辽阳市手足口病实验室检测结果解析

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【摘要】目的了解2013年辽阳市全市手足口病实验室检测结果，并对结果进行分析，从而得出2013年辽阳市手足口病发病情况及病原学特征，为实验室诊断手足口病提供依据。方法采集2013年4-10月辽阳市五区两县送检的304例手足口病患者的粪便、咽拭子标本，应用Real time-PCR技术检测标本中肠道病毒、肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）。结果304份标本中，检测到肠道病毒阳性95份，EV71病毒阳性4份，CoxA16病毒阳性187份，检出率分别为31.25%、1.32%、61.51%，其中CoxA16病毒较EV71病毒检出率高很多。结论EV71病毒是引起手足口病死亡和重症病例的主要毒株类型，而通过辽阳市实验室检测结果可得出2013年辽阳市手足口病感染者多为临床症状较轻微的CoxA16病毒感染，且感染者多集中于3、4、9月份，粪便标本检出率较咽拭标本略高。

【关键词】手足口病；实时荧光定量PCR；肠道病毒；肠道病毒71型；柯萨奇病毒A组16型

手足口病（Hand-foot-mouth Disease，HFMD）是由多种人肠道病毒引起的一种儿童常见传染病，是我国法定报告管理的丙类传染病。大多数患者症状轻微，以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要症状。少数患者可出现无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹、神经源性肺水肿和心肌炎等，个别重症患儿病情进展快，可导致死亡。其中EV71病毒是引起手足口病死亡和重症病例的主要病原。它于1969年首次从加利福尼亚患儿粪便中分离出来[1]。近年来，EV71于亚太地区呈上升趋势，而我国2008年4月安徽省阜阳市也发生了手足口病的流行[2]，之后在我国大陆地区广泛流传。为了解辽阳市手足口病病原特征，为实验室诊断提供科学的依据，为指导各县区做好手足口病的预防控制工作，我们采用了卫生部《手足口病预防控制指南（2009年版）》推荐的Real time PCR技术[3]对采集的粪便及咽拭标本进行检测。现将检测方法和结果报告如下：

1材料和方法

1.1标本2013年4-10月共采集辽阳市各县区304例HFMD病例及接触者的粪便、咽拭标本。

1.2病毒RNA的提取采用QIAGEN的One-step RT-PCR kit RNA提取试剂盒提取样本中的病毒RNA。批号74104。

1.3Real time-PCR采用（上海洛麦格生物产品有限公司）肠道病毒、EV71、CoxA16 RNA（荧光定量PCR法）试剂，批号42372。

1.3.1反应体系配置见表1。

3讨论

应用Real time-PCR方法检测手足口肠道病毒核酸、EV71病毒核酸、CoxA16病毒核酸无论是灵敏度还是特异度都很高，Real time-PCR是一种灵敏、特异、简单易行的检测手足口病肠道病毒的方法，为手足口病病毒的快速诊断提供了新的方法。

手足口病的各类标本中粪便标本肠道病毒的检出率较高，可能因为肠道病毒通过粪便传播，粪便中病毒含量高相关。对不同采样时间的标本，粪便标本在发病后能检测到病毒核酸的时间最长。因此，为减少漏诊率，提高灵敏度，建议采集发病早期的粪便标本。

304份样本中EV71病毒核酸阳性4份，CoxA16病毒核酸阳性187份，表明2013年辽阳市手足口病流行的病原体CoxA16为优势病毒株。

参考文献

[1]SCHMIDE NJ，LENNETTE E H，HO H H.An apparently new enterovirus isolated from patients with disease of the central nervous system[J].J Infect Dis，1974，129（3）：304-309.

[2]安徽省卫生厅阜阳积极防治肠道病毒感染疾病[EB/OL][2008-06-20].

[3]卫生部手足口病预防控制指南（2010年版）.