糖化血清蛋白测定在妊娠期糖代谢异常诊断中的价值

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妊娠期糖尿病（GDM）是妇女妊娠期常见的并发症，GDM发生率为1%～14%，其临床过程较复杂，常无典型症状，空腹血糖常表现正常，易漏诊和延误治疗，对母婴均有较大危害性，故早期诊断及有效处理是降低母婴并发症的关键。目前多数学者建议在妊娠24～28周进行GDM筛查，主要采用口服50g葡萄糖作筛查妊娠期糖尿病试验（GCT），且需在此试验上进一步进行空腹血糖检查及葡萄糖耐量试验（OGTT）确诊［1］。 糖化血清蛋白（GSP）反映的是近2～3周血糖的情况,在反映血糖控制效果上比糖化血红蛋白(HbA1c) 敏感。血中1，5-脱水葡萄糖醇（1,5-AG）测定可作为糖尿病的过筛试验，Yamamouchi T 等［2］报道，以血浆1,5-AG

1 资料与方法

1．1 一般资料

检测对象均来自2006年9月―2007年9月我所产前检查孕妇，孕周24～28周，年龄22～40周岁。正常对照组124名为来我所健康体检的女性,对照组肝、脾肾检查均正常，年龄21～38周岁。正常妊娠组空腹血糖

根据妊娠期糖尿病的诊断标准［1］，空腹12ｈ后，测定空腹血糖、口服75g葡萄糖后1h、2h、3h测定血糖,空腹血糖5.6mmoL/L、1h血糖 10.3mmoL/L、2h血糖 8.6mmoL/L、3h血糖 6.7mmoL/L,其中2项或2项以上达到或超过以上正常值,可诊断为GDM，仅1项高于正常值可诊断为糖耐量异常。

1．2 方法

受试者分别抽取空腹静脉血、服葡萄糖50g后1h 抽取静脉血，对糖筛查异常者1周内测定OGTT。血糖测定采用已糖激酶法；GSP测定采用酮胺氧化酶法,测定原理为糖化血清蛋白在蛋白K作用下逐步释放糖化蛋白片段，酮化氨基酸氧化酶（KAO）特异性氧化酮化氨基酸-糖化蛋白片段基质，过氧化氢的释放使底物基质发生生色反应，为终点法测定糖化血清蛋白的含量；1,5-AG测定采用还原酶法：1,5-AG在ADP依赖性已糖激酶（ADP-HK）的作用下，生成AG-6-P，AG-6-P再和NADP+反应，生成NADPH,NADPH具有还原性，和显色剂作用形成显色物质,对显色物质进行比色，即可测定1,5-AG的量。

1．3 试剂

英国genzyme公司Glypro酶法测定糖化血清蛋白（GSP）试剂盒，批号：258279;校准品批号: 3145024; 质控品批号: 2427792。日本协和公司提供的还原酶法测定1，5-脱水葡萄糖醇（1,5-AG）试剂盒,批号：121AFG 校准品批号:NO.115AFE; 质控品批号: 110AFE。上海申能-德赛公司已糖激酶法（HK法）测定血糖试剂盒,批号：7278/34011/1 校准品、高、中质控值血清均为贝克曼库尔特产品,批号分别为M310175、M407623、M407622。

1. 4 仪器

采用Olympus AU 400全自动生化分析仪（日本产）测定，严格按照试剂说明书设置参数。

1．5 统计学处理

由于数据属非正态分布，故比较时用秩和检验,参考值范围采用P95百分位数法，用SPSS 11.0系统软件处理相关数据。

2 结果

2．1 血清FBG、GSP及1,5-AG含量

正常妊娠组的FBG、GSP、1,5-AG显著低于正常对照组（P

2.2 诊断标准

根据妊娠期糖代谢异常的诊断为标准。以单侧P95为诊断界限，≥165μmoL/L为阳性，＜165μmoL/L为阴性；即GSP1,5-AG≥52.2μmoL/L为阳性，＜52.2μmoL/L为阴性。120例妊娠妇女妊娠期糖代谢异常筛查的临床诊断价值见表3。

3 讨论

3.1 GSP，1,5-AG正常参考值范围

正常妊娠妇女1,5-AG参考值本人未见报道，本次实验120例正常妊娠妇女1,5-AG含量呈偏态分布，其参考值采用白分位数法 其95%参考范围为35.6～131.0μmoL/L；同样正常妊娠GSP含量也呈偏态分布, 其95%参考范围为111.5～165.5 μmoL/L。

