液相色谱范文精选

摘 要：介绍高效液相色谱仪的流动相的调制方法。

关键词：高效液相色谱仪 缓冲液 流动相 调制

液相色谱法的流动相主要用水性溶剂、有机溶剂,或它们的混合液。另外,水性溶剂也常用于缓冲液。有的资料[1]介绍了用于高效液相色谱法的代表性缓冲液的具体调制方法,但通常对缓冲液的解释往往含糊不清。因此,常因资料上表示的内容与实际的配置方法的不同,而产生流动相的差异,影响色谱图和分析结果。而且,不仅缓冲液,有时还要考虑到溶剂的混合方法等流动相调制方法方面的漏洞等因素[2]。本文以具体的事例,研究流动相调制方法对分析结果的影响。

1)缓冲液的调制

例如,写的是“20mM磷酸缓冲液(PH2.5)”在实际中该怎样调制?不妨举几个能想到的情况。首先,可以确定是使用磷酸的缓冲液,但是,是什么离子不明确。即使就以钠离子而言,“20mM”的浓度弄不清是指磷酸,还是指磷酸钠的浓度。若认为是“20mM”磷酸(钠)缓冲液,“20mM”可看作是磷酸的浓度。另一方面,若把“20mM”看作是钠的浓度,也可以认为是“20mM磷酸二氢钠水溶液调整PH后的缓冲液(而且, 20mM磷酸钠水溶液的PH在5.0附近,只要稍用一点酸就可以调到PH2.5)”,这时,由于调整PH用的酸,产生离子对的效果,或者也许会对分析结果有影响。从上述考虑,会产生对缓冲液有多种解释的可能性。

上述例,具体有3种解释。对分析结果会产生多大影响,见图1所示。上段是“20mM”作为磷酸浓度的解释,将作为“20mM磷酸(钠)缓冲液(PH2.5)”调制的溶液用于流动相的结果。中段和下段“20mM”作为磷酸二氢钠的浓度解释,分别加磷酸和高氯酸调整PH为2.5时的结果。像此例中的二氢可待因那样对保留时间有明显的影响时,给分析方法造成困难。对缓冲液应尽量明确溶液的特性和调制方法,以免产生不同的解释。(如图1）

2)有机溶剂和水性溶剂的混合方法

有机溶剂和水性溶剂的混合液作为流动相是经常的,但是由于混合方法的不同,有时分析结果相关很大。作为一例,20mM磷酸(钠)缓冲液(PH2.5)90%与乙腈10%的混合时,混合比为9:1的话,20mM磷酸(钠)缓冲液(PH2.5)与乙腈的体积比为9:1,也就是可以解释为各自按体积比率的相当量称取后进行混合。另外,按10%乙腈解释的话,解释为用20mM磷酸(钠)缓冲液(PH2.5),将乙腈稀释调制也可以成立。在后者的情况下,产生混合体积减少部分,余下的添加20mM磷酸钠缓冲液。两者虽然没有太大的差别,但,如图2所示,由于混合的方式不同,分析结果(特别是保留时间)也会有显著 差别,这点必须注意。（如图2）

鬼针草为菊科植物鬼针草属多种植物的全草，药材资源丰富，广泛分布于热带及温带地区，遍布全国各地，极易采集。根据文献报道，鬼针草属多种植物含有槲皮素成分［1］；槲皮素具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、镇痛、抗血小板聚集、扩张冠状动脉等作用［2～4］。《中国药典》尚未收载鬼针草药材的质量标准。《贵州中药材标准》收载三叶鬼针草BidenspoilsaL.、鬼针草BidensbipinataLinn.的干燥全草，《湖南中药材标准》收载三叶鬼针草BidenspoilsaL.的干燥地上部分，《甘肃中药材标准》1995年收载鬼针草BidensbipinataLinn.，《广西中药材标准》1990年收载三叶鬼针草BidenspoilsaL.、白花鬼针草BidenspoilsaL.var.radiataSch.-Bip.的干燥全草，河南中药材标准1991年收载三叶鬼针草BidenspoilsaL.、鬼针草BidensbipinataLinn.、金盏银盘Bidensbiternata(Lour.)Merr.EtSherff.的干燥全草，《上海中药材标准》收载鬼针草BidensbipinataLinn.（婆婆针）的干燥地上部分［5］。从国内地方标准收载情况可以看出全国各地均有广泛的应用，入药部位为全草或地上部分，本实验拟采用RP-HPLC法建立鬼针草属药材中槲皮素的含量测定方法并比较鬼针草不同药用部位和不同种中槲皮素的含量，为该类药材的传统入药部位是否正确和质量评价提供参考依据。

