腺苷脱氨酶测定在结核性胸膜炎中的应用

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【摘要】 目的：探讨腺苷脱氨酶(ADA)测定在结核性胸膜炎的诊断价值和意义。方法：选择80例结核性胸膜炎患者作为结核组，选择80例非结核性胸膜炎患者作为非结核组，比较二组病人胸腔积液ADA活性及阳性率测定结果。结果：结核组胸腔积液ADA活性和阳性率，明显高于非结核组，差异有显著性（P＜0.01）。结论：ADA 测定对结核性胸膜炎的诊断与鉴别诊断具有很高的价值,值得推广。

【关键词】 胸腔积液； 腺苷脱氨酶； 结核性； 胸膜炎

Adenosine Deaminase in the Application of Tuberculous Pleurisy

Abstract： Objective： Discussion of adenosine deaminase (ADA) in the value and significance of the diagnosis of tuberculous pleurisy. Method： 80 cases of patients with tuberculous pleurisy as tuberculosis group, 80 cases of non-tuberculous patients as a non- tuberculous group， compared two groups of patients with Pleural effusion ADA activity and the positive rate. Result： Tuberculosis group’s pleural effusion ADA activity and the positive rate was significantly higher than non-tuberculous group. The difference was significant（P＜0.01）. Conclusion： Determination of the ADA in the diagnosis and differential diagnosis of tuberculous pleurisy high value worthy of promotion.

Key words： Pleural effusion； ADA； Tuberculousis； Pleurisy

结核性胸膜炎是常见病,绝大多数伴有胸腔积液。临床检测有助于诊断,目前检查方法繁多，但传统的病原学诊断不但耗时而且阳性率太低,诊断方法缺乏特异性，所以鉴别结核性和非结核性(细菌性及癌性) 胸膜炎是临床病因学诊断中的一个常见难题。随着ADA 测定方法学的改进及全自动生化分析仪的广泛应用,提高了结核性胸膜炎的阳性诊断率。本文对80例胸腔积液患者测定其胸腔积液ADA活性,以探讨ADA测定在结核性胸膜炎的诊断价值和意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料：所选80例病例均来自我院2005年1月至2006年1月住院病人，均结合临床表现，经胸腔积液生化、组织病理学、组织细胞学及影像学等常规检查，痰常规找抗酸杆菌，结核抗原、抗体检查，胸膜活检等，抗结核治疗有效而作出明确诊断。诊断标准还具备下列4项诊断条件中的3项:①同时并存活动性肺结核;②有结核病的临床表现;③ 胸腔积液为渗出性,且淋巴细胞占优势;④抗结核治疗疗效显著,经随访排除其它病因［1］。其中男性53例,女性27例;年龄16～66岁,平均35岁。均为初治病例，无合并症存在。另选择我院非结核性胸膜炎组80例为非结核组(其中癌性胸腔积液55例、细菌性胸腔积液21例、另外肺源性心脏病及扩张型心肌病、心力衰竭所致胸腔积液各2例)，其中男性48例,女性32例;年龄18～70岁,平均38岁。二组一般资料经统计学对比差异无显著性（P＜0.05）。

1.2 方法：所有病例常规穿刺抽取胸腔积液5ml, 抗凝，离心后取上清液冻存待测。ADA活性测定采用比色法。结核性胸膜炎胸腔积液ADA 诊断界限值定为45U/L,即≥45U/L为结核性,<45U/L为非结核性。ADA测定试剂盒由试剂是由美国贝克曼库尔特公司原装进口，严格按说明书操作。测定仪器为美国贝克曼库尔特公司生产的LX20全自动生化分析仪。

1.3 实验原理Adenosine+H2O-ADAInosine+NH4NH4+2-Ketoglutarate + NADPH -GLDHGIutamate+NADP+H2 ADA酶解腺苷反应产生氨，再通过偶联谷氨酸脱氢酶的作用，氧化NADPH成为NADP，从而得以测定NADPH在340nm处吸光度下降的速度，通过测量340nm处吸光度下降的速度，可以测算腺苷脱氨酶的活性大小。

