妇尿碘快速检测和临床应用

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【中图分类号】R587.1 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）07-4652-01

妊娠期碘缺乏可导致母亲和胎儿甲状腺激素合成减少，影响胎儿脑发育，导致智力降低。尿碘是控制孕妇碘缺乏的生物化学标志物，对评估孕妇碘营养状况具有重要意义。目前，尿碘测定的“过硫酸铵消化-砷铈催化分光光度”在世界各国普遍采用，大批量尿碘检测时非常简便易行，但对于临床样本尿碘检测就显得操作复杂烦琐，试剂用量大，分析时间长，有害物质排放较多。本项研究旨在建立一种简单、微量、快速和准确的尿碘定量测定方法，用于孕妇碘营养状况评估。

1 材料与方法

1.1原理 在酸性条件下，碘催化砷铈反应，反应速度与碘的浓度有正相关关系，用硫酸三邻菲罗啉合铁（II）（Ferrion）溶液作氧化还原指示剂，用秒表记录氧化还原进行到终点所用时间（s），则时间s与碘浓度C有对数线性关系。

1.2试剂仪器

1.2.1消解液：称取过硫酸铵〔（NH4）2S2O8〕114.1 g，溶于去离子水500 ml中，浓度为1.0 mol/L。置入具塞棕色瓶存于冰箱（4℃）内可保存1个月。

1.2.2碘标准溶液：使用基准碘酸钾配制含碘量为50、100、200、300和400μg/L的系列标准溶液。

1.2.3还原剂：亚砷酸溶液（As2O3）0.045 mol/L，称取优级纯As2O34.4925 g加热溶于400 ml水中，冷却后稀释至500 ml。

1.2.4指示剂： Ferrion试剂溶液0.025 mol/L，称取分析纯邻菲罗啉晶体1.4867 g和分析纯的七水合硫酸亚铁晶体0.6950 g，共溶于100 ml水中。

1.2.5硫酸溶液（H2SO4）： 4.5 mol/L，取浓H2SO420 ml缓慢加于200 ml水中，冷却后稀释至300 ml。

1.2.6氧化剂：硫酸铈铵溶液5.55×10-3mol/L，称取分析纯的[（NH4）2SO4] 2.Ce（SO4）2.4H2O

1.8553 g溶于H2SO4溶液300 ml中，并稀释至500 ml。

1.3仪器 干式恒温器（杭州奥盛仪器有限公司出品）；秒表，精度0.01 s；漩涡混合器；高速台式离心机。

1.4尿样 共采集了2007年10月～2008年5月在本院产科门诊进行产前检查的孕妇晨尿2 162人份。对照组为同一年龄段未孕妇女晨尿257人份。

1.5方法

1.5.1标准曲线的制备与样品测定：使用加样器准确移取50、100、200、300和400μg/L的系列标准溶液和尿样各25μl于1 ml尖底离心管中，加消解液125μ，l漩涡混合后置于干式恒温器100℃压盖消化15 min，冷却至45℃后取下冷却至室温。于高速台式离心机10 000转离心2 s，打开盖子至反应产生的气体排尽为止。每管加入还原剂125μ，l指示剂63μ，l混匀后迅速加入氧化剂63μ，l同时启动秒表计时。当溶液刚变为蓝紫色时停止秒表，记录反应时间s。

1.5.2尿碘含量的计算：实验证明，碘浓度C（μg/L）与反应时间s之间呈如下线性关系。二者的关系式为：LnC=a+bLns或LogC=a+bLogs使用计算器以反应时间s（秒）的对数值（Lns或Logs）对应标准浓度C（μg/L）的对数值（LnC或LogC）作回归曲线，计算a、b值，确定标准曲线的回归方程及相关系数。将样品管的反应时间s代入标准曲线的回归方程，求出样品碘含量（μg/L）。

3 讨论

过硫酸铵消化测定尿碘克服了氯酸消化的浓烟和易爆缺点，但仍然存在耗时长，毒物排放问题〔1〕。我们采用的一次性塑料微量离心管，消化体积控制在175μ，l消化系统密闭，防止了蒸气泄露，使所有样品的消化体积一致，从而保证了结果的准确性。由于采用了密闭小体积加样，提高了消化效率，因此探讨了消化时间对结果的影响。结果显示随着消化时间延长，碘标准浓度/时间的对数相关变差， 30 min后基本上无相关，我们采用的消化时间为15 min。采用本法样本的加标平均回收率为97.0%，日间变异系数4.4%，满足了临床样本分析精准度要求。

应用本法分析了2 162名各孕周妇女和257名同一生育年龄段未孕妇女的晨尿，二者未发现显著差异，但中位数二者分别是165μg/L和182μg/L。对2 162名孕妇尿碘进行了频数分析，资料呈正偏态分布，多数孕妇尿碘在100μg/L～200μg/L之间。尿碘