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集精系统

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集精系统范文第1篇

【摘要】 目的 分析影响转基因小鼠制作的因素,优化转基因动物制作过程,建立适合本实验室的转基因小鼠制作方法。方法 利用显微注射方法制作转基因小鼠,对超数排卵的程序、受精卵的收集、外源基因的显微注射、胚胎移植和术后护理等影响因素都进行了对比研究。结果 优化了转基因小鼠的制作过程,减少了影响胚胎移植成功的不利因素,提高了过氧化物酶增殖体激活受体γ2(PPARγ2)转基因小鼠的制作效率(2.9%)。结论 成功制作了PPARγ2转基因小鼠,优化转基因小鼠的制作程序是提高转基因成功率的可行途径。

【关键词】 过氧化物酶增殖体激活受体γ2;转基因;小鼠;影响因素

转基因小鼠是生物医学研究中重要的动物模型[12]。1980年,Gordon等[3]首次利用显微注射方法成功制作转基因小鼠,开创了人类利用转基因动物模型的新纪元,此后各种转基因动物相继培育成功,在生物医学研究领域得到广泛的应用。到目前为止,Gordon等创立的将外源基因直接注射到受精卵雄原核中,进行胚胎移植,获得转基因动物的方法,仍然是目前制作转基因动物的主要方法之一。在本研究中,我们通过对过氧化物酶增殖体激活受体γ2(peroxisome proliferatoractivated receptor γ2, PPARγ2)转基因小鼠模型制作过程的影响因素进行分析,探讨提高转基因效率的可行途径,建立适合本实验室的转基因小鼠的制作方法。

1 材料与方法

1.1 实验动物

C57BL/6J小鼠由西安交通大学医学院实验动物中心提供。所有实验用小鼠均在标准动物房饲养,温度控制在(22±3)℃,光控(12h明/12h暗),自由采食,Co60灭菌饲料由第四军医大学实验动物中心提供。

1.2 试剂、药品和仪器

孕马血清(pregnant mare serum, PMS, 宁波激素厂),人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, hCG,宁波激素厂),透明质酸酶(Sigma),2×Taq PCR 试剂盒(北京天为时代),蛋白酶K(Invitrogen),M2和M16培养液(自制)。仪器:CO2培养箱(Shel lab),P97拉针仪(Sutter),MF900烧针仪(Narishige)体视显微镜(上海光学仪器厂),显微注射系统(Eppendorf),PCR 仪(ABI),凝胶成像系统(Syngene)。

1.3 转基因小鼠的制作方法[4]

采用显微注射方法,其制作流程如图1所示。

1.3.1 目的基因的构建

构建ap2+PPARγ2(cDNA)目的基因,克隆、扩增、纯化后备注射。

1.3.2 超数排卵和同期

PMS和hCG诱发供体雌鼠(donor)同期和超数排卵。在实验第1天腹腔注射PMS(0.5u/只),46-48h后给供体鼠注射hCG(0.5u/只),hCG注射当天(实验第3天)下午和雄鼠合笼,次日早晨6∶30-8∶00检查雌鼠有无阴栓来判定是否已经成功,成功的雌鼠阴道口可见白色的阴道栓。

1.3.3 受体鼠(recipient)的准备

实验开始前应该提前准备输精管结扎雄鼠,挑选至少两次和雌鼠后都不能使其受孕的结扎雄鼠备用。实验第3天下午挑选数只雌鼠和结扎雄鼠合笼,次日晨6∶30-8∶00检查雌鼠阴栓来判定是否已经,成功的雌鼠用来作为胚胎移植的受体鼠。

1.3.4 受精卵的收集

处死供体鼠,打开腹腔,取出输卵管(保留一小段子宫)。将输卵管置于M2培养液中,用小镊子撕开输卵管膨大部,可见有受精卵团溢出,用吸管将受精卵团转移至含有透明质酸酶的M2培养液滴中,吹吸数次,洗掉泡沫细胞[5]。将受精卵转移至含有M16培养液滴的培养皿中,CO2培养箱内短暂培养。将受精卵转移至含有M16培养液滴的注射用平皿中,覆盖矿物油,准备显微注射。

