手术中围肝门部血管急症的治疗要点

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作者：蔡逸婷 谢松业 丁莉莉 【关键词】 红斑狼疮

【摘要】 目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者血清中的抗核抗体（ANA）各种荧光核型及其与抗双链DNA（dsDNA）抗体指标的关系。方法 采用间接免疫荧光法检测56例SLE患者血清中ANA，ELISA方法检测抗dsDNA抗体。结果 检测56例SLE患者，其中45例ANA为均质型，11例为颗粒型，前者占患者的80%。但两型统计学上差异无显著性。其中45例均质型患者抗dsDNA抗体浓度均>30IU/ml，与颗粒型患者抗dsDNA抗体浓度间统计学Ridit分析差异有显著性（P<0.05），且抗dsDNA抗体含量与均质型的荧光强度呈正比。结论 检测ANA的核型表达，同时测定抗dsDNA抗体，可以动态地观察抗体滴度变化情况，为监测治疗提供有效的依据。

关键词 系统性红斑狼疮 抗核抗体 抗双链DNA抗体 酶免疫荧光 荧光核型 酶免疫吸附 .

【Abstract】 Objective To explore the ANA fluorescence patterns in serum of patients suffered systemic lupus erythermatosus（SLE）and investigate the relationship with anti-dsDNA concentration.Methods ANA was detected by indirect immunofluorescence assay（ⅡFA），anti-dsDNA was detected by ELISA in56SLE patients.Results There are45cases of homogeneous cases，which comprise80%of the56total casesand11granular cases.But there is no significant difference between the two patterns.The anti-dsDNA concentrations of the45patients with homogeˉneous pattern are higher than30IU/ml，which is significantly different with the anti-dsDNA concentrations of patients with granular pattern and the anti-dsDNA concentration increases in proportion to the florescent intensity of homogeˉneous pattern.Conclusion Detecting ANA patterns，combined with the determination of anti-dsDNA concentrations can observe the alteration of the antibody titer dynamically，which is useful for monitoring the effectiveness of treatment in SLE patients.

Key words SLE ANA anti-dsDNA enzyme immunofluorescence fluorescence pattern ELISA

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）属于自身免疫性疾病，女性发病率较高，过去采用狼疮细胞涂片检查和自身抗体检测等方法，结果特异性和敏感性均不满意。近年来出现许多新的检测方法，本文采用欧蒙公司提供的酶联免疫荧光化学试剂检测SLE患者血清中抗核抗体（ANA），通过观察其阳性的核型定位和形态，同时用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法定量检测dsDNA抗体，从中探讨荧光核型与抗dsDNA抗体之间的关系。

1资料与方法

1.1 标本来源 本院住院或门诊确诊SLE患者共56例，其中女54例，男2例。年龄11～81岁，平均40岁。

1.2 操作方法

1.2.1 抗核抗体（ANA）的检测 采用欧蒙公司提供的试剂盒（批号:T30607H），间接免疫荧光法:将患者血清以1:100、1:250、1:500、1:1000稀释后滴加于包被有HEp-2细胞的膜条上，血清中的特异性抗体与固相上细胞中的抗原结合，再滴加荧光素标记的抗人抗体，与已经结合的抗体反应，若血清中有特异性的抗体，呈现特异性的荧光，荧光显微镜下观察，荧光强度与抗体滴度相关。

1.2.2 抗dsDNA抗体的检测 采用BINDAZYME提供的试剂盒（批号:075122C），ELISA法:将患者血清稀释后滴加于包被有dsDNA抗原的微孔内，抗原与血清中的特异性抗体结合，再滴加纯化的过氧化物酶标记的兔抗IgG抗体，与已被俘获的自身抗体结合，显色的深浅与自身抗体的含量呈一定比例关系。

1.2.3 统计学方法 采用按等级分组Ridit法（参照单位分析）。

2 结果

2.1 结果判断 ANA反应性:阴性，1:100无荧光反应。阳性，滴度1:100或更高，可见到清晰的荧光核型。荧光核型可分为均质型、颗粒型、混合型。其中混合型又分为三种即均质型和颗粒型混合，均质型和核膜型混合，均质型和抗着丝点型混合。抗dsDNA抗体:<30IU/ml，阴性;30～75IU/ml，临界值;>75IU/ml，阳性。

2.2 结果 所有SLE病例ANA滴度均>1:100为阳性，其中抗体滴度≥1:1000的病例有48例，1:500的病例有6例，1:250的病例有2例。在Hep-2细胞上显示细胞核的荧光核型均质型14例，颗粒型11例，混合型31例。在混合型中，均质型/颗粒型的有27例，均质型/核膜型的有3例，均质型/抗着丝点型1例。具体结果见表1。

