十味百合胶囊制备工艺研究

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摘 要：本实验以多糖为指标对十味百合胶囊提取工艺进行研究。十味百合胶囊最佳提取工艺为加入10倍量水，煎煮2小时，连续提取3次。本工艺稳定、可行、收率高。

关键词：十味百合胶囊；提取；工艺

百合为十味百合胶囊主要成分之一。百合又名强蜀、番韭、山丹、百合蒜、大师傅蒜、蒜脑薯、倒仙、重迈、中逢花、夜合花等，是百合科百合属（学名：Lilium）多年生草本球根植物。百合味甘微苦，性平，入心、肺经，可用于热病后余热未消、虚烦惊悸、神志恍惚和肺痨久咳、咯血、肺脓疡等症。《日华子本草》记载：“安心，定胆，益志，养五藏，治癫邪，啼泣，狂叫，惊悸，杀蛊毒气，胁痈乳痈发背及诸疮肿，并治产后血狂运。”百合有润肺止咳、清心安神之功，临床常用于治疗口腔溃疡、白塞氏综合征、慢性咽喉炎、肺结核等。百合主要含生物碱和蛋白质、脂肪、多糖、淀粉、钙、磷、铁及维生素B1、维生素B2、维生素C、βD胡萝卜素等营养物质，有良好的营养滋补之功。多糖为百合主要成分之一。百合多糖具有抗肿瘤、抗疲劳、清除自由基、调节免疫、降血糖、抗氧化、抑菌等药理作用[1-5]。本实验以多糖为指标对十味百合胶囊提取工艺进行研究。

1 仪器与试药

便携式PH计（北京恒奥德仪器仪表有限公司）；FA1204CFAC型全自刃k子分析天平（北京同德创业科技有限公司）；实验室用高纯水制备器（北京科誉兴业科技发展有限公司）；HH-S型智能恒温水浴锅（巩义市予华仪器有限责任公司）；B200迷你型超声波清洗机（上海恒奇仪器仪表有限公司）；DR5000台式紫外可见分光光度计（广州市怡华新电子仪器有限公司）。蒽酮（黄骅市江峰化学品有限公司）；磷酸（上海拜力生物科技有限公司）；硫酸（黄骅市江峰化学品有限公司）；乙醇（上海拜力生物科技有限公司）。

2 方法与结果

2.1 单因素考察

2.1.1 提取次数

按方称取药材，粉碎为20目，至于圆底烧瓶内，分别提取三次，第一次加10倍水，每次煎煮2小时，过滤，合并滤液，减压浓缩；第二次加10倍水，每次煎煮2小时，连续提取两次，过滤，合并滤液，减压浓缩；第三次加10倍水，每次煎煮2小时，连续提取三次，过滤，合并滤液，减压浓缩。采用分光光度计法测定浓缩膏中多糖含量并计算多糖收率。

2.1.2 药材粉碎目数

按处方称取药材，分别粉碎为10目、20目、40目，至于圆底烧瓶内，加10倍水，每次煎煮2小时，连续煎煮三次，过滤，合并滤液，减压浓缩。采用分光光度计法测定浓缩膏中多糖含量并计算多糖收率。

2.1.3 加水倍数

按处方称取药材，粉碎为20目，至于圆底烧瓶内，分别提取三次，第一次加14倍水，每次煎煮60分钟，连续三次，第二次加12倍水，每次煎煮2小时，连续三次，第三次加10倍水，每次煎煮2小时，连续三次，第四次加8倍水，每次煎煮2小时，连续三次，分别过滤，合并滤液，减压浓缩。采用分光光度计法测定浓缩膏中多糖含量并计算多糖收率。

2.1.4 提取时间

按处方称取药材，粉碎为20目，至于圆底烧瓶内，分别提取三次，第一次加10倍水，每次煎煮1小时，连续三次，第二次加10倍水，每次煎煮2小时，连续三次，第三次加10倍水，每次煎煮3小时，连续三次，分别过滤，合并滤液，减压浓缩。采用分光光度计法测定浓缩膏中多糖含量并计算多糖收率。

2.2 正交试验设计

实验结果表明，粉碎目数对多糖收率影响不大，提取次数、加水倍数和提取时间对多糖收率影响较大。选择提取次数、加水倍数和提取时间作为考察因素，采用正交试验法对影响提取效率的其它工艺条件进行优选。采用3个考察水平，用L9（34）正交表进行试验，因素水平表见表1。

3 含量测定

3.1 供试品溶液的制备

取提取膏适量，精密称取，置100mL量瓶中，加水适量，超声处理5分钟使溶解，放置至室温，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液1.5毫升，加入乙醇7.5毫升，摇匀，离心（3500r/min，30min），倾去上清液，沉淀加水溶解并转移至10mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

3.2 对照品储备溶液的制备

精密称取105℃干燥恒重的无水葡萄糖对照品10mg，置10mL容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

3.3 测定波长的选择

精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1.0毫升，分置10mL棕色具塞试管中，分别加入0.2%蒽酮一硫酸溶液4.0毫升，混匀，迅速置冰水浴中冷却6分钟后，置100摄氏度水浴中加热10分钟，取出，置冰水浴中5分钟，取出，室温放置10分钟后，于190～900nm波长范围内进行全波长光谱扫描，记录吸收光谱。在580nm处有最大吸收峰，故选用580nm为检测波长。

3.4 标准曲线的绘制

精密吸取对照品储备液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0毫升分别置于50毫升量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密吸取上述各溶液1.0毫升置10mL棕色具寒试管中，照3.3项下操作，580nm处测定吸光度值。以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标绘制标准曲线。线性范围0.02～0.12mg/mL。

3.5 回收率试验

取已知含量的同一批供试品各6份，分别精密添加一定量的多糖对照品，测定含量，计算回收率。平均回收率为9.6%，RSD为1.02%。

4 实验结果

十味百合胶囊最佳提取工艺为加入10倍量水，煎煮2小时，连续提取3次。本工艺稳定、可行、收率高。

参考文献

[1]张典，弥曼，姜凤良，黄黎，李新华，梅其炳.百合多糖对人肝癌HePG2细胞CyclinD1和COX-2的影响[J].细胞与分子免疫学杂志，2011（05）.

[2]栾玉泉，董莎莎，方淑环，万顺康，左绍远.大理百合多糖对小鼠免疫功能的影响[J].四川生理科学杂志，2009（02）.

[3]李新华，弥曼，李汾，任利君，王多宁，杨颖.百合多糖免疫调节作用的实验研究[J].现代预防医学，2010（14）.

[4]李汾，袁秉祥，弥曼，任利君，李新华，王多宁，王颖.纯化百合多糖抗肿瘤作用和对荷瘤小鼠免疫功能的影响[J].现代肿瘤医学，2008（02）.

[5]弥曼，李汾，任利君，梅其炳.百合多糖的分离纯化及抗肿瘤作用[J].西安交通大学学报（医学版），2009（02）.