度,所以用0.008 6N H2SO4滴定,可以根据消耗的H2SO4刻度数直接读出结果,此结果单位仍为ml%。若以mmol/L为单位,那么换算公式为:血浆(血清)二氧化碳结合力mmol/L=硫酸消耗ml数×换算系数44.9,还需要乘以一个系数,我们采用同样方法改变硫酸的浓度,即根据N1V1=N2V2公式,0.008 6×100=N2×44.9,则N2=0.019 15 N,用0.019 15N H2SO4滴定,根据吸管液面下降的刻度数直接读出结果。
1.3 二氧化碳结合力酶法测定 使用RANDOX 240全自动生化分析仪以及原装试剂盒,CD 127定标液及HN 1530质控品由北京九强公司提供,亦为原装,按照公司规定的程序作检测。
1.4 统计学处理 计量资料以±s表示,应用两样本均数比较的t检验进行显著性假设检验。
2 结果
2.1 比较试验 取40份标本,分别用滴定法和酶法测定血浆(血清)中二氧化碳结合力,滴定法结果为(25.99±2.29) mmol/L,酶法结果为(26.55±2.25) mmol/L。两种方法相比较差异无显著性(t=1.103,P>0.05)。
2.2 滴定终点观察 颜色变化由黄色橙色易于识别。
2.3 计算方便 从1 ml刻度吸管中直接读取结果。
3 讨论
硫酸滴定法应用十余年来,能满足临床需要,滴定终点易于识别,且该方法快速、准确,很适用于急诊检验,而盐酸滴定法终点颜色变化由有色无色,难于掌握,经常过量,我们认为还是用硫酸滴定法效果好。
参考文献:
[1] 崔永熙,王晓玉.血气分析与酸碱平衡诊断试验.见:李影林,主编.中华医学检验全书[M].第1版.北京:人民卫生出版社,1996:805.