3.2 GSP在妊娠糖代谢异常判断的意义

GSP是血液中葡萄糖与白蛋白及其他蛋白质分子N末端的氨基上发生非酶促糖化反应形成酮胺，检测GSP的方法有HPLC法、四唑氮蓝（NBT）法和酶法,对于某些糖尿病病人（如妊娠糖尿病或治疗方法改变者），必须有一种比糖化血红蛋白更敏感的方法监测血糖的短期变化，GSP浓度反映的是近2～3周血糖的情况，在反映血糖控制效果上比糖化血红蛋白敏感［1-3］。本次实验表明，糖筛查异常组及糖耐量异常组的GSP显著高于正常妊娠组，可能前二组妊娠妇女在2～3周的平均血糖水平高于正常妊娠组。我们以正常妊娠组的上限95%可信值（165.5 μmoL/L）作为诊断标准，GPS诊断糖代谢异常的敏感性为47.2%,特异性分别为85.1%。另外，由于GSP与血糖和餐后1h血糖并不相关，可能为妊娠妇女代谢异常，血糖波动较大引起。目前，对于糖筛查异常但OGTT正常者临床并无相应处理［4］，本实验显示糖筛查异常组GSP显著高于正常对照组，说明糖筛查异常组孕妇的平均血糖水平较正常对照组高。因此，对于糖筛查异常而OGTT正常者，如果GSP高于临界限应注意密切监护或采取控制饮食等措施，使GSP处于正常范围，减少妊娠妇女高血糖引起的危害。

1,5-AG是一种具有吡喃环结构的六碳单糖，主要从食物摄入，但内源性合成也是重要来源［5］。人体内有AG的大贮存池，体内主要以非结合形式存在，分子量小，亲水性，可自由通过肾小球滤过膜，随即可能借主动转运，99.9%在肾小管重吸收。葡萄糖可能与1,5-AG争夺肾小管负责重吸收的共同“转运器”。正常时，1,5-AG在肾小管几乎全部被再吸收；病理情况下，1,5-AG在肾小管的再吸收受尿中葡萄糖浓度的竞争性抑制，尿中葡萄糖排泄增加，因而抑制了肾小管对1,5-AG的重吸收，导致血浆1,5-AG的含量明显减少［6］。Yamamouchi 等［2］检测1 620例随机样本血1,5-AG、HbA1C、果糖胺（FA）、OGTT，结果显示，1,5-AG的正常低限是78μmoL/L,小于低限提示有糖尿病，其敏感性为84.2%,特异性为93.1%，高于HbA1C、FA。因此，血1,5-AG的水平降低是糖尿病的灵敏、特异指标。我们实验显示，正常妊娠妇女显著低于正常人水平(P

GSP、1,5-AG测定对妊娠期糖代谢异常的诊断和筛查有重要意义，1,5-AG筛查的敏感性和特异性略优于GSP。虽然OGTT比空腹血糖更灵敏，但易受多种因素影响而导致重复性差，除非第1次OGTT结果明显异常，否则就应该在不同的时间作2次OGTT测定以判断是否异常［2］，且需多次抽血，操作繁琐，给病人带来痛苦和不便。Kenndey 等［7］认为OGTT以确定GDM其阳性率仅为62%～79%，因此，OGTT做为GDM的诊断指标存在许多不足。而GSP、1,5-AG测定标本不受采样条件的影响（如溶血、血清或血浆标本均可）［6,7］，且不须多次采血。对于GSP、1,5-AG指标异常的孕妇无须再进行糖筛查试验或OGTT试验，可减少孕妇的痛苦。至于GSP、1,5-AG指标异常的孕妇与并发症之间的关系、临床治疗后指标的变化等问题，尚需深入研究。

4 参考文献

［1］乐杰.妇产科学［M］.第6版.北京:人民卫生出版社，2003.12:159-162.

［2］Yamanouchi T,Akanuma Y,Toyata T,et al. Comparison of 1,5-anhy- droglucitol,HbA1c,andfructosaminefor detectionof diabetes mellitus［J］.Diabetes,1991,40(1):52.

［3］杨慧霞，董悦. 加强对妊娠合并糖尿病的临床研究［J］.中华妇产科杂志,2003.38:129-131.

［4］Pitkanen E. 1,5-Anhydro-D-glucitol-Anoveltype ofsugarin the humanorganism［J］. ScandJClinLabInvest,1990,50(Suppl 201):55-62.

［5］Yamanouchi T,Shinohara T, Ogata N, et al. Commonreabsorptionsystem of

1,5-Anhydro-D-glucitol,fructose, and mannose in rat tenal tubule［J］. BoochimicaetBiophysicaActa, 1996,1291:89-95.

［6］魏明竟，苏子林.血清果糖胺分析的的方法和应用［J］.中华医学检验杂志，1988，11（2）：69-71.

［7］Kennedy DM,JohnsonAB,Hill PG.A comparisonof automated fructosamine andHbA1cmethodsformonitoringdiabetesinpregnancy［J］. AnnClin Biochem,1998,35(Pt2):283-9.

(收稿日期：2008-03-11)