女贞子中黄酮类化合物的提取工艺研究

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摘要：采用正交设计试验法对女贞子（Ligustrum lucidum）中黄酮类化合物的提取工艺进行了优化选择，以料液比、提取时间、提取温度、乙醇体积分数这4个因素设计3水平正交试验L9（34）。根据正交分析结果，确定女贞子中黄酮类化合物在90 ℃水浴条件下料液比为1∶40（g∶mL），用30%乙醇提取100 min为最佳提取工艺，在此条件下，总黄酮提取率可达5.16%，且4个因素对提取率的影响分别为温度>料液比>时间>乙醇体积分数。

关键词：女贞子（Ligustrum lucidum）；黄酮类化合物；正交试验；提取工艺

中图分类号：S687；R284.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）22-5903-04

DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2016.22.044

Study on Extraction Process of Total Flavonoids in Ligustrum lucidum Fruits

HUANG Xin-ping，WANG Ling，WANG Wu-chao

（College of Chemistry and Chemical Engineering Zhengzhou Normal University，Zhengzhou 450044，China）

Abstract：The extraction process of total flavonoids from Ligustrum lucidum fruits was optimized by the method of orthogonal design experiment. The three levels orthogonal test L9（34） was designed by four factors such as the solid-to-liquid ratio，extraction time，extraction temperature，ethanol volume fraction. According to results of the orthogonal analysis，the optimum extraction process was in 90 ℃ water bath with solid-to-liquid ratio of 1∶40，with 30% ethanol extraction for 100 min. Under these conditions，the extraction rate of flavonoids could reach 5.16%，and the effects of four factors on the extraction rate were ranked as temperature>solid-to-liquid ratio>extraction time>ethanol volume fraction.

Key words： Ligustrum lucidum；flavonoids； orthogonal experiment； extraction process

女子（Ligustrum lucidum）为木犀科常绿乔木植物女贞的干燥成熟果实。女贞子主要含有三萜类化合物、黄酮类、裂环环烯醚萜类和对羟基苯乙醇苷类化合物等多种化学成分，具有抗炎、抑菌、降血糖、降血脂、保肝、抗血栓、抗肿瘤等多种生物活性[1，2]。本课题组一直关注女贞子的研究开发，已简要综述了女贞子的主要化学成分及其药理活性的研究进展，并介绍其主要化学成分的结构与药理活性的构效关系[3]。黄酮类化合物是女贞子具有降脂作用的主要成分，总有效率达91.2%，对人类的肿瘤、衰老、心血管疾病的防治也具有重要意义[3]。因此开发利用女贞子中黄酮类化合物，提升女贞子的利用价值，具有较大的经济和社会效益。本研究以女贞子为原料，利用正交设计试验优化选择了女贞子中总黄酮的提取工艺，旨在为进一步开发利用女贞子中黄酮类化合物提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

TU-1901型紫外可见分光光度计（北京普析通用）；HA-180MF型电子分析天平（日本日立公司）；TB-85型恒温水浴（日本岛津公司）；pHS-3C型酸度计（上海第二分析仪器厂）。芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；女贞子购于老百姓大药房，由郑州师范学院崔波教授鉴定为女贞子。试验所用试剂均为分析纯，水为超纯水。

1.2 方法

1.2.1 女贞子总黄酮的提取方法 女贞子用清水洗净，风干，放入烘箱50 ℃烘至恒重，干燥后放入干燥器中密封保存。准确称取1.0 g女贞子粉末，按照一定料液比，一定体积分数的乙醇于一定温度的水浴提取一定时间。抽滤，滤液减压浓缩并定容，测定滤液中总黄酮含量及提取率。

1.2.2 芦丁标准曲线的绘制 精密称取芦丁标准品3.00 mg，用50%无水乙醇溶解，定容至10 mL容量瓶，摇匀，得0.3 mg/mL的芦丁标准溶液，备用。分别移取一定量上述标准溶液配制成浓度分别为0.003、0.006、0.012、0.018、0.024、0.036 mg/mL系列浓度标准溶液。在361 nm处测定标准溶液的吸光度，并作标准曲线（图1）。黎等[4]以无水甲醇溶解定容芦丁，最大吸收波长在359 nm。考虑到甲醇污染相对较大，价格较贵，且考虑到标准曲线的试验条件与提取条件的一致性，本试验选择50%乙醇溶解芦丁。

1.2.3 样品总黄酮含量的测定 精确量取样品溶液0.5 mL置于5 mL容量瓶中，先用50%乙醇溶液进行溶解定容。在361 nm处测定溶液吸光度，并计算提取液样品中总黄酮含量及提取率。