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新生儿脐带血CD4+CD25high调节性T细胞Foxp3的表达探析

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【摘要】 目的:对新生儿脐带血cd4+cd25high细胞中调节性Treg细胞foxp3表达进行研究。方法:采用密度梯度离心法提取新生儿(A组)脐带与成年人(B组)外周血液中的单个细胞核后,使用流式细胞仪测定CD4+CD25high细胞中的Treg细胞数量,并对细胞内的转录因子(Foxp3)进行检测,并记录检测结果。结果: A组CD3+CD4+细胞中Treg细胞所占比例为(3.86±1.63)%,明显高于B组的(0.87±0.74)%;A组Treg细胞中表达Foxp3的比例为(23.21±8.9)%,明显低于B组的(71.3±11.6)%,差异均有统计学意义(P

【关键词】 新生儿; CD4+CD25high; Treg细胞; Foxp3

doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2013.14.074

研究发现,成年人人体外周血液中含有CD4+细胞,CD4+细胞中存在着可对人体免疫进行调节的Treg细胞,Treg细胞对维持人体内部运作、提升人体免疫力具有着十分重要的作用[1-2]。且最新研究也发现,Foxp3对人体Treg细胞的发育生长以及功能的表达具有十分重要的意义,但目前医学界对Treg细胞的发育与成熟,以及其功能的实现机制尚不明确[3-4]。为了进一步了解Treg细胞的生长发育特点,笔者对这一课题进行了深入的研究,将新生儿脐带血与成年人外周血中Treg细胞的Foxp3表达进行了测定,现将测定结果报道如下[5-6]。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2011年后接生的30例健康足月新生儿为A组,其中女婴14例,男婴16例;同时选取30例健康成年人为B组,年龄20~30岁,分别采集A组脐带血和B组外周血,所有血液在采集后均在4 h内送至实验室进行测定。

1.2 方法 采用密度梯度离心法提取新生儿脐带与成年人外周血液中的单个细胞核后,使用流式细胞仪测定CD4+CD25high细胞中的Treg细胞数量,并对细胞内的转录因子(Foxp3)进行检测,并记录检测结果。

1.3 统计学处理 本文所有数据均采用IBMSPSS 20.0软件进行分析,计量资料以(x±s)表示,采用t检验,P

2 结果

2.1 流式细胞测定 A组血液样本的CD4+Treg细胞中CD25细胞阴性与阳性的分界十分清晰,在图1中形成了两个明显区别的群体,而B组血液样本中的分界则不清晰,呈现出过渡状态。

2.2 CD4+CD25highTreg细胞比例 按照表达强度的高低,通

图1 两组血液样本流式细胞测定结果对比图

常将CD25阳性细胞分为CD25high(高表达)和CD25int(低/中表达)两种,CD25high为Treg细胞[8],发现A组血液样本中CD4+CD25high细胞占CD3+CD4+Treg细胞的比例明显高于B组,如表1所示。

3 讨论

通过上文研究证明:新生儿脐带血的CD25细胞阴性与阳性的分界十分清晰,而成年人外周血液样本中则表现为一个具有连续性的整体[9]。此外,新生儿脐带血中CD4+细胞的CD25high与CD25int的Treg细胞也存在着十分清晰的分界,且在数量上明显高于成年人外周血[10]。因此,虽然新生儿脐带血中CD4+CD25high的细胞数量较高,但新生儿Foxp3细胞相对于成年人却相对较低,这也进一步说明新生儿Treg细胞的Foxp3表达能力尚未完全发育并未成熟[11]。而深入的研究如何将新生儿Treg细胞诱导成熟,对提高新生儿自身免疫力具有重要的意义,也必将成为进一步研究Treg细胞的主要思路。

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(收稿日期:2012-12-04) (本文编辑:陈丹云)