免疫固定电泳诊断多发性骨髓瘤的临床价值研究

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【摘要】目的：探讨免疫固定电泳技术（IFE）对于多发性骨髓瘤的诊断价值。方法：收集2013年1月至2014年6月，我院经IFE试验未阳性的门诊或住院患者92例，取血清标本采用IFE检测，并与血清蛋白电泳法进行比较。结果：IFE对于多发性骨髓瘤的检出率显著高于血清蛋白电泳法，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：免疫固定电泳技术用于单克隆抗体检验快速、准确、敏感，对于多发性骨髓瘤的早期诊断鉴别具有重要意义，值得推广应用。

【关键词】多发性骨髓瘤;免疫固定电泳技术;诊断

多发性骨髓瘤是一种恶性肿瘤行疾病，主要特征为单克隆浆细胞异常增生并且分泌出大量的单克隆免疫球蛋白（M蛋白），多见于中老年人群，近年来其发病率有上升趋势[1]。由于本病起病较为隐匿，病情进展缓慢，临床表现较为复杂多样，早期诊断难度较大。既往对本病的诊断多采用X线、骨髓细胞学、血清蛋白以及免疫球蛋白定量检测等，但特异性较差，极易误诊或漏诊[2]。本研究分析了免疫固定电泳技术（IFE）对多发性骨髓瘤的诊断价值，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2013年1月至2014年6月期间，经IFE试验未阳性的门诊或住院患者92例，其中，男58例，女34例，年龄在34-85岁之间，平均为（59.3±4.2）岁。

1.2 仪器与试剂

以美国Beckman公司提供的MMAGE型双光径免疫分析仪以及Beckman公司生产的配套试剂做血清免疫球蛋白定量测定以及轻链定量测定。采用美国Helena公司生产的全自动快速电泳分析系统以及配套试剂作血清蛋白电泳以及免疫固定电泳检测。

1.3 方法

患者均晨取空腹静脉血，常规在2500r/min转速下离心5min分离血清，并置于-20℃下保存待检。血清标本置于蛋白分析仪上进行免疫球蛋白定量测定，并以速率散射比浊法对IgA、IgG、IgM、λ轻链以及κ轻链检测。然后取血清标本17μl点滴在琼脂板上，常规电泳-分离-干燥-染色-脱色-烘干后，进行血清蛋白电泳扫描。取同一份血清标本加入生理盐水适当稀释后，取17μl点滴在琼脂板上的6个位置，并利用电泳分开不同电荷的血清蛋白质，然后将IgA、IgG、IgM、λ以及κ的抗血清加入至5条不同的电泳区带内。对琼脂板进行孵育处理10min，然后将多余抗血清吸除，并将其烘干。固定蛋白以后，以洗脱液对电泳胶进行漂洗以便将未结合的蛋白去除，使抗原抗体复合物保留在琼脂板上，然后再进行染色-脱色-烘干，使得蛋白质电泳参考模式以及抗原抗体沉淀区带均被氨基酸黑染，然后进行扫描观测。

1.3 统计学分析

数据以统计学软件SPSS18.0进行分析，以百分率（%）表示计数资料，经χ2检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清蛋白电泳与IFE检测结果

本组92例患者的血清标本经血清蛋白电泳显示，78份（84.78%）存在M蛋白，其中，52例分布在γ带区，25例分布在β带区，1例α区。IFE检测显示各型表现为浓染锐利且均匀、致密的蛋白带，检出率达100%。

2.2 血清蛋白电泳与IFE检出率比较

除κ型外，IFE的检出率显著高于血清蛋白电泳的检出率（P<0.05），详见表1。

表1 血清蛋白电泳与IFE检出率比较[n（%）]

方法

免疫分型

IgG（n=50）

IgA（n=21）

IgM（n=5）

κ型（n=4）

λ型（n=12）

血清蛋白电泳

45（90.00）

17（80.95）

3（60.00）

4（100.00）

9（75.00）

IFE

50（100.00）

21（100.00）

5（100.00）

4（100.00）

12（100.00）

3 讨论

发生多发性脊髓瘤后，脊髓中的克隆性浆细胞呈现异常增生，并可分泌出M蛋白。临床研究表明，多发性脊髓瘤患者中有90%以上可检出血清M蛋白，这对本病的诊断具有重要意义[3]。

IFE技术是一种利用单价特异性抗体作用，并通过免疫固定作用而检血清蛋白电泳中的各个单克隆区带，从而鉴别M蛋白的类型。目前，临床研究证实，IFE能够鉴别各类Ig以及其轻链并准确分型，克服了传统血清蛋白电泳法的局限性，对于多发性骨髓瘤的诊断具有重要价值。尤其是对于多克隆Ig正常或者异常增多并合并单克隆Ig、临床治疗以后、双克隆M蛋白病种的诊断具有显著优势[4]。

本研究结果显示，血清蛋白电泳对于M蛋白的检出率为84.78%，主要分布在M带区以及β带区，而经IFE检查的检出率达100%，两者差异显著。在各免疫分型的检出率方面，IFE对于IgA 、IgG、IgM以及λ型的检出率均显著高于血清蛋白电泳法。提示IFE较传统血清蛋白电泳法更为准确、敏感，对于较少的单克隆成分仍可准确检出，对于多发性脊髓瘤的诊断具有重要意义，值得在临床中推广应用。

参考文献：

[1] 鲁真真，栾芳，鞠瑛等.免疫固定电泳在多发性骨髓瘤辅助诊断中的应用价值[J].临床输血与检验，2014，16（2）：125-128.

[2] 姚红，吴亚楠.免疫固定电泳对多发性骨髓瘤的临床应用价值[J].实用癌症杂志，2014，（1）：91-92.

[3] 张磊，高秀登，刘树业等.免疫固定电泳在多发性骨髓瘤中的诊断价值[J].中国实验诊断学，2011，15（3）：517-519.

[4] 卢新兆，吴定昌，黄晓华等.免疫固定电泳及分型对多发性骨髓瘤诊断的临床价值[J].国际检验医学杂志，2014，（12）：1657-1659.