冀产远志与卵叶远志的含量测定研究

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[摘要] 目的 探讨冀产远志与卵叶远志的种间差异，以指导临床合理用药。 方法 采用高效液相色谱法测定冀产远志与卵叶远志在不同采集期、不同用药部位中有效活性成分远志酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的含量。 色谱柱为Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），检测波长为230 nm，流速为1.0 mL/min，柱温30℃。 结果 各组分分离度良好，远志口山酮Ⅲ在0.46003～4.6003 mg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好（r=0.999）；3，6二芥子酰基蔗糖在0.41587～4.15872 mg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好（r=0.999），平均回收率分别为98.10%（RSD=1.80%）和98.13%（RSD=1.63%），7批样品中远志酮Ⅲ的含量分别为0.113、0.078、0.121、0.105、0.082、0.054、-0.003 g/g，3，6二芥子酰基蔗糖的含量为0.665、0.392、0.390、0.453、0.394、0.586、0.411 g/g。 结论 该方法简便、快速，为冀产远志的品种开发提供科学数据。

[关键词] 远志； 卵叶远志；含量测定；高效液相色谱法

[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2016）04（c）-0132-04

[Abstract] Objective To discuss the difference between Polygala tenuifolia Willd. and Polygala sibirica L. for guiding clinical rational drug use. Methods Effective active ingredient Polygalaxanthone and 3，6'-Disinapoylsucrose content of different collection period and parts of Polygala tenuifolia Willd and Polygala sibirica L were measured by HPLC method. The determination was performed on Sunfire C18 （4.6 mm×250 mm， 5 μm） column with methanol -0.05% phosphate acid （70∶30） as mobile phase at detection wavelength of 230 nm， the flow rate was 1.0 mL/min， the column temperature was set at 30℃. Results The components were separated completely. The good linear relationship of Polygalaxanthone Ⅲ occurred in the range of 0.460 03～4.6003 mg/mL（r = 0.999）， the good linear relationship of 3，6'-Disinapoylsucrose in the range of 0.415 87～4.158 72 mg/mL（r = 0.999）. The average recoveries were 98.10% （RSD=1.80%） and 98.13% （RSD=1.63%）. In the 7 groups， the content of Polygalaxanthone Ⅲ was 0.113， 0.078， 0.121， 0.105， 0.082， 0.054， -0.003 g/g， 3，6'-Disinapoylsucrose was 0.665， 0.392， 0.390， 0.453， 0.394， 0.586， 0.411 g/g. Conclusion The method is simple and quick， which can be used for rational development of Polygala tenuifolia Willd.

[Key words] Polygala tenuifolia Willd.； Polygala sibirica L.； Content determination；HPLC method

远志为远志科植物远志（Polygala tenuifolia Willd.）或卵叶远志（Polygala sibirica L.）的干燥根。春秋两季采挖。性苦、辛、温，归心、肾、肺经。有益智安神、交通心肾、消肿祛痰的功效[1]。临床用于抗焦虑、镇静催眠，祛痰镇咳、抗衰老、抗抑郁、消肿利尿等[2-7]。《中国药典》2015年版一部的标准中没有区分远志与卵叶远志的种间区别，有关药用远志的研究主要集中在细叶远志的化学成分、含量测定、药理作用、制剂质量控制、栽培技术等方面[8-15]。

近年来，卵叶远志的研究也逐渐展开，滕红梅等[16]对卵叶远志的生药学研究，宋月林等[17-18]对卵叶远志的地上部分进行了化学成分研究，周雨虹等[19]对卵叶远志根的化学成分研究，卵叶远志的含量测定仅限于远志皂苷成分[20]等。远志与卵叶远志的对比研究还有待开展，本研究针对冀产远志与卵叶远志中有效成分远志酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的含量进行比对研究，比较两种间的差别，为开发冀产远志资源提供技术参考。

1 仪器与材料

GC2010AT高效液相色谱仪（日本岛津），Labsolution工作站，紫外检测器，AUW120D型电子天平（日本岛津）。甲醇、磷酸均为分析纯，乙腈为色谱纯，水为纯化水，远志酮Ⅲ对照品（中国食品药品检定研究院； 批号：116050-201203）；3，6二芥子酰基蔗糖对照品（中国食品药品检定研究院；批号：11848-201303）；6批药材均由邯郸市药品检验中心孔增科主任药师鉴定（产地：涉县固镇、涉县九峰山、涉县固镇、武安、涉县九峰山、涉县小井）。

2 方法与结果

2.1色谱条件及系统性试验

色谱柱：Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）为固定相，流动相：甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），检测波长为320 nm，柱温为室温，进样量为10 μL。在以上色谱条件下，各组分分离度良好。见图1。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取远志酮Ⅲ对照品12.03 mg与3，6二芥子酰基蔗糖对照品10.83 mg，置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取样品远志（卵叶远志）细粉（过四号筛）约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70%甲醇25 mL，精密称定，加热回流1.5 h，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。

2.4 线性关系的考察

2.5 精密度试验

精密吸取混合对照品溶液10 μL，连续进样5次，记录色谱图，远志酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的RSD分别为0.37%、0.41%，结果表明仪器精密度良好。

2.6 重复性试验

按“2.2.3”项下方法平行制备5份供试品溶液按“2.2.1”项下色谱条件进行测定，测得远志酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的含量分别为0.105%、0.453%，表明重复性良好。

2.7 稳定性试验

2.8 加样回收率试验

2.9 样品含量测定

取样品，按上述供试品溶液制备方法制备，精密量取供试品溶液和对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪测定。

3 讨论

通过采用液相色谱法对远志和卵叶远志的不同采摘期及不同部位中有效活性成分远志酮Ⅲ与3，6二芥子酰基蔗糖的含量进行比对研究发现，冀产卵叶远志根中两种成分的含量高于与冀产远志根，建议可将卵叶远志作为远志的开发品种之一；地上部分（远志小草）几乎不含远志酮Ⅲ，3，6二芥子酰基蔗糖的含量还较高，并且二者根中两种成分的含量均高于其全草，说明这与传统习惯把根作为主要药用部位是一致的；二者3，6二芥子酰基蔗糖的含量远大于远志酮Ⅲ，且秋季采摘的3，6二芥子酰基蔗糖含量高于春季，远志酮Ⅲ含量春季采摘的大大高于秋季，原因北方日照时间长，阳光充足，糖分含量高，酮成分含量较低，可根据药理作用选择合理的采摘期。

经方法学考证，该方法简便快捷、准确，通过测定两种成分的含量指标，可用于有效区别冀产远志及卵叶远志的种间差异，为冀产远志的品种开发提供科学依据。

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（收稿日期：2016-01-22 本文编辑：赵鲁枫）