果汁中展青霉素的高效液相色谱检测方法

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇果汁中展青霉素的高效液相色谱检测方法范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

[摘 要]本实验采用高效液相色谱法分析测定苹果汁饮料中展青霉素的含量。果汁饮料经过乙腈萃取，过小柱净化、浓缩、用流动相定容，然后用高效液相色谱仪测定其含量。本方法加标回收率在88.3%-92.1%之间，线性系数0.998，检出限可达8μg/L，精密度 0.84%，完全能够满足分析要求，可广泛应用于果汁中展青霉素的测定。

[关键词]苹果汁；展青霉素；高效液相色谱

中图分类号：TS255 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）46-0086-01

展青霉素又称棒曲霉素，它是多种真菌产生的一种次级代谢产物，毒理学试验表明，展青霉素具有影响生育和免疫系统的毒理作用，严重的还会致癌，同时还是一种神经毒素。展青霉素具有致畸性，导致呼吸和泌尿等系统的损害，使人神经麻痹、肺水肿、肾功能衰竭。展青霉素首先在霉烂苹果和苹果汁中发现，广泛存在于各种霉变水果和青贮饲料中。本实验采用高效液相色谱法对苹果汁中的展青霉素进行了测定。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂材料

仪器：Agilent1200高效液相色谱仪配有紫外检测器，分析天平：感量为0.1mg，漩涡振荡器，氮吹仪。

试剂材料：乙腈、四氢呋喃为色谱纯，水为一级超纯水。Thermo C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），MycoSep？228 AflaPat净化柱，展青霉素标准溶液：0.1mg/mL，0-4℃条件下贮存，羟甲基糠醛标准物质。

1.2 标准溶液配制

展青霉素标准贮备液：准确移取1.00mL展青霉素标准溶液于10mL容量瓶中，用乙腈稀释定容，充分混匀。该溶液的浓度为10.0μg/mL，有效期6个月；羟甲基糠醛标准贮备液：准确称取0.02g羟甲基糠醛于小烧杯中，用甲醇定容至100mL，混匀，该溶液浓度为0.2mg/mL，置于0-4℃冰箱中保存，有效期6个月；羟甲基糠醛标准工作液：准确吸取1.0mL羟甲基糠醛标准贮备液，用甲醇稀释定容至l0mL，混匀，该溶液浓度为20.0μg/mL，置于0-4℃冰箱中保存，有效期2周。展青霉素混合标准工作液：分别移取1.00mL展青霉素标准贮备液和1.00mL羟甲基糠醛标准工作液于离心管中，氮吹至近干，用流动相定容至10mL容量瓶中，两者浓度分别为1.0μg/mL和2.0μg/mL，置于0-4℃冰箱中保存，有效期2周。

1.3 色谱条件

色谱柱：Thermo C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相：0.8%四氢呋喃水溶液，流速：0.8mL/min，检测波长：276nm，柱温：30℃，进样量：10μL。

1.4 样品处理

准确移取4mL苹果汁于50mL具塞试管中，加入21mL乙腈，在漩涡振荡器上振荡2min，静置分层，移取上清液10mL于试管中，过Mycrosep228AflaPat净化柱，收集净化液，准确移取5mL于试管中，40℃条件下用氮气吹至近干，加入1.0mL0.8%的四氢呋喃水溶液混匀，过滤膜进样。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线的绘制

配置如表1浓度梯度的展青霉素标准溶液，每个浓度测定3次，取平均值做标准曲线。

2.2 检出限测定

选取较为平缓的一段基线作为参比，放大后，记录基线噪音峰的高度，然后稀释样品，当样品峰高大约是噪音峰高的三倍时，得到该方法的检出限为8μg/L。

2.3 精密度实验

采用在空白样品中加入标准溶液的方法做精密度实验，即在苹果汁中加入展青霉素标准溶液连续进样6次，检测结果见表2。

2.4 回收率实验

在空白样品中添加不同浓度的展青霉素标准溶液，分别为0.4μg/mL 、0.6μg/mL、0.8μg/mL，按照样品处理方法进行测定，计算回收率，见表3，苹果汁饮料回收率为88.3-92.1%，符合要求，结果满意。

3 结论

本实验采用高效液相色谱法分析检测苹果汁饮料中展青霉素的含量，分析简便快速，可操作性强，数据准确可靠。样品加标回收率在88.3-92.1%之间，线性相关系数0.998，精密度0.84%，检出限可达8μg/L，完全能够满足果汁中展青霉素的测定要求。