藏柴胡中三萜皂苷类成分的研究

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[摘要]该研究主要探究藏柴胡中的三萜皂苷类成分。采用大孔吸附树脂，MCI，硅胶，ODS，MDS柱色谱以及半制备高效液相色谱等分离纯化方法，从藏柴胡70%乙醇（含05% 氨水）提取物中得到12个化合物。利用高分辨质谱、核磁共振等波谱手段鉴定其结构分别为柴胡皂苷 b2 （1），柴胡皂苷 a （2），柴胡皂苷 b1 （3），柴胡皂苷 d（4），hydroxysaikosaponin a（5），柴胡皂苷 b3（6），柴胡皂苷 c （7），柴胡皂苷 i （8），柴胡皂苷 f （9）， chikusaikosides Ⅱ（10），柴胡皂苷 s（11），柴胡皂苷 I（12）。12个化合物均属齐墩果烷型三萜皂苷类化合物，其中化合物1，3，5，8～9，11～12均为首次从该植物中分离得到。体外抗流感病毒实验表明在20 μmol・L-1下，化合物2，4，6，8，11～12对流感病毒WSN33具有较明显抑制作用，其抑制率分别为913%，886%，534%，613%，773%，574% 。

[关键词]窄竹叶柴胡；三萜皂苷；齐墩果烷型

[Abstract]Twelve compounds were obtained by phytochemical investigation of 70% EtOH （ containing 05%NH3・H2O ）extract of the roots of Bupleurum marginatum var stenophyllum Based on comparison of their spectral data， including HRESIMS，1HNMR，13CNMR data，with those of the literature， their structures were elucidated as saikosaponin b2 （1）， saikosaponin a（2）， saikosaponin b1（3）， saikosaponin d （4）， hydroxysaikosaponin a （5）， saikosaponin b3 （6）， saikosaponin c（7），saikosaponin i （8）， saikosaponin f （9）， chikusaikosides Ⅱ（10）， saikosaponin s （11）， and saikosaponin I（12） All compounds belong to oleantype triterpenoid saponin and compounds 1， 3， 5， 89，11， and 12 were isolated from this plant for the first time At a concentration of 20 μmol・L-1， compounds 2， 4， 6， 8， 11 and 12 showed strong inhibition activity against influenza virus WSN33 with the inhibition rate of 913%，886%，534%，613%，773% and 574%，respectively

[Key words]Bupleurum marginatum var stenophyllum； triterpenoid saponin； oleantype

doi：10.4268/cjcmm20160716

近几年甘肃渭源等地的药材种植户引种了一种高产柴胡，流通名称叫“藏柴胡”，经鉴定来源于伞形科植物窄竹叶柴胡Bupleurum marginatum Wall. ex DC. var. stenophyllum （Wolff）Shan et Y. Li的干燥根，该植物为竹叶柴胡B. marginatum的变种[1]，分布于我国西部和西南部的2 700 m以上的高海拔地区，在我国贵州省药材标准中以“竹叶柴胡”的名称收载[2]，当地实际作柴胡使用。因为种植产量大和柴胡皂苷含量高，已经在甘肃、山西、陕西等地种植，在我国华北和西北地区有广泛的适应性，大有迅猛蔓延之势，对我国未来柴胡药材的资源格局将产生巨大的影响，非常有必要对该物种的栽培品进行系统的研究，以及和正品柴胡之间的比较，并进一步确认其有效性和毒性等。文献调研显示同柴胡属其他植物一样，本物种也主要含有皂苷类成分。本文报道了该物种系统化学分离工作的一部分，即分离得到的12个皂苷类成分，及其抗流感病毒活性。

1材料

Bruker600 型核磁共振波谱仪，内标为 TMS；LTQObitrap XL 质谱仪（赛默飞世尔）；Agela CHEETAHTM中压制备液相色谱仪（天津博纳艾杰尔科技有限公司）；Waters 高效液相色谱仪，包括 Waters 2535 型泵、Waters 2998 检测器、Empower Ⅲ色谱工作站（美国Waters公司）；柱色谱用硅胶（60～100，100～200，300～400目）及薄层色谱硅胶 GF254（青岛海洋化工厂）；ODSAQ（50μm）（日本YMC公司）；MCI GEL 和 MDS GEL（75 ～ 150μm）（日本三菱司）；D101 大孔树脂（沧州宝恩化工有限公司）；Unitary C18半制备色谱柱（中国华谱新创科技有限公司）；色谱级甲醇、乙腈（西陇化工股份有限公司），实验室所用其他试剂均为分析纯 ；二甲基亚砜（DMSO）（Sigma公司），DMEM，含EDTA的025% 胰酶，FBS（Invitrogen公司）。

藏柴胡于2014年7月购买自甘肃渭源，经中国医学科学院药用植物研究所郭宝林研究员鉴定为窄竹叶柴胡B. marginatum var. stenophyllum的干燥根，标本保存于本课题组。