鸡传染性支气管炎疫苗研究进展

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[摘 要] 传染性支气管炎给我国规模化养鸡业造成巨大的经济损失，但是因其出现变异株的速度较快，毒株毒力之间的差异大，传统疫苗已经无法抵抗病毒变异株的危害。随着IBV分子生物学研究、免疫机制探索以及病原变异机制探讨等工作的逐步深入，新的疫苗研究工作取得了一系列进展。为更好地了解鸡传染性支气管炎的防治现状，本文对传染性支气管炎的疫苗研究进展进行了综述。

[关键词] 传染性支气管炎 疫苗 研究

[中图分类号] S831 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650 （2016）08-0247-01

鸡传染性支气管炎 （IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（IBV）引起，严重危害我国养禽业的一种重要疾病。各年龄阶段鸡均可发病，但雏鸡最为严重，一般以40日龄以内的鸡多发，产蛋期也有发生。IBV较高的基因突变率造成了IBV 复杂的血清型，目前的血清学交叉中和试验表明，全世界IBV已有近30个血清型，并仍有不断上升的趋势，且各血清型或毒株之间交叉保护性较弱，从而给本病的防控带来较大的困难，急需研制新的疫苗有效的预防该病的发生。

1 灭活疫苗

灭活疫苗安全性好，不存在散播病原和毒力返强的问题，但是，由于IB血清型的多样性，单价灭活苗不能阻止IBV变异株引起IB的暴发。王红宁等（1999）对我国IB的流行病学进行调查研究，试制了多价油乳剂灭活疫苗，扩大常规疫苗的保护范围，发现能有效地预防多型IB。灭活疫苗的不足之处是使用剂量大，需要配合佐剂， 制备比较复杂、成本较高等。为有效的防治该病的发生，目前，国内多将弱毒疫苗滴鼻和灭活疫苗注射结合起来使用。

2 IB弱毒疫苗

IB 弱毒疫苗是由抗原性良好的毒株通过鸡胚连续传代致弱后制备的冻干疫苗。目前我国广泛使用M41 血清型的鸡胚适应毒H52和H120两种疫苗。为达到较好的免疫效果，多在早期育雏防控，H120 株疫苗用于雏鸡和其它日龄的鸡，H52用于经 H120 免疫过的大鸡，育成鸡开产时选用 H52 疫苗，能有效刺激机体的免疫系统。但鉴于弱毒疫苗有可能成为其突变的主体和重组变异的供体，同时肾型与支气管炎型的免疫机制还存在着很大的差别，这在很大程度上亦影响着疫苗的免疫保护作用。并且，活疫苗其致弱程度难以掌握，疫苗的运输、贮存和使用等的条件要求较高。秦玉明等（2009）应用耐热冻干保护剂研制成功鸡传染性支气管炎病毒（H52株）耐热冻干活疫苗，临床观察无不良反应，安全有效，且抗原性不变，彻底改变国内兽用生物制品延续了 20多年采用脱脂牛奶制备活疫苗仅-15 ℃保存的历史，达到国外同类产品的技术水平。

3 基因工程疫苗

3.1 亚单位疫苗

亚单位疫苗是指用基因工程方法构建，在高效表达系统中表达出来强毒病原体的某种免疫相关抗原肽链。提取保护性抗原，加入佐剂即制成亚单位疫苗。常用的表达系统为大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、昆虫细胞表达系统和植物表达系统。黄亚东等（2002）构建了含BIV GD6株S1基因的大肠杆菌重组表达载体，并在大肠杆菌中获得表达。又在毕赤酵母中表达了IBV的S1基因，所表达蛋白的分子量小于天然蛋白。戴亚斌等利用Bac-to- Bac杆状病毒表达系统构建的重组杆状病毒，表达了传染性支气管炎病毒的S1基因，其在昆虫细胞中表达的蛋白可以诱导抗体产生中和免疫保护反应。周继勇等（2003）利用根瘤菌将IBV全长S 基因转入马铃薯中表达，提取免疫原免疫鸡，通过3次免疫后，免疫鸡受到完全保护。王红宁等（2003）通过RT-PCR获得IBV S1基因片段，并将其导入玉米表达载体进行了表达。

3.2 核酸疫苗

核酸疫苗由编码能引起保护性免疫反应的病原体抗原的基因片段和载体构建而成，在构建多价疫苗方面具有突出的优势。陈洪岩（1999）、刘思国等（2001）分别将IBV S1基因和N基因构建成真核表达质粒， SPF鸡肌肉注射后，结果目的基因在鸡体内得到了表达，鸡获得了一定的免疫力。Minglong 用含IBV N 蛋白C末端120 aa 的cDNA 片段的重组质粒接种雏鸡，证实了在缺乏S1蛋白时，N 蛋白也可以作为DNA疫苗免疫的目的基因，保护雏鸡抵抗急性感染。

3.3 活病毒载体疫苗

活病毒载体疫苗是用利用分子生物学遗传工程技术将保护性抗原基因整合进载体基因组中，构建成使之表达的重组活载体疫苗。Wang X等（2002）用重组鸡痘病毒表达了IBV的S1基因，免疫鸡受到部分保护。Yu等（2003）用重组鸡痘病毒表达IBV的C末端NL蛋白120个氨基酸进行预防研究，诱导了一些IBV株交叉保护免疫，可以很好的抵制和预防IBV强毒的攻击。孙永科等（2005）将鸡II型干扰素基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中，重组鸡痘病毒疫苗在对鸡体的免疫应答中发挥了一定的作用。Johnson MA 等（2003）利用禽 8 型腺病毒表达 IBV S1 基因，对0日龄和6日龄鸡分别进行口服免疫，35 日龄时用同型或异型强毒株进行攻毒，试验结果显示，对于 IBV 同源和异源毒株在支气管的保护率达到 90%～100%。

4 小结

与常规疫苗相比，基因工程程疫苗具有廉价、生产规模大、利用活载体可以研制多价疫苗等优点。但目前的大多数IBV基因工程疫苗与传统IBV疫苗免疫效应相比还是有些逊色，传统的疫苗仍广泛应用。如何进一步提高IBV基因工程疫苗免疫效果的问题已经成为科研人员着力研究的热点。随着分子生物学的不断发展，研制广谱、安全、高效的基因工程苗，以克服传统疫苗的不足之处，已成为未来IB 疫苗研制的方向。