1.3.5 显微注射

首先在倒置显微镜低倍镜下找到受精卵,然后转换至200倍下进行显微注射。寻找可以清晰看见两个原核的适合注射的受精卵(图2A),用持卵针吸住一个卵,将注射针刺入受精卵雄性原核(因雄性原核较大,易注射),加压将PPARγ2基因溶液注射到受精卵雄性原核,可见原核膨大(图2B)。注射后受精卵CO2培养箱内短暂培养。

1.3.6 胚胎移植

沿受体鼠背部中线,最后一根肋骨水平切1cm左右切口,找到输卵管。将DNA注射完毕后将外观形态良好的受精卵吸入移卵管,解剖镜下将受精卵移植到受体鼠输卵管壶腹部,缝合切口。

1.3.7 转基因小鼠的鉴定

约19-21d后受体鼠产下子代仔鼠。取大于3周龄仔鼠尾尖0.5-1cm提取DNA,PCR初步鉴定基因导入情况[67],筛选出转基因阳性小鼠。

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1.5 统计学处理

采用 SPSS11.5 统计软件进行分析。根据资料类型分别采用t检验和χ2检验,以P

2 结 果

2.1 激素注射时间和收集受精卵时间对受精卵细胞的影响

为了探索适合本实验室条件的受精卵采集方法,我们设计三个不同实验,进行比较研究。第1组:第1天13∶00 腹腔注射PMS,第3天12∶00给hCG,第4天11∶00收集受精卵。第2组:第1天11∶00腹腔注射PMS,第3天10∶30给hCG,第4天13∶00收集受精卵。第3组:第1天11∶00腹腔注射PMS,第3天10∶30给hCG,第4天14∶30收集受精卵。其中第1组从104只供体鼠收集到1374枚卵细胞,平均每只收集13枚;第2组从102只供体鼠收集到1750枚卵细胞,平均每只收集17枚;第3组从172只供体鼠收集到2756枚卵细胞,平均每只收集16枚。经统计学分析,第2组和第3组收集的受精卵数显著多于第1组(P均

2.2 注射DNA溶液的量对受精卵的影响

外源DNA溶液注射过多容易引起受精卵溶解,过少制作效率低[4]。我们统计了12次原核不同DNA溶液注射量对受精卵存活影响的数据,第1组:原核稍微膨大(约膨胀30%-60%,根据受精卵原核大小,显微注射时肉眼估计)。第2组:原核显著膨大组(约膨胀60%以上)。数据显示第1组受精卵存活率明显高于第2组(表1)。表1 受精卵注射不同DNA溶液量后的成活率比较(略)

2.3 胚胎移植方法对实验结果的影响

传统的向输卵管移植胚胎要撕破囊膜(bursa)或剪开一个小口[4]。我们解剖胚胎移植失败的受体鼠发现,撕破囊膜进行胚胎移植手术容易出现因炎症引起的输卵管部位与腹壁的黏连,黏连发生率可达60%(9/15),而通过囊膜穿刺移植胚胎组的黏连率只有20%(2/10),黏连率显著低于前者(P

2.4 转基因效率

与实验程序优化前我们制作成功的SCD1转基因小鼠相比,改进转超数排卵、同期、胚胎移植等方法以后,PPARγ2转基因小鼠制作中基因整合率和转基因总效率等明显提高,各项指标如表2所示。小鼠出生后3周,剪取0.5-1cm尾尖,酚氯仿抽提法提取DNA做PCR检测,结果显示获得了转基因阳性小鼠(图3)。表2 转基因小鼠制作程序优化前后效率比较(略)

