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黑果腺肋花楸不定芽诱导与增殖研究

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摘要:本研究以黑果腺肋花楸为试验材料,分别选取茎尖、茎段及叶片作为外植体,接种到不同植物激素种类及浓度配比的培养基上,进行诱导和增殖培养。结果表明:茎尖诱导不定芽效率最高,效果最好,茎段和叶片作为外植体诱导率很低,确定茎尖是不定芽诱导的最理想材料;茎尖诱导的最适培养基为MS+ 6-BA 2.0毫克/升+ NAA 0.5 毫克/升,诱导率达96.7%;不定芽增殖的最适培养基为MS+ 6-BA 3毫克/升+ NAA 0.5毫克/升,平均增殖倍数为10.89。

关键词:黑果腺肋花楸;外植体;培养基;诱导;增殖

中图分类号: R284 文献标识码: A DOI编号: 10.14025/ki.jlny.2017.13.020

黑果腺肋花楸,是集食用、药用、园林绿化和生态价值于一体的珍贵树种,适应性强、结果早、经济价值高,市场前景巨大[1]。20世纪90年代,黑果腺肋花楸被引入我国,并定植于辽西地区[2]。因其传统的播种、扦插繁殖困难,野生资源破坏严重,目前绿化需求量大,应用组织培养技术可以获取大量组培苗,促进规模化生产,供应市场。

药用价值:果实及其提取物具有保健作用,对心脏病、高血压等疾病的治疗有显著效果,普遍应用于功能食品和医药工业[3];观赏价值:由于树形优美、观赏期长,是春天观叶、夏天看花、秋天看果的优质绿化树种,可单独种植,或者大量种植在草坪、庭院、路旁等地方[4];生态价值:黑果腺肋花楸抗旱性较强,生长所需水分很少,在干旱地区完全可以存活,浅根系发达,吸枝萌蘖力强,对表层土壤固持力强,病虫害少,抗风害和冰雹灾害,生命周期较长,具有良好的保持水土效果,生态稳定能力强[5]。

1材料与方法

研究以茎尖、茎段、叶片三种外植体为基本材料,对黑果腺肋花楸不定芽进行诱导培养。再以茎尖为外植体,分别接种到9种不同的诱导培养基上,利用茎尖为外植体,直接诱导获得不定芽,将不定芽进行增殖培养,提高增殖系数,从而获得大量组培苗。

2Y果与分析

2.1不同外植体对不定芽诱导的影响

将黑果腺肋花楸茎尖、叶片及茎段分别接种到MS+ 6-BA2.0毫克/升+ NAA0.5毫克/升培养基中,经诱导培养30天后,观察并统计诱导成活的外植体个数,计算出不同外植体的诱导率,见表1。

从表1可以看出:茎尖对不定芽的诱导率最高,为93.30%,茎段对不定芽的诱导率较低,为43.33%,而叶片对不定芽的诱导率为0。

三种外植体接种后,坚持每天观察外植体的变化情况,茎尖在接种9天后可见接种的茎尖向上生长,在基部有小的凸起为萌动的不定芽,13天后可明显地观察到小的不定芽;茎段在接种20天后,可见部分茎段出现变化;叶片接种后一直进行观察,无明显变化,其不定芽诱导率最低。由此得出,茎尖对不定芽的诱导率最高,为93.30%,茎尖是不定芽诱导的最理想材料。

2.2不同培养基对茎尖诱导成活的影响

将茎尖分别接种到9种以MS为基本培养附加不同植物激素种类及浓度的完全培养基上,在培养室进行诱导培养,优选茎尖诱导的最佳培养基,观察并记录得到诱导成活率,见表2。

从表2看出,茎尖最佳的诱导培养基为MS + 6-BA 2.0 毫克/升 + NAA 0.5毫克/升,诱导率为93.30 %,诱导率最高,诱导效果最好。

2.3不同培养基对不定芽增殖的影响

经诱导培养获得的不定芽,再分别接种到以MS为基本培养基附加不同浓度6-BA和NAA配比制成的6种培养基上,接种情况及增殖结果,见表3。

经增殖培养17天后,可观察到不定芽增殖分化出丛生芽,培养至25天,继续分苗,统计每个不定芽分化出的苗数,并转接到增殖培养基上,进行继2代培养。将诱导获得的不定芽转接至增殖培养基情况,见图1;不定芽转接后,经增殖培养25天分化出丛生芽情况,见图2。

结合表3、图1和图2,不定芽分别转接到6种由不同外源激素组合的MS培养基中,不定芽增殖的最适培养基为MS+ 6-BA 3毫克/升+ NAA 0.5毫克/升,增殖倍数为10.89。

3讨论

本试验分别采取黑果腺肋花楸茎尖、叶片及茎段为外植体进行不定芽诱导,茎尖诱导率最高,而叶片诱导不定芽无变化,结果表示不同外植体对不同激素的选择性很大;在相同的基本培养基条件下,6-BA和NAA的浓度对芽增殖效果影响很大,对于黑果腺肋花楸不定芽增殖的最佳培养基为MS+ 6-BA 3毫克/升+ NAA 0.5毫克/升。

参考文献

[1]付艳.黑果腺肋花楸的应用价值及发展前景[J]. China science and Technology R eview,2012.

[2]王鹏.欧美国家黑果腺肋花楸栽培技术研究现状[J].中南林业调查规划,2014,(01):54-57.

[3]于雪,胡文忠,姜爱丽,陈妍竹,刘星伯.黑果腺肋花楸营养物质与功效的研究进展[J].食品工业科技,2016(10):396-400.

[4]张连生,韩文忠,姜镇荣. 黑果腺肋花楸――前途广阔的绿化新品种[J].农业科技与信息(现代园林),2007,(08):63-64.

[5]高晔华.黑果腺肋花楸组培快繁体系的研究[D].延边大学,2013.

作者简介:赵健竹,在读本科生,研究方向:生物学。

通讯作者:孙晓泽,硕士,讲师,研究方向:植物栽培与繁育。