1仪器与材料

美国waters2695高效液相色谱仪，VWD检测器；鬼针草采自云南红河州、广西，经刘圆副教授和戴斌教授鉴定为菊科鬼针草属植物狼杷草BidenstriparticaLinn.，白花鬼针草BidenspilosaL.var.ratiataSch-Bip.，婆婆针BidensbipinataLinn.，三叶鬼针草BidenspilosaLinn.的干燥全草；槲皮素（批号081-9304，中国药品生物制品检定所，含量测定用）；甲醇为色谱纯；水为二次重蒸水；其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1色谱条件KrosmasilC18柱（4.6mm×250mm，5μm），柱温30℃，流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液（41∶59），检测波长360nm，流速1ml·min-1。槲皮素峰可以达到基线分离，峰形对称，分离度好，按照槲皮素峰计，理论塔板数不应低于5000。见图1～8。

图1槲皮素对照品色谱图（略）

图2三叶鬼针草（云南产）根色谱图（略）

图3三叶鬼针草（云南产）茎色谱图（略）

【关键词】柴胡；,,高效液相色谱

摘要：目的制定柴胡药材中柴胡皂苷a、d的含量测定方法。方法用高效液相色谱蒸发光散射检测法（HPLCELSD）,AlltimaC18色谱柱,流动相甲醇水（80∶20）,速度0.8ml・min1；蒸发光散射检测器参数：漂移管温度40℃，气压3.5bar。结果柴胡皂苷a和柴胡皂苷d分别在1.908~19.08μg（r=0.9996）和1.804~18.04μg（r=0.9992）范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.35%（RSD=1.26%）和97.64%（RSD=1.58%）。结论该方法简便、灵敏、可靠、准确、重现性好,可作为柴胡药材的质量控制方法。

关键词：柴胡；高效液相色谱蒸发光散射检测法；柴胡皂苷

DeterminationofSaikosaponina,dinRadixBupleuribyHPLCELSD

Abstract：ObjectiveTodeterminesaikosaponina,dinRadixBupleuribyHPLCELSD.MethodsHPLCELSDwasusedinthequantitativeanalysisbyusingAlltimaC18chromatographycolumnandmethanolwater(80∶20)asamobilephase.Theflowrateofmobilephasewas0.8ml・min1.Thetubetemperatureofthedetectorwas40℃.Thepressofpureairwas3.5bar.ResultsThelinearrangesforsaikosaponinaanddwere1.908~19.08μg（r=0.9996）and1.804~18.04μg（r=0.9992）,theaveragerecoverieswere98.35%(RSD=1.26%)and97.64%(RSD=1.58%),respectively.ConclusionThismethodiseasy,sensitive,reliable,accurate,reproducibleandcanbeusedasthequalitycontrolmethodofRadixBupleuri.

Keywords：RadixBupleuri;HPLCELSD;Saikosaponin

柴胡药材来源于伞形科植物柴胡BupleurumchinenseDC.或狭叶柴胡BupleurumscorzonerifoliumWilld.的干燥根。为常用中药,在我国已有2000多年药用历史,具有和解表里、疏肝、升阳之功效［1］。其主要有效成分为柴胡皂苷,其中柴胡皂苷a，d的活性较强,具有抗炎、保肝、降低血中胆固醇等药理活性［2］。应用高效液相色谱法测定柴胡皂苷a，d含量的报道较多［3，4］。但由于检测波长在210nm,杂质峰干扰十分严重,检测灵敏度低,影响了含量测定的准确性。本文应用HPLCELSD法同时测定柴胡皂苷a，d的含量,其杂质峰干扰小,分离度好,灵敏度高,出峰时间短,便于操作。

1仪器与试药

[摘要] 本文综述了高效液相色谱法与其他色谱法相比下所具有的优点、分类、应用、缺点及发展前景。

[关键词] 高效液相色谱法；优点；应用；缺点；前景

[中图分类号] R927[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）08（a）-028-02

Generality of HPLC

ZHANG Jian-hong,CHEN You-sheng

(Department of Pharmacy, Guangdong Food and Drug Vocational College,Guangzhou 510520，China)

