原发性肝癌患者乙型肝炎病毒标志物模式与病毒DNA载量分析

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摘要：目的 探讨原发性肝癌（PHC）的发生与乙肝标志物（HBV-M）及乙肝病毒DNA（HBV DNA）载量的关系。方法 采用化学发光微粒子免疫分析和荧光定PCR方法，对63例原发性肝癌患者进行HBV-M和HBV DNA检测。结果 PHC患者中，HBsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）组（小三阳）40例，所占比例最多（63.39%），小三阳患者血清HBV DNA检出率为57.5%（23/40），HBVDNA平均拷贝数为104.87±1.67copy/mL；其次为HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+）组（大三阳）10例（15.8%），患者血清HBV DNA检出率为100%（10/10），HBVDNA平均拷贝数为107.27±1.67copy/mL；再次为HBsAg（+）、HBcAb（+）模式组5例（7.94%），患者血清HBV DNA检出率为40.0%（2/5），HBVDNA平均拷贝数为105.05±1.42copy/mL。HBV DNA检出率小三阳组低于大三阳组，比较差异有统计学意义（P

关键词：肝肿瘤；肝炎病毒乙型；乙肝病毒DNA；化学发光微粒子免疫分析；荧光定量聚合酶链反应

原发性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是常见恶性肿瘤之一，乙型肝炎病毒（HBV）的感染与PHC发生有十分密切的关系[1]。为了进一步了解PHC与乙肝病毒标志物（HBV-M）感染模式和HBVDNA载量的关系，本研究总结了63例PHC患者的临床和实验室资料，结果报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料 2012年7月～2014年8月于本院就诊并同时接受乙肝两对半定量及HBVDNA检测的肝癌患者63例，其中有肝炎病史者38例（60.3%），肝硬化25例（39.6%）。

1.2试剂和方法 ①乙肝两对半定量检测：抽取研究对象静脉血，应用雅培i2000全自动化学发光微粒子免疫分析系统及配套试剂，定量检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HB-cAb。②HBVDNA检测：使用罗氏LightCycler定量扩增仪，采用荧光定量PCR检测，试剂由深圳匹基公司提供，结果判断以病毒拷贝数小于500copy/mL为阴性。

1.3统计学处理 采用SPSS统计软件进行数据分析；HBV dna以copy/mL为单位，并对拷贝数进行常用对数转换后以指数表示；采用χ2检验进行组间构成比差异显著性检验，采用两样本均数的t检验比较拷贝数。

2结果

见表1。

3讨论

肝癌的发生、发展与HBV感染高度相关，其整合形式HBV DNA的发现更进一步从分子水平上强化了PHC与HBV的关系[2]。本研究中PHC患者HBV感染以"小三阳"为主（63.49%），与阮秀花等[3]报道一致。本研究中PHC患者血清HBV DNA阳性率达60.3%。HBV感染，特别是慢性持续性感染，增加了HBV DNA整合入肝细胞的可能；HBV持续复制可激活某些原癌基因，同时使某些抑癌基因失活或突变，促进了癌症的发生；HBV的X蛋白可激活相关启动因子，促进已被感染的肝细胞发生癌变[4]。本研究中PHC患者HBsAg阳性率高达92.06%（58/63），小三阳患者HBVDNA阳性率为57.5%（23/40），HBV DNA载量的常用对数值为（4.87±1.67），为低水平复制，说明HBeAb的存在并不表示患者体内没有病毒复制。国内学者研究发现，HBV基因中部分碱基的突变可导致血液中HBeAg呈阴性[5]，而此时HBeAg阴性并不意味着HBV的清除或复制水平的减低，相反由于有HBV变异株的存在，小三阳患者体内HBV DNA是否有活动性复制及其水平如何，仅凭两对半测定是无法准确判断的，必须进行HBVDNA的定量检测[6]。动态监测HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者体内HBVDNA水平的变化，对了解疾病转归和抗病毒治疗效果有重要意义[7]。本研究中大三阳组HBV DNA载量对数值为（7.27±1.67），高于小三阳组，表明HBeAg与HBV DNA载量高度相关，是判断HBV是否处于复制状态及评价其传染能力高低的指标。4例HBV-M为模式Ⅵ的PHC患者全部检出HBVDNA，可能是正在发生HBsAg向HBsAb转化，或者是患者体内存在一种新的HBsAg亚型及相应的HBsAb。5例为模式Ⅴ的PHC患者也全部检出HBVDNA，提示在病毒感染过程中，大三阳是感染的起始模式，病毒的清除首先表现为e系统的转换。

综上所述，肝癌的发生与HBV感染高度相关，从HBV感染到PHC的过程中，常伴有e系统转换，所以在肝癌发生后小三阳模式最常见，临床上应结合HBVDNA和HBV-M定量检测以评价患者体内的病毒复制情况，为治疗方案选择和疗效判断提供有力证据。

参考文献：

[1]闻玉梅.现代医学微生物学[M].上海：上海医科大学出版社，1999：971-989.

[2]黄耀煊.原发性肝细胞癌[M].北京：科学技术出版社，2003：281-317.

[3]阮秀花，张放本，任丽君.乙型肝炎病毒感染者与原发性肝癌的关系[J].实用肝脏病杂志，2004，7（1）：31-33.

[4]周俭，叶青海.肝脏恶性肿瘤[M].北京：科学出版社，2003：851-895.

[5]刘悦晖，丁静娟，张权.慢性乙型肝炎病毒感染者病毒前C区和基本启动子区变异检测意义[J].中华消化杂志，2005，25（9）：526-529.

[6]张盟，梁玉兰，赵新惠.HBVDNA定量检测的意义及HBVDNA的相关性研究[J].医学检验与临床，2008，19（4）：45-46.

[7]张韶斌，陈斯亮，罗莞超.200例HBeAg阳性血清样本的HBV-DNA分析[J].广东医学院学报，2008，26（4）：447-448.