苹果汁中菌落总数测定结果不确定度评定

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[摘 要]测量不确定度是对测量结果可疑程度的一种定理表述，为减小实验误差，提高检测精确度，我们分析了饮料中菌落总数测量不确定的来源，评定了由重复性测量的分散性引起的测量不确定度.测量结果显示扩不确定度为0.0633。

[关键词]不确定度；果汁；菌落总数；评定

中图分类号：R155.5 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）46-0089-01

即食类食品中的菌落总数是评价食品受污染状况的一个重要指标，菌落总数超标可能危害消费者健康。食品中菌落总数的限量是食品卫生标准中的重要指标之一。因此对食品中菌落总数进行测量不确定度的评定非常必要。目前GB4789.2-2010是食品中菌落总数测定的标准方法[1]，本文根据国家计量技术规范JJF1059.1-2012对食品菌落总数的测量不确定度进行了评定[2]，同时参考了相关文献[3-4]。

1 材料与方法

1.1 备

恒温培养箱、经灭菌的实验用品：刻度吸管10ml（具0.1ml刻度）、微量移液器、锥形瓶、培养皿。

1.2 培养基及试剂

平板计数琼脂、无菌生理盐水。

1.3 样品

变质的苹果汁。

1.4 检验及分析计算

1.4.1 依据

GB4789.2-2010《安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》。

1.4.2 步骤

定量吸取果汁，制备成15份均匀的检测样品，每份样品做两个平行样，按照GB4789.2-2010步骤进行。

1.4.3 不确定度来源分析

检测步骤主要包括样品的取样、稀释（移液器）、培养、计数、及结果修约等，由于微生物检验结果有较大的发散性，在本次实验中，只对样品吸取、重复测定结果的不确定度进行分析。（如表1）

（a）样品吸取过程中使用刻度吸管体积的相对标准不确定度urel（V）。

（b）吸管体积校准引入的标准不确定度u（V）。

在吸取样品的过程中均使用经检定合格的10ml刻度吸管，其允许误差为±0.05ml，故10ml吸管体积校准引起的不确定度按矩形分布（k=）为：

u1（V）==0.029ml；

则样品吸取过程中使用刻度吸管体积的相对标准不确定度：

urel（V）===0.0029ml；

（c）重复测定结果的标准不确定度

菌落总数测定结果不确定度评定

（d）对测定结果X1、X2分别取对数，得到lgX1和lgX2

每一个样品的残差（在重复性条件下得出n个观测结果Xk与n次独立观测结

果的算术平均值的差）平方和：

式中：―每一个样品测定结果的对数值；

―每一个样品测定结果对数的平均值。

根据JJF―2012.1《测量不确定度评定与表示》中4.3，计算15个样品的合并标准偏差：

式中：m―测定样品总个数，本次实验共15个；

n―对每个样品的独立测定次数，本次实验每个样品平行测定两次。

将残差平方和、m、n的值代入上式得15个样品的合并标准偏差：

==0.04173

每个样品测定两次，则两次重复测定平均值的标准不确定度为：

式中：n―重复测定次数

=0.02951

（e）合成标准不确定度

U（X）=0.0297

2.结果与讨论

根据置信区间p=95%，自由度v=14，由t分布表得k≈2.13，则扩展不确定度为：U=2.13×0.0297=0.0633。

以区间形式表示15组样品所有结果的lg平均值为：lgX=3.3941，所以该样品菌落总数的lg值为3.3941±0.0633，即3.3308～3.4574之间，取反对数得样品稀释液中菌落总数分布于2100～2900之间。

结果报告：该样品菌落总数测试结果可估算为（2100～2900）cfu/ml。

菌落总数检测结果的有较大的发散性，有的结果可相差数倍甚至几十倍，食品监督抽查检验有明确规定，微生物项目不得复检。因此当微生物检测结果在合格判定临界值时，为了对检验结果的准确判定，对检测结果进行不确定度评定是非常必要的。由于影响不确定度评定因素多，结果影响很大，因此，菌落总数不确定度评定仍需进一步探索。

参考文献

[1] GB4789.2-2010食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定[S].北京：中国标准出版社，2010.

[2] JJF1059.1-2012测量不确定度评定与表示[S].北京：中国标准出版社，2013.

[3] 李玉玲，宋莉莉.食品微生物学菌落总数检验中不确定度的评定[J].中华卫生检验杂志，2005，15（7）：880-897.

[4] 李慎安.测量不确定度表达百问[M].北京：中国计量出版社，2001：110-115.