软枣猕猴桃种苗快速繁育技术研究
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摘要 利用组织培养技术，对比多种培养基中软枣猕猴桃的生长，选出最适合软枣猕猴桃生长的培养基为培养基④1/2MS+IBA 0.5 mg/L+糖20 g/L，以期对软枣猕猴桃的快速繁殖提供一定的帮助。
关键词 软枣猕猴桃；组织培养；快速繁殖
中图分类号 S663.4 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）09-0073-0
1 材料与方法
1.1 基本培养基的配制
1.1.1 基本培养基母液的配制。在组织培养中，基本培养基的母液有4种：大量元素、微量元素、铁盐以及除蔗糖外的有机物。大量元素母液成分：NH4NO3 1 650 mg/L、KNO3 1 900 mg/L、KH2PO4 170 mg/L、MgSO4・7H2O 370 mg/L。微量元素母液成分：MnSO4・4H2O 22.3 mg/L、ZnSO4・7H2O 8.69 mg/L、H3BO3 6.2 mg/L、KI 0.83 mg/L、Na2MoO4・2H2O 0.25 mg/L、CoCl2・6H2O 0.025 mg/L、CuSO4・5H2O 0.025 mg/L。
铁盐母液成分：FeSO4・7H2O 27.8 mg/L、Na2-EDTA 37.3 mg/L。有机物母液成分：肌醇100 mg/L；烟酸（V）0.5 mg/L；盐酸硫胺素（V）0.1 mg/L；盐酸吡哆醇（V）0.5 mg/L；甘氨酸2.0 mg/L。
1.1.2 生长调节物质母液的配制。基本培养基确定后，母液配制完成，按照选定的试验配方制作培养基。细胞分裂素的选定：将生长素选定为IBA 0.2 mg/L，糖30 g/L，做以下培养基备用：①MS+BA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L；②MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L；③MS+BA 0.8 mg/L+IBA 0.2 mg/L；④MS+ZT 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑤MS+ZT 0.8 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑥MS+ZT 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑦MS+KT 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑧MS+KT 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L；⑨MS+KT 0.8 mg/L+IBA 0.2 mg/L。
1.2 接种
接种材料先经过表面消毒后灭菌处理后经无菌操作程序转接到培养基上的过程就叫接种；最初接种的材料就叫做外植体[1-3]。消毒的具体方法如下：一是刷洗冲洗材料（外植体）。将采来的外植体去除不用的部分，把需要的部分用适当的软毛刷在流水下冲洗干净，必要时可以用少量的洗衣粉。二是外植体的表面消毒灭菌。这一步骤要在超净工作台上进行（超净工作台在使用时要提前开机10 min），准备灭菌溶液，无菌水。把处理好的外植体放入烧杯中，倒入事先准备好的消毒液，轻轻晃动，不使液体外溅，按照规定的时间倒出消毒液，加入无菌水清洗，清洗3次即可，消毒好的外植体准备接种[4-6]。三是按要求将消毒好的外植体分别接种在准备好的培养基里，每个培养基接种200瓶，共16 800瓶。每瓶接种2点，分别将其编号，然后放在培养室内观察其变化。其他附属条件（如温度、光照、pH值等）均一致。10 d后去除污染，15 d后开始观察记录。观察结果：经过观察发现，软枣猕猴桃在含有分裂素ZT的培养基中表现明显好于其他2种分裂素，KT表现最差，长势最好的培养基为⑥MS+ZT 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L，能够分化较多较正常的芽，没有玻璃化现象，没有褐变，因此软枣猕猴桃组织培养的最适培养基为MS+ZT 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L糖30 g/L。
2 结果与分析
2.1 继代培养基的选定
将诱导好的芽转接在诱导培养基中，出现了玻璃化现象且芽节间未伸长，因此在继代过程中应将分裂素浓度降低，在培养基中添加了赤霉素（GA3）根据这些性状做以下继代培养基试验：①MS+ZT 0.3 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA 30.2 mg/L；②MS+ZT 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA 30.2 mg/L；③MS+ZT 0.1 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA 30.2 mg/L+糖30 g/L。
经过观察表明：在试验②培养基中长势好，能分化较多较壮的苗，而且节间伸长明显，因此，软枣猕猴桃组织培养的最适继代（扩繁）培养基为MS+ZT 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA 30.2 mg/L+糖30 g/L。
2.2 生根培养基的选定
组培苗在生根前要提高生长素浓度，让瓶苗变得粗壮，确保生根苗的质量，同时要降低无机盐浓度，促进生根。根据观察苗的长势情况，做生根培养基试验分别为①1/2MS+ZT 0.01 mg/L+IBA 0.2 mg/L+糖20 g/L；②1/2MS+IBA 0.2 mg/L；③1/2MS+IBA 0.3 mg/L；④1/2MS+IBA 0.5 mg/L。
3 结论
通过观察发现，在培养基④1/2MS+IBA 0.5 mg/L+糖20 g/L中能够分化出2～4条正常的根系，生根率100%，能够达到移栽标准，因此最适软枣猕猴桃组培苗生根的培养基是1/2MS+IBA 0.5 mg/L+糖20 g/L。组培苗生好根后，就可以驯化移栽，从而得到优质的种苗。
4 参考文献
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