[Abstract] This paper summarizes the advantages, disadvantages, types, applications and foreground of HPLC

[Key words] HPLC; Advantage;Application;Disadvantage;Foreground

四乙基铅作为抗震剂曾广泛应用于汽油中，但它是剧烈的神经毒物，挥发性较强，易侵犯人的中枢神经系统，引起急慢性中毒及“三低症”，高浓度下可致死［1］，且易在人类重要食物链中，特别是在鱼类、植物、贝壳体内发生生物蓄积，因此对人和环境的危害较大，至今仍能从一些环境水体、土壤及人体血液中检测出四乙基铅［2－4］。根据标准要求，四乙基铅的分析参照《生活饮用水标准检验方法》(GB/T5750.6—2006)进行，方法为双硫腙比色法，但该法操作繁琐，精密度很难控制。石墨炉原子吸收光谱法［5］、原子发射光谱法［6］、吹扫捕集－气相色谱－质谱［7］等方法也应用于水体或其他介质中四乙基铅的测定。经过查阅相关文献，目前未见利用高效液相色谱测定四乙基铅的文献报道。该文利用高效液相色谱法分析环境水体中的四乙基铅，并对株洲饮用水源地水体中四乙基铅类污染物进行了分析，结果令人满意。

1实验部分

1.1仪器与试剂Agilent1200型高效液相色谱仪，带G1365D紫外检测器;ZORBAXEclipseXDB-C18色谱柱(4.6mm×150mm，5μm);OrganomationN-EVAP氮吹仪。四乙基铅储备液:200mg/L(甲醇溶液，美国);二氯甲烷(色谱纯);甲醇(色谱纯);氯化钠(优级纯);无水硫酸钠;玻璃棉;氮气(纯度≥99.999%)。

1.2样品预处理取经0.45μm滤膜过滤后的水样1000mL，转入分液漏斗中，加入50g氯化钠，加入30mL二氯甲烷，分2次萃取，充分振摇5min，静置分层后，将有机相通过上方装有无水硫酸钠的漏斗，接至100mL烧杯中，合并有机相，将有机相分次转入离心管中，在30℃下用氮吹仪吹至近干，加入1.0mL甲醇，继续吹至溶液为0.5mL左右，用甲醇定容至1.0mL。1.3色谱条件以95%甲醇+5%水为流动相，流速1.0mL/min，柱温20℃的条件下，用ZORBAXEclipseXDB-C18色谱柱分离四乙基铅，在200～340nm之间，用Agilent1200高效液相色谱仪每20nm设一个测定波长，进样体积为10μL。

2结果与讨论

2.1吸收波长的选择波长与吸收峰面积关系见图1。由图1可见，四乙基铅的最大吸收波长在280nm附近，且280nm处的杂峰很少，故选择280nm作为四乙基铅的测定波长。

2.2萃取试剂的选择GB/T5750.6—2006中用双硫腙比色法分析四乙基铅时，三氯甲烷作萃取试剂，但三氯甲烷在空气、水和光的作用下酸度增加，因而对金属有强烈的腐蚀性，且三氯甲烷毒性较大，而二氯甲烷是甲烷的氯化物中毒性最小的，具有溶解能力强的优点［8］，故选择二氯甲烷作萃取试剂，得到的结果令人满意。

2.3校准用四乙基铅储备液配制成10μg/L的四乙基铅中间使用液，用使用液配制0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00μg/mL的四乙基铅标准系列，以保留时间定性、峰面积定量，绘制校准曲线。以质量浓度为横坐标、响应峰面积为纵坐标，绘制校准曲线，线性方程为y=3.068x－0.0349，相关系数为0.99977。0.80mg/L四乙基铅标准溶液色谱峰见图2。

提要：目的：测定葛粉中葛根素的含量。方法：用HPLC法测定，以MeOH－H2O－HAc（30：70：0.5）为流动相，250nm为检测波长。结果：葛根素呈良好的线性关系，平均回收率为98.6%,RSD为1.76%。结论：该法简单、快速、准确。

关键词：葛粉;葛根素;HPLC

Abstract:Object:DeterminationofPuerariainPuerariaPowderMethods:PuerariaweredeterminedbyHPLC.ThemobilephasewasMeOH－H2O－HAc（30：70：0.5）.Detectionwavelengthwasat250nm.Results:Puerariashowedagoodlinearrelationship.Theaveragerecoverywas98.6%andRSDwas1.76%.Conclusion:Thismethodwassimple,quickandaccurate.

