多罗清泰颗粒与环磷酰胺合并使用的抑瘤作用实验研究

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【摘要】 目的 探讨多罗清泰颗粒与环磷酰胺合用的抑瘤作用。方法 按药物体内抑瘤作用常规筛选方法进行，实验动物用NIH小鼠。瘤株为小鼠肝癌（Hepatoma)。小鼠随机分成4组，每组10只。阴性对照组以蒸馏水灌胃。阳性对照组以环磷酰胺（CTX）20mg/kg灌胃一次。第1实验组：多罗清泰颗粒4g/（kg·d)灌胃。第2实验组：多罗清泰颗粒4g/(kg·d)+CTX 20mg/kg一次灌胃，各组均于接种后24h开始灌胃给药，连续10天。均于末次给药后24h处死，计算抑瘤率。并用t检验和方差检验进行显著性的检测。用金正均法检测各单独用药组与合并用药组之间抑瘤作用的相关意义（用Q值表示）。结果 各组抑瘤率分别是：阳性对照组（CTX）为65.0%～67.9%，第1实验组为66.8%～67.4%，第2实验组为83.4%～84.2%。各实验组的抑瘤作用与阴性对照组比较，差异均有非常显著性（P＜0.001）。多罗清泰颗粒与CTX联合用药组与单用多罗清泰颗粒组或单用CTX组比较，经金正均法检测，前者的抑瘤率均明显高于后两者单独用药的抑瘤率（Q>0.85)。结论 多罗清泰颗粒与CTX两者联合使用具有相加的抑瘤作用，多罗清泰颗粒可减轻CTX的副作用。 【关键词】 多罗清泰颗粒；环磷酰胺；移植性动物肿瘤；抑瘤作用

The study of anti-tumor effect by the combination of Duo Luo qingtai granule and cyclophosphamide

【Abstract】 Objective To investigate the inhibitory effect of the combination of the Duo Luo qingta(DLs)granule and cyclophosphamide on mice transplanted solid tumor.Methods The in vivo tumor inhibition effect was evaluated by traditional method of drug screening.Fourty NIH mice were divided randomly into four groups and each group for ten.The mice of control group were given distilled water ig.The mice of positive control group were given cyclophosphamide(CTX)20mg/kg once only ig,the first experimental group were given DLs granule 4g/kg·d ig,and for the second experimental group,both CTX 20mg/kg(also for only one time)and DLs granule 4g/kg each time ig were used.Each group was given drugs continuously for ten days,24 hours after implantation of hepatocarcinoma cell line.All the mice were killed 24 hours after the drug given for the last time.The tumor were obtained and the rate of tumor inhibition were calculated.Student test and Jin zheng-juen method test(Q)were used to evaluate significant differences of groups.Results For the positive control group,the rate of tumor inhibition was 65.0%～67.9%,the first experimental group was 66.8%～67.4%and the third was 83.4%～84.2%.For each experimental group,the rate of tumor inhibition was significantly higher than that of the negative control group(P＜0.001).And the rate of tumor inhibition of second experimental group was also remarkably higher than that of the first experimental group or the positive control group.(Q>0.85).Conclusion The combination of DLs granule and cyclophosphamide could cause synergic antitumor effect.And DLs granule could reduce the side effect caused by cyclophosphamide.

【Key words】 Duo Luo qingtai granule;cyclophosphamide;transplantable animal tumor;tumor inhibitory effect

多罗清泰颗粒是由多味中药配伍而成，主要原料有灵芝、灵芝孢子粉、葛根、蒲公英、茯苓、百合、黄芪、红景天等。经实验研究有提高机体免疫功能作用，本研究旨在验证多罗清泰颗粒与环磷酰胺合并使用对小鼠肝癌是否有协同或相加的抑瘤作用，为临床合并用药提供参考资料。

1 材料与方法

1.1 材料 实验动物用NIH小鼠，由广东省卫生厅实验动物中心提供［许可证号：SCXK（粤）2003-0002粤监证字2006A017］。小鼠体重18～22g，雌雄各半。小鼠肝癌（Hepatoma)由本肿瘤中心提供。多罗清泰颗粒由妙一（厦门）生物科技有限公司提供。环磷酰胺（Cyclophosphamide,Endoxan,Cytoxan,CTX)购自江苏恒瑞医药股份有限公司。