从表中可以看出，所有的56例ANA阳性的结果中，有45例ANA核型中存在均质型，占全部结果的80%。但以均 质型作为标准组做比较，95%平均Ridit可信区间均有重叠，说明ANA滴度与各型ANA之间差异无显著性。

在所有的56例标本中，有50例抗dsDNA抗体结果>30IU/ml，占89%，>75IU/ml的有40例，

占71%。与核型的关系见表2。

表1 各型ANA所得ANA滴度参照单位分析略

表2 各型ANA所得抗dsDNA抗体参照单位分析略

从表中可看出，50例抗dsDNA抗体>30IU/ml的结果中，共有45例ANA核型中存在均质型，占89%。其中42例抗dsDNA抗体大于75IU/ml的ANA核型全部存在均质型，且ANA滴度均大于1:1000，在10例抗dsDNA抗体的结果为30～75IU/ml中有5例ANA核型中存在均质型，另5例的核型为颗粒型，余下的6例dsDNA抗体结果小于30IU/ml的核型均为颗粒型。提示抗dsDNA抗体的含量与均质型的荧光强度呈正比。从统计学结果也显示含有均质型核型的高滴度的ANA检出的高抗dsDNA抗体结果人数确实比1:250滴度ANA及颗粒型人数多，差异有显著性（P<0.05）。

3 讨论

SLE作为女性中多发的自身免疫性疾病，可侵犯身体多脏器，影响累及脏器的功能，因而临床表现缺乏特异性，临床上常引起误诊和漏诊。准确特异的实验室诊断有助于明确

诊断。

SLE免疫学的显著特点为出现抗核抗体。其中抗dsDˉNA抗体最为特异，几乎仅在SLE病人中发现抗dsDNA抗体，因使用的实验方法和疾病活动度不同，其发生率为 60%～90%，在Hep-2细胞上显示为细胞核的均质型荧光 ［1］ 。从本实验可看出，在所有的56例SLE病人中有45例ANA核型中存在均质型，占全部结果的80%。统计学结果显示，95%平均Ridit可信区间均有重叠，说明差异无显著性。通过ELISA方法检测全部的45例抗dsDNA抗体结果均大于30IU/ml。依统计学的结果，95%平均Ridit可信区间非重叠说明有差别（P<0.05），显示核型中含有均质型的高滴度的ANA检出的抗dsDNA抗体高，结果确实比核型中含均质型的1:250滴度ANA及颗粒型差异有显著性。抗dsDNA抗体的含量与均质型的荧光强度呈正比。

值得注意的是，均质型的荧光核型不仅仅为抗dsDNA抗体所特有，另一种自身抗体-抗组蛋白抗体所表现出来的荧光核型也为均质型 ［1］ 。在实验中，我们也检测到临床诊断并非SLE的患者血清中出现高滴度的ANA均质型的荧光，但是用ELISA方法检测抗dsDNA抗体结果均小于30IU/ml。因此，ANA、抗dsDNA抗体联合检测，可用于鉴别诊断SLE与其它疾病。

SLE的实验室诊断原先多采用形态学检查，特异性和阳性率较低，现已基本弃用。免疫电泳等方法虽然阳性率有所提高，但操作较复杂，结果重复性也偏低。近年来采用免疫化学的方法检测血液中的抗体，其结果的敏感性和准确性明显提高，侯丽燕等 ［2］ 采用胶体金快速斑点渗滤技术（DIGFA）检测dsDNA抗体，并和马疫锥虫间接荧光抗体染色比较，二者之间的阳性符合率为94.44%，而阴性符合率达100%。董巍等 ［3］ 采用ELISA的方法测定血液中dsDNA的水平，结果表明ELISA方法不仅可以定量检测血清中dsˉDNA抗体，同时和其他方法比较具有较好的一致性，可以替代其他方法作为临床检测试验。我们所采用的免疫荧光方法检测ANA由欧蒙公司提供，通过观察其阳性结果的核型表达，结合ELISA方法定量测定抗dsDNA抗体，可以动态地观察抗体滴度的变化情况，由于抗体滴度与疾病活动度存 在相关性，因此抗体滴度的测定为监测治疗提供了有效依据，提高了检测的敏感性和特异性，具有结果直接易见，操作方便等优点。

参考文献

1 马东来，张少静，（德）文夫瑞德・斯特克.自身抗体及其免疫荧光模式.北京:北京科学技术出版社，2000，7-8，39-41.

2 侯丽燕，陈燕，何晓琥，等.抗dsDNA抗体两种检测方法的比较.风湿病学杂志，1997，2（4）:30-32.