Keywords:PuerariaPowder;Pueraria;HPLC

葛根为豆科植物野葛Puerarialobata(Willd.)Ohwi的干燥根,是常用中药材,具有解肌退热，生津，透疹，升阳止泻功效，用于外感发热头痛、项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，高血压颈项强痛等[1]。现代研究证实，葛根中的主要有效成分为葛根素等异黄酮类化合物，具有抗炎解热、扩张冠状动脉血管、增加冠状动脉血流量的作用，同时也有降低血压的作用。有关葛根中葛根素等异黄酮的含量测定研究已有不少报道[2-5]，但对葛粉中葛根素含量测定报道不多。本文对葛粉中葛根素的提取条件和测试条件等进行比较研究,并采用高效液相色谱法对葛粉样品进行了定量分析,结果令人满意。

1实验部分

1.1仪器与试剂

岛津LC－10Atvp高效液相色谱仪；SPD－10Avp紫外检测器；岛津UV－265紫外分光光度仪，多功能榨汁机/搅拌机SG300－I（上海科骏电器有限公司）。甲醇（色谱纯），水（二次蒸馏），其余均为分析纯。葛根素对照品（中国药品生物制品检定所）；鲜葛（浙江省永嘉县潘坑乡）。

[摘 要]采用液相色谱法来对水中的丙烯酰胺和灭草松进行检测，并且进行定量分析。通过实验发现，丙烯酰胺的含量需要被控制在20-400μg/L的范围内，其性质最优。在方程中显示的系数为0.99772。丙烯酰胺的样品回收率可以高达92.2%左右，标准差也在3.4%-10.9%之间。灭草松主要存在于水管中，在检测的过程中需要对样品进行浓缩之后才能够进行分析。次永液相色谱法检测水肿的灭草松其标准差可以控制在2%以内，回收率高达93%。采用这种检测方式对二者进行检测，不仅操作简单，而且检测结果比较准确。

[关键词]液相色谱法；丙烯酰胺；灭草松

中图分类号：O652.63 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）03-0067-01

丙烯酰胺从其物理性状上看是一种白色晶体，是制备聚丙烯酰胺的主要原料，其毒性作用较强，成为致癌物之一。虽然研究人员对食品领域的丙烯酰胺进行了深入研究，但是对于环境和水体中的研究却寥寥无几。可见研究方式还不够成熟。对于灭草松来说，这是在我国农业生产中使用量相对较多的一种农药，其对环境产生的影响比较严重。现如今，人们对水体质量提出了更高的要求，采用高效的检测方式已经成为一种趋势。对于丙烯酰胺和灭草松这两种物质，在检测过程中都可以采用液相色谱的检测方式，其科学性和准确性都可以达到标准。

1 材料与方法

1.1 仪器设备和试剂

仪器：在对丙烯酰胺进行检测的过程中，主要采用的固相萃取仪、全自动定量浓缩仪以及高效液相色谱仪等等。检测灭草松在采用高效液相色谱仪的过程中还需要配有二极管阵列检测器。这些仪器都是从美国进口，检测精准度相对较高。

试剂：丙烯酰胺样品100g，将样品存储在4℃左右的冰箱中，除此之外，还需要甲醇，超纯水，滤膜等等。检测灭草松所用的试剂为灭草松样品1000μg/mL、乙腈甲醇、抗坏血酸以及盐酸等等。这些样品在应用的过程中都已经经过了专业的检测，各项指标都达到了实验的标准。

摘 要：液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术是一项既可定性又可定量检测的较完美的、应用范围广、与传统分离分析方法相比具有独特优势的技术。本文在综合近年来有关文献的基础上系统地阐述了液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术及其在食品、医药、饲料、化学化工等领域的应用进展，以期为在生产和科研中进一步发挥此技术的独特优势而提供理论参考。

关键词：液相色谱 液相色谱-质谱联用 研究应用

中图分类号：O657 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2012）09（a）-0094-02

液相色谱-质谱联用（Liquid chromatography-mass spectormetry，简称LC-MS）技术是由于气相色谱-质谱（GC-MS）不能分离不稳定和不挥发性物质，于20世纪末迅速发展和成熟起来的一种较完美的、与传统分离分析方法相比具有独特优势的现代分离分析方法，在食品、医药、饲料、化学化工等领域起着十分重要的作用，已日益受到人们的关注。本文在综合国内外有关文献的基础上系统地阐述了液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术及其在食品、医药、饲料、化学化工等领域的应用成果，以期为此技术在生产和科研中进一步发挥其独特的优势而提供理论参考。