1.2 方法 无菌条件下抽取腹腔保种7～9天生长旺盛的移植性动物肿瘤小鼠肝癌（Hepatoma)细胞，用生理盐水稀释成2×106/ml的细胞液，每只小鼠于右腋皮下接种肿瘤细胞液为0.2ml，小鼠随机分别分成4组，每组10～12只。阴性对照组用注射用水20ml/（kg·d），阳性对照组用环磷酰胺（CTX）20mg/（kg·次），第1实验组用多罗泰清颗粒，剂量为4g/（kg·d），第2实验组用多罗清泰颗粒4g/（kg·d）+CTX20mg/(kg·次），各组均于接种后24h开始分别灌胃给药，连续10天。于末次给药24h后分别处死小鼠，称鼠重，剥离肿瘤并称瘤重，计算抑瘤率。公式如下：

抑瘤率（%）={1-（给药组平均瘤重/阴性对照组平均瘤重）}×100%

用t检验测定实验组与对照组之间的差异。用金正均法［1］检测单独用药组与联合用药组之间抑瘤作用的对比意义（拮抗、相加或协同作用，用Q值表示）。

2 结果

各组抑瘤率（详见表1、2）分别为：CTX组抑瘤率为65.0%～67.9%，多罗清泰颗粒组为66.8%～67.4%，多罗清泰颗粒+CTX组为83.4%～84.2%。各组的抑瘤作用与阴性对照组比较，经t检验差异均有极显著性（均P<0.0001）。经用金正均法检测单独用药组与合并用药组之间对比，Q值均>0.85(Q值为0.903～0.952),表明两药有相加作用（详见表1、2）。各实验组体重与阴性对照组相比差异无显著性（P>0.05）。在抑瘤实验过程中，各组小鼠活动活跃，毛色有光泽，未见有脱毛、松毛（除单用CTX组外）、腹泻和死亡情况。表1 多罗清泰颗粒和多罗清泰颗粒加环磷酰胺合并使用的抑瘤作用 （略）表2 多罗清泰颗粒和多罗清泰颗粒加环磷酰胺合并使用的抑瘤作用 （略）

3 讨论

环磷酰胺是一种“潜伏化”的氮芥，在体内变成活动型，其活性物（磷酰胺氮芥）可与DNA起烃化作用，产生细胞毒。临床上对淋巴类的恶性肿瘤治疗最有效，对慢粒、乳腺癌及精原细胞瘤、支气管肺癌、卵巢癌有一定疗效。但有不良反应，主要是骨髓抑制、化学性膀胱炎、胃肠道症状、脱发等，其不良反应与剂量成比例关系。如果能与中药合用降低其剂量而达到相加或协同的抑瘤效果，将会提高疗效并减轻CTX的毒性和副作用。多罗清泰颗粒是根据人体五脏六腑系统致病因素和治疗需要用多种中药配伍而成，其中包括了灵芝、灵芝孢子粉，已有报道灵芝及灵芝孢子粉对多种移植性动物肿瘤有明显的抑制作用及抗致突变的作用［2，3］，也有报道灵芝孢子粉在实验研究及临床上有辅助化疗的作用［4～6］。

本实验结果表明多罗清泰颗粒在4g/（kg·d）剂量下，对小鼠肝癌有一定的抑瘤作用，其抑瘤率为66.8%～67.4%,在多罗清泰颗粒4g/（kg·d）与CTX 20mg/（kg·次）的合用下，对小鼠肝癌的抑瘤率为83.4%～84.2%。可见多罗清泰颗粒与CTX合并使用的抑瘤率明显高于单用同剂量的多罗清泰颗粒或CTX，说明多罗清泰颗粒与CTX两者起相加的抑瘤作用。在实验过程中，可见CTX单独使用组动物有脱毛、松毛现象，而多罗清泰颗粒组及多罗清泰颗粒加CTX合用组未见有脱毛、松毛现象，说明多罗清泰颗粒可减轻CTX的副作用。因而，在进行CTX化疗时同时服用多罗清泰颗粒可望有提高CTX的抑瘤率及减轻其副作用，本研究将为临床合并用药提供有意义的参考资料。

4 结论

多罗清泰颗粒对小鼠肝癌有明显的抑制作用。多罗清泰颗粒与CTX合并使用对小鼠肝癌均有相加的抑瘤作用。各实验组体重与阴性对照组相比差异无显著性。在实验过程中，各实验组小鼠活动活跃，毛色有光泽，未见有脱毛、松毛（除单用CTX组外）、腹泻和死亡情况。

【参考文献】

1 戴体俊.合并用药的定量分析.中国药理学通报，1998，14（5）：479-480.

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3 邓丽霞，胡斌，陈小君，等.萌动激活赤灵芝孢子粉致畸、致突变和抗突变的实验研究.癌变、畸变、突变，2002，14（3）：183-185.

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6 陈小君，史泓浏，冯翠萍，等.灵芝孢子粉与环磷酰胺联合使用抑瘤作用的实验研究.现代肿瘤医学，2005，13（1）：64-66.