柿子不同部位单宁提取物清除自由基作用的比较研究

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摘 要：比较研究柿子不同部位单宁提出五清除自由基作用，为柿子综合利用提供依据。取10月份新鲜柿，洗净分离得到肉、皮、核、蒂，烘箱烘干捣碎制备干粉，采用水甲醇法提取获得柿子单宁样品，分别就各部分柿子单宁进行清除羟基自由基、DPPH・、ABTS+・能力测定，并于PT、GSP进行对比。柿肉、皮、核、蒂羟基自由基、DPPH・、ABTS+・半数清除率高于PT、GSP，柿肉高于柿皮，柿皮高于柿核，柿核高于柿蒂，差异具有统计学意义（P

关键词：单宁；柿子；清除自由基

中图分类号： S571 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20150501031

我国柿子产量、种值面积均居世界首位。柿子中单宁含量高达2%，柿子单宁是一种植物多酚，具有较强的抗氧化、清除自由基作用，在医药、化妆品等领域具有较高的经济利用价值。我国柿子综合利用方兴未艾，利用水平欠佳，本次研究就柿子不同部位单宁提取物清除自由基作用进行比较，为柿子综合利用提供依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与实际

罗田甜柿，购自附近综合市场。南开大学化工厂产吸附树脂，GSP（原花青素含量>98%、低聚体含量>70%），国药集团产分析纯香草醛、浓盐酸、浓硫酸、甲醇、乙醇，Sigma提供DPPF、四乙氧基丙烷、ABTS，国药集团产分析纯抗坏血栓、香草醛、丙酮。德国Marin Christ公司产ALPHA 1-4LD真空冷冻干燥机，SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵，恒温水浴锅，BS2-100自动分布收集器，可见分光光度计。

1.2 方法

1.2.1 不同部位单宁提取物制备

所有柿子均为新鲜、10月份采摘，洗净后去蒂、核、皮，分离得到肉、皮、核、蒂，烘箱烘干致恒质量。捣碎机捣碎。分别称取一定量柿子各部分干粉，按照料液比1：20加入无水甲醇，1%盐酸，90℃下热回流加热3次，40min/次，合并提取液。提取液以AB-8大孔树脂住吸附，以蒸馏水反复洗脱，直至PH为中性未见测待致未见糖析出，无水甲醇脱洗，旋转蒸发，冷冻干燥获得柿子单宁样品。

1.2.2 抗氧化能力制备

清除羟基自由基能力测定：采用H2O2与二价铁离子混合后产生OH的Fenton反应；采用固态反应时间法，行分光光度实验，波长510m，与空白液进行对照。

清除DPPH・能力测定：实验组，以甲醇为溶剂配置不同浓度样品溶液，与1：1混合2×10-4DPPH・与样品溶液，避光留置30min，行分光光度实验，波长517m，与空白液进行对照，空白组与等体积无水乙醇代替，对照组以等体积甲醇代替样品溶液，连测3次，计算清除率。

清除ABTS+・能力测定：取5mL量密度为7mmol/L的ABTS溶液，与88μL的140mmol/L过硫酸钾混合，避光放置过夜，制备自由基储备液，以无水乙醇稀释成工作也，30℃、734nm下行吸光度检验；配置20μg/mL梯度20～100μg/mL单宁甲醇溶液，加入4mL工作液，振荡30s，20℃下734nm波长处行吸光值测定，并以相同浓度GSP进行对照。

1.3 统计学处理

以SPSS18.0软件包处理所获数据资料，以（±s）表示计量资料，以n（%）表示计数资料，P

2 结 果

柿肉羟基自由基、DPPH・、ABTS+・半数清除率高于柿皮，柿皮高于柿核，柿核高于柿蒂，柿肉、皮、核、蒂羟基自由基、DPPH・、ABTS+・半数清除率高于PT、GSP，差异具有统计学意义（P

表1 柿肉、皮、核、蒂羟基自由基、DPPH・、ABTS+

・半数清除率对比（±s）

组别 羟基自由基

IC50/（mg/mL） DPPH・IC50

/（μg/mL） ABTS+・IC50

/（mg/mL）

柿肉 15.54±0.63 3.42±3.94 4.31±0.05

柿皮 10.85±0.18* 1.78±0.06* 2.04±0.08*

柿核 8.49±0.25** 1.34±0.08** 1.84±0.07**

柿蒂 7.75±0.18** 0.94±0.06*** 1.49±0.08**

PT 5.61±0.92 0.28±0.01 2.14±0.03

GSP 3.49±0.11 0.31±0.01 1.33±0.27

注：与柿肉相比，*P

3 讨 论

抗氧化剂在医药、化工等领域应用极广，清除自由基是医用抗氧化类药物重要特性之一。羟基自由基、DPPH・、ABTS+・是目前研究较透彻、生物氧化反应最常见的自由基，与衰老、细胞损伤密切相关。本次研究中，柿肉、皮、核、蒂羟基自由基、DPPH・、ABTS+・半数清除率高于PT、GSP，柿肉高于柿皮，柿皮高于柿核，柿核高于柿蒂，差异具有统计学意义（P

参考文献

[1] 顾海峰，李春美，徐玉娟.柿子单宁的制备及其抗氧化活性研究[J].农业工程学报，2007，23（5）：241-245.

[2] 陈佩，李平，郝艳宾等.柿果成熟过程中可溶性果胶和单宁含量的变化[J].中国农业大学学报，2012，17（1）：88-92.

[3] 陈湘宁，王武装，吴学瑞.柿子中不同成分与抗氧化活性关系的研究[J].食品科学，2006，27（12）：l10-113.