1 LC-MS技术概述

LC-MS主要由液相色谱系统（LC）和质谱仪（MS）等部分组成。LC系统由储液器、泵、进样器等部分组成。MS又称质谱计，由离子源、质量分析器和离子检测器等部分组成，按应用范围分为同位素质谱仪、有机质谱仪和无机质谱仪；按工作原理分为静态仪器和动态仪器。简言之，此技术是先通过液相色谱对所检测物质进行分离，然后通过质谱来鉴定，具备LC的特性（如分辨率高、灵敏度高）和MS的特点（如测试速度快、精确度高）。

液相色谱的分析对象主要是难挥发和热不稳定物质，这与质谱仪中常用的离子源要求样品汽化是不相适应的。为了实现联用，一般是选用合适的“接口”以协调液相色谱和质谱的不同特殊要求。常用于液相色谱质谱联用技术的接口主要有移动带技术（MB）、热喷雾接口、粒子束接口（PB）、快原子轰击（FAB）、电喷雾接口（ESI）等。其中，电喷雾接口的应用极为广泛，其主要由大气压离子化室和离子聚焦透镜组件构成。喷口一般由双层同心管组成，外层通入氮气作为喷雾气体，内层输送流动相及样品溶液。通常要对LC-MS进行定期校准以保证其测量结果的准确性。

2 LC-MS技术的应用

摘要 随着液质联用技术的不断发展，液相色谱―质谱联用仪广泛应用于食品安全、药品检测和开发，农药残留、水质分析和蛋白质生物标志物的发现和验证等工作。本文通过对液相色谱-质谱联用仪的校准，可以很好的控制在实验分析过程中因使用的液相色谱-质谱联用仪的精度误差而带来的分析误差。本文结合平时的工作积累，就液相色谱-质谱联用仪计量特性校准方法进行讨论。

关键词 液相色谱－质谱联用仪；计量；校准；方法

中图分类号O657.7+2 文献标识码A 文章编号 1674-6708（2011）35-0084-02

0 引言

液质联用技术是20世纪90年展起来的一门综合性技术，液相色谱仪的高分离效能与质谱仪的高灵敏度、高选择性使之成为科学研究与检测领域强有力分析工具。液相色谱―质谱联用仪广泛应用于食品安全、药品检测和开发，农药残留、水质分析和蛋白质生物标志物的发现和验证等工作。而液相色谱―质谱联用仪的准确可靠是利用仪器进行科学试验的前提；判断仪器是否准确可靠就需要建立一套科学有效并且可行的校准方法。

目前，实验室用液相色谱―质谱联用仪主要由液相色谱和质谱仪两部分组分；与液相色谱连接质谱计有单极，多极两种。其中，液相色谱的作用是将分析样品通过色谱柱进行分离；质谱仪的作用是将分离出的样品转化为运动的带电气态离子碎片，引入磁场并按质荷比（m/z）大小分离并记录，其过程为可简单描述为：

其中，z为电荷数，e为电子电荷，U为加速电压，m为碎片质量，V为电子运动速度。质谱仪一般由进样系统、电离源、质量分析器、真空系统和检测系统构成。

1 计量特性

摘要：目的：采用高效液相色谱法测定头孢他啶有关物质。方法：对于本身纯度低于85%的药品，采用高效液相色谱法梯度洗脱法，提出对自身对照溶液主峰进行校正。加强对头孢他啶杂质控制。结论：方法准确，易行，适用于头孢他啶杂质控制。

关键词：头孢他啶 高效液相色谱法 梯度洗脱 杂质控制

1、试剂及对照品

（1）磷酸二氢铵（分析纯）；（2）磷酸 （分析纯）；（3）乙腈（色谱纯）；（4）盐酸（分析纯）；（5）头孢他啶对照品（中国药品生物制品检定所）。

2、主要仪器及用具

（1）安捷伦1200高效液相色谱仪；DAD检测器；（2）分析天平，感量0.00001g；（3）超声波清洗仪；（4）容量瓶；（5）移液管；（6）量筒；（7）烧杯；（8）抽滤装置；（9）水浴锅。

3、色谱条件

色谱柱。用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂4.6mm×250mm（5um）