福建泉林1号桉组培育苗技术改良的探索
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摘 要:根据泉林1号桉树组培育苗的特性,采用改良的MS培养基,调节培养基的激素、pH值、培养温度等因素进行组培技术改良的探索。通过本实验,筛选出最佳继代培养基为:改良MS+B25mg/L+6BA0.3mg/L +NAA0.4mg/L,pH=5.4～5.6;最佳的生根培养基为:改良MS+NAA0.6mg/L+IBA0.1mg/L,培养温度为28～29℃。
关键词:泉林1号桉;组培;技术改良
中图分类号:S792.39 文献标识码:A 文章编号:1005-569X(2009)11-0042-03
1 引 言
巨桉(eucalyptus grandis)为桃金娘科(myr taceae)桉树属(eucalyptus)双蒴盖亚属横脉组柳桉系树种,自然分布于澳大利亚东部沿海地带,是桉属树种中人工林栽培面积最大的一个种[1],我国从20世纪60年代开始引种[2]。福建泉林1号桉是巨桉的一种无性系品种,由晋江坫头国有防护林场以1996年从澳大利亚引种的第一代巨桉基部萌芽条茎段为外植体,利用组织培养技术,经几年的选优而培育出桉树新品种,它具有耐寒性较强、速生性好等特点。通过造林后林木长势的调查,泉林1号桉比其它巨桉更适合泉州市各县、区的种植,是泉州市林业局近几年来大力推广的主要桉树品种。本试验通过对泉林1号按组培技术的探索,改良一系列的培养条件,旨在更好地达到无性系快繁、迅速推广该品种的目的。
2 试验材料与方法
2.1 试验材料
供试材料是1996年从澳大利亚引种的第一代巨桉成熟林基部,来源于福建省南安五台山国有林场茂林工区,经特殊处理萌芽的茎段为外植体诱导出的新梢(福建泉林1号桉)。
2.2 试验方法
2.2.1 继代培养
(1)预培养。在泉林1号桉组培苗继代培养的预培养阶段,进行了不同激素组合预培养试验。经预培养试验发现,在改良MS1基本培养基上(配方见表1),添加B25mg/L+6BA0.3mg/L+NAA0.4mg/L的激素组合,其增殖效果最好:在18天内,增殖倍数可达4倍以上。
所用改良MS1培养基配方如下:
(2)不同pH条件对初代培养苗增殖的影响。取泉林1号桉初代培养长势良好的组培苗,在不同的pH条件下,在改良MS1 +B25mg/L+6BA0.3mg/L+NAA0.4mg/L培养基上进行培养。
8种pH处理:5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9,每个处理接种20瓶。
培养天数:25天。
2.2.2 生根培养
(1)不同培养基对生根的影响。将继代培养中诱导出的健壮芽苗,接种在以改良的MS2培养基(MS培养基配方中大量元素下调至35%、其他成分不变)为基本培养基,添加不同激素的生根培养基上:①改良MS2+ NAA0.6mg/L+IBA0.1mg/L;②改良MS2+ABT0.5mg/L;③改良MS2+ NAA0.5mg/L。每种培养基接种50瓶,在自然条件下进行培养,观察各处理生根情况。
(2)不同温度条件对生根的影响。重新选取在继代培养阶段长势良好的芽苗,接种在上述试验中经观察统计所得出的最佳生根培养基上,在22℃～31℃共11种不同的环境温度条件下进行培养,每个处理接种100瓶,观察统计各处理生根情况。
2.2.3 炼苗移栽
将已正常生根的培养瓶瓶口半揭开,在室内经过6～10天的自然散射光炼苗,待组培苗叶片充分展开,苗高3～4cm时,取出小苗,洗净根部培养基(注意避免损伤伤幼根),若根过长,可将过长的根系剪短一部分。
3 结果与分析
3.1 继代培养
在继代培养阶段,各处理对泉林1号桉初代培养苗的增殖培养情况如表2所示。随着培养时间的增加,不同pH条件下苗的增殖情况变化较大。培养到21～25天时,当pH在5.4～5.6范围内,增殖速度快、苗生长较整齐的培养瓶有18～20个,而当pH下降到5.2或pH上升到5.8时,增殖情况较差,仅有11～13个瓶增殖良好。
3.2 生根培养
3.2.1 不同培养基对生根的影响
幼株生根是组织培养成败的关键环节。在生根培养阶段,不同激素组合对泉林1号桉组培苗生根的影响如表3所示。
从促进生根的效果来看,在生根培养基(1)改良MS2+NAA0.6mg/L+IBA0.1mg/L上,泉林1号桉组培苗生根速度最快,其长出的根较多,达到6条以上,并且根长而粗壮,根长在15mm左右,根茎可达到1mm,根系活力强,移植后苗生长旺盛。在生根培养基(3)改良MS2+NAA0.5mg/L上,泉林1号桉组培苗生根速度较快,但是生长出的根较少,仅3～5条,经移植后生长情况较好。在生根培养基(2)改良MS2+ABT0.5mg/L上,泉林1号桉组培苗生根速度最慢,生长出的根虽较多,约有4～7条,但是根较短,长度在15mm以下,根吸收能力弱,经移植后生长情况最差。综合比较3种生根培养基,培养基(1)改良MS2+NAA0.6mg/L+IBA0.1mg/L为最佳的生根培养基。
3.2.2 不同温度条件对生根的影响
在不同温度条件下,在选出的最佳生根培养基――改良MS2+NAA0.6mg/L+IBA0.1mg/L上诱导组培苗生根,其生根情况如表4所示。在22～29℃的温度条件下,随着温度的升高,生根所需的时间越短,并且达到移植要求所需的时间也越短,且生根率也越高。当温度在30℃～31℃时,开始生根的时间虽然较其他温度段要短,但是后期生长不良,长势差。综合生根所需时间及根的长势来看,当温度在28～29℃时,生根情况最好。