1.4 统计学方法：资料用均数±标准差，用X2检验，计量资料用t检验，P＜0.05为差异有显著性。

2 结 果

胸腔积液ADA活性及阳性率测定结果，见表1。

表1 两组胸腔积液ADA活性检测结果及阳性率比较　略

3 讨 论

结核与癌性病变是胸腔、腹腔积液的主要病因,常规检查方法诊断结核有较大难度; 胸、腹膜活检与胸、腹水查抗酸杆菌阳性率均很低,主要是通过临床表现、常规胸、腹水检查及结核菌素皮肤试验等综合判断来确诊,缺乏特异性客观手段,费时而低效。自20世纪50年代ADA活性检测被引入临床酶学以来，逐渐应用于诊断肝炎、白血病、艾滋病等各种疾病。ADA是人体嘌呤核苷分解代谢过程中起关键作用的酶, 它能催化腺嘌呤核苷降为次黄嘌呤核苷, 后经核苷磷酸化酶催化成次黄嘌呤, 最终氧化成代谢终产物尿酸。ADA 在组织中的分布具有多态性, 淋巴细胞和肺组织中均有丰富的ADA , 在淋巴细胞中活性最高。正常人的淋巴细胞中含有两种同功酶, 即ADA1和ADA2, 前者可为单体或二聚体, 见于实质器官和淋巴细胞, 后者见于血清和单核细胞。重症联合免疫缺陷(SCID) 患者缺乏ADA 活性［2］,故认为ADA 与免疫反应有关。 通常利用ADA 的作用底物腺苷的分解速度、次黄苷或氨等产物的生成量,以及终产物尿酸生成量的改变进行血清、体液、红细胞和淋巴细胞的ADA 活性测定。1978年Piras等［3］首先报道了胸腔积液ADA活性可作为胸腔积液鉴别诊断及结核性胸膜炎的诊断依据之一。当发生结核性胸膜炎时，宿主通过细胞免疫抵抗结核病，ADA在淋巴细胞的分化和单核细胞成熟为巨噬细胞的过程中起一定的作用，因细胞免疫受刺激,淋巴细胞明显增多,故ADA 在胸腔积液中的含量明显增多［4］，而癌性胸腔积液时，T淋巴细胞增殖抑制，ADA活性一般降低。研究表明，结核性胸腔积液中的ADA 以ADA2为主，但此酶的细胞来源尚未确定，胸腔中单核巨噬细胞和问皮细胞可能性较大［4］。测定胸腔积液中ADA活性可作为鉴别结核性与恶性胸腔积液的标志，特异性及敏感性均很高，明显优于其它检查方法。从表1中可以看出，结核组胸腔积液ADA及阳性率与明显高于非结核组，差异均有显著性（P＜0.01）, 证明ADA活性测定在鉴别诊断结核性胸膜炎中有重要的临床价值。但ADA活性测定有时与临床诊断并不一致，应进行多指标检查以明确诊断。结核性胸膜炎与恶性胸腔积液中ADA活性的差异可能是感染免疫与肿瘤免疫差异性表现［5］。当病理学检查无阳性表现,而ADA又不高时,在排除漏出液、普通炎症及风湿性疾病胸、腹水后(这些情况一般都有明确临床线索而易于排除),依然要考虑癌性胸、腹水［6］,再反复查找癌症线索,不要轻易开始诊断性抗结核治疗。 综上所述,ADA 测定对结核性胸膜炎的诊断与鉴别诊断具有很高的价值,值得推广，若能联合胸腔积液的癌胚抗原(CEA) 、糖链抗原50(CA50) 、流式细胞术( FCM) 、溶菌酶、结核抗体等多项指标检查［4］,则具有更大的鉴别诊断价值。

【参考文献】

［1］ 秦北宁，任爱琴，白莉华，等．检测腺苷脱氨酶对结核性与癌性胸、腹水的诊断意义［J］．人民军医，2003 ，46(12）：689-690.

［2］ 朱平光．腺苷脱氨酶对结核性胸膜炎的鉴别诊断价值［J］．浙江临床医学，2002,4（3）：213-214．

［3］ Piras M A,Gakis C,Budroni M.Adenosine deaminase activity in pleural effusion:an aid to differential diagnosis［J］.BMJ,1978,2:1951-1952.

［4］ 叶飞,张辉,钟晶，等.腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎鉴别诊断中的意义［J］．成都医药杂志,2004,2(30):77-78.

［5］ 冀秀君，崔如众，陈而璋．对198例胸液腺苷脱氨酶检测结果的长期追踪分析［J］．中华结核和呼吸杂志，2000，23：249.

［6］ 秦北宁，任爱琴，白莉华，等．检测腺苷脱氨酶对结核性与癌性胸、腹水的诊断意义［J］．人民军医，2003，46(12)：690．