乙肝病毒污染胃镜后最佳消毒时限的效果观察
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作者：艾梅芳 黄桂桂
【摘要】 目的 探讨胃镜污染乙肝病毒（hbv）的清除破坏效果，确定被污染胃镜最佳消毒时限。方法 对血清hbsag阳性的胃镜受检者用后的胃镜，进行消毒前，2%中性戊二醛消毒后1 min 、3min、5min分别在胃镜插入部前端6cm、活检帽、吸引孔道采样，用免疫层析技术检测其hbsag，用聚合酶链反应（pcr）技术检测hbv-dna。结果 100例血清hbsag阳性患者污染的胃镜消毒前hbsag阳性检出率为了36%，hbv-dna检出率为25%，消毒5min后hbsag和hbv-dna均阴性。结论 乙肝病毒污染的胃镜经手工全管道清洗、鲁沃夫内镜专用酶浸泡5min、2%中性戊二醛机器灌流消毒5min可有效去除胃镜上污染的hbv。
【关键词】 乙肝病毒 污染 胃镜 消毒时限
胃镜技术在诊断与治疗中的应用越来越广，胃镜的消毒问题也越来越受到重视。胃镜在其操作中直接与病人的体液、血液、组织接触，细菌和病毒污染是不可避免的。目前我国是乙肝高发地区，hbsag阳性率均达到10.34%，hbv感染是危害人类健康的重要因素[1]。再加上国内普遍存在胃镜器械少而受检人数多、检查间隙的消毒时间不充分等问题，因此，探讨污染胃镜最佳消毒时限非常重要。
1 资料和方法
1.1 病例资料 胃镜检查前抽血，用胶体金法检测其血清hbsag。按检查顺序取血清 hbsag阳性的胃镜检查患者100例，其中男72例，女28例，平均年龄43.5岁。上述患者检查后的胃镜为观察对象。
1.2 仪器与试剂 电子胃镜，高压水枪，2%中性戊二醛，鲁沃夫内镜专用多酶洗液，血清hbsag胶体金法检测试剂条（厦门新创公司，elisa试剂可测到的血清hbsag最低浓度能达到0.5ng/ml）。pcr反应试剂（乙型肝炎病毒核酸荧光定量检测及ymdd变异检测试剂，最低检测线5×102copies/ml；线性检测范围5×102copies/ml至5×108copies/ml，浙江夸克生物科技有限公司）。
1.3 清洗与消毒 手工清洗消毒按”五步法”。初洗——多酶洗液全管道浸泡——流动水冲洗——2%中性戊二醛机器灌流消毒——清水冲洗。清洗纱布一人一用一步一丢弃，毛刷一用一浸泡消毒，多酶洗液一人一用一更换。
1.4 标本采集 每检查完1例患者，清洗消毒前分别在胃镜插入部前端6cm、活检帽采样：用无菌棉试子擦拭镜身、活检帽内部，将带粘液的棉试子置5ml试管中；吸引孔道采样：用10ml生理盐水注入活检孔内，后用无菌试管收集活检孔道流出的液体。将试管送检验科进行hbsag、hbv-dna检测。污染胃镜经手工清洗、机器灌流消毒后1min 、3min、5min用同样的方法分别采集标本。
1.5 标本检测
1.5.1 hbsag检测 血清hbsag检测方法采用酶联免疫吸附试验(elisa), elisa其原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析[2]。
1.5.2 hbv-dna pcr检测 采用乙型肝炎病毒特异引物，利用核酸扩增、荧光标记探针，结合taqman mgb双探针技术，对人血清或血浆中乙型肝炎病毒核酸（hbv dna）定量检测,同时对ymdd m位点变异进行检测。
2 结果
2.1 hbsag检测结果 100例血清hbsag阳性患者胃镜检查后，其中有36例胃镜表面消毒前检测hbsag阳性（阳性率36%），机器灌流消毒5min后均为阴性。
2.2 hbv-dna pcr检测结果 100例血清hbsag阳性患者污染的胃镜，消毒前样本有14例为hbv-dna阳性，机器灌流消毒后采样hbv-dna均为阴性。
3 讨论
龚艳芳等[2]曾报道，在手工彻底清洗3min,用2%中性戊二醛浸泡消毒3min是对胃镜杀菌消毒的最短时限。邵爱仙等曾报道，手工消毒和内镜消毒机消毒3min均可有效去除胃镜及附件上污染的hbsag，内镜消毒机消毒时间以3min为宜。
被乙肝病毒污染的胃镜，通过严格的全管道清洗、酶洗、机器灌流消毒后，确定最佳消毒时限为5分钟。打破了传统10分钟的消毒限制，缩短了消毒周期、提高了胃镜的使用率、减少了病人的候诊时间，同时避免了医患之间不必要的冲突。制定hbsag阳性胃镜受检者用后的污染胃镜去除乙肝病毒的方案，以防止乙肝交叉感染。还可作为胃镜受检者健康教育的科学依据。
参 考 文 献
[1]韩振琦，宫少雄等.戊二醛超声雾化对乙肝病毒污染胃镜的消毒方法.长春中医学院学报，2005，21:36-37.
[2]龚艳芳,许国铭,方裕强等.胃镜消毒模拟试验—清洗与消毒时间探讨.中华消华内镜杂志,2001,18:219-221.