3 讨 论

转基因动物在生物医学研究中的应用越来越广泛[2,810],但是转基因动物制作的成功率较低一直是该方法的瓶颈[6,8]。目前为止,显微注射法仍是制作转基因动物的最常用方法之一。显微注射方法的不足之处在于其转基因效率较低,目的基因向宿主动物基因组的插入是随机的,细胞核内的过程我们很难控制。Brinster等[11]人分析了注射DNA的类型、浓度和缓冲液成分等影响因素对外源DNA导入效率的影响。我们从优化转基因小鼠制作过程中的影响因素入手,探索提高显微注射方法的转基因效率。寻找适合自身实验条件的转基因动物制作程序是提高转基因效率的可行途径之一。我们的实验结果显示,激素注射时间和供体雌鼠取卵时间、原核DNA注射量、胚胎移植手术术式等因素均可影响整个转基因动物模型的制作过程。首先,调整激素注射时间和取卵时间可以获得更多的适合用于原核注射的受精卵;其次,原核DNA注射量是比较难以把握的,我们可以通过原核膨大的程度来粗略的衡量。实验过程中发现DNA注射量过大导致核内压力增大,当拔出显微注射针后可见部分DNA溶液(可能同时含有部分核内物质)因核内压力过大而溢出,原核萎缩,过多的注射量还促进了细胞的裂解。因此,控制合适的DNA注射量是十分重要的。我们认为显微注射后,原核比注射前膨大30%-60%是比较合适的。另外,胚胎移植是转基因动物制作过程中的重要技术之一,影响胚胎移植的因素有很多[12]。减少手术出血是手术成功的重要保证条件之一。在胚胎移植时通过改变传统的通过撕破囊膜后进行输卵管移植的手术方式可以降低术中出血的可能性。囊膜毛细血管较为丰富,撕破囊膜时候完全避免血管是比较困难的。不过囊膜是透明的,可以用吸卵管或细针头穿一个小口,吸卵管通过这个小口进入输卵管伞部移植受精卵。这样可以减少出血,降低输卵管部位术后和腹壁的炎性粘连。实验过程中我们也发现,改善和加强术后护理可以明显减少代孕母鼠术后死亡率,从而提高胚胎移植的成功率,获得更多的仔鼠,提高制作转基因小鼠的效率。通过对以上影响因素的优化,提高了胚胎移植成活率、基因整合率和转基因总效率。转基因动物的制作是实践性很强的技术,通过熟练技术方法,优化显微注射方法制作转基因动物的程序,转基因效率仍有提高的空间。

【参考文献】

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\[3\]Gordon JW, Scangos GA, Plotkin DJ, et al. Genetic transformation of mouse embryos by microinjection of purified DNA \[J\]. Proc Natl Acad Sci USA, 1980, 77(12):73807384.

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\[5\]刘恩岐, 杨鹏辉, 倉林讓,等. 小鼠胚胎吸管的改进 \[J\]. 西安交通大学学报(医学版),2002, 23(6):609610.

\[6\]Liu E, Kitajima S, Morimoto M. Create transgenic rabbits by microinjection human apoAII gene into fertilized eggs \[J\]. ACAD XJTU, 2004,16(1):6770.

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\[8\]刘恩岐,郑华东,赵四海. 转基因家兔的制作 \[J\]. 动物学杂志,2006, 41(3):6471.

\[9\]刘恩岐, 范江霖. 转基因兔在动脉粥样硬化研究中的应用及进展 \[J\]. 中国动脉硬化杂志, 2003, 11(4):371375.

\[10\]刘红,张钦宪,胡以平. 乙型肝炎病毒核心基因转基因小鼠的建立 \[J\]. 郑州大学学报(医学版), 2004, 39(3):13.

集精系统范文第2篇

关键词: 控冷系统层流冷却PLC

1 引言

2500mm热连轧生产线的原有轧后冷却系统控制系统和模型都很简单,仅为简易喷淋装置,尺寸为2200*20000mm2,冷却速度仅有4~5℃/s,已经不能满足生产工艺的需要。随着控冷技术的不断发展,层流冷却技术(CTC)得到了广泛应用[1]。层流冷却技术包括控制冷却装置的能力、冷却强度、冷却速度、卷取温度及控制精度等从精轧到卷取之间的全部冷却过程,主要是通过控制系统中的集管开启数目、集管流量及不同的控制策略,以保证带钢从终轧温度(800℃~900℃)按一定温降速率冷却到卷取温度(550℃~700℃)。

2 层流冷却数学模型

层流冷却数学模型将直接影响到卷取温度的控制精度,数学模型主要包括空气冷却模型和喷水冷却模型两部分[2]。带钢从精轧机末机架出口到卷取机入口的冷却过程如图1所示:图中,Tt为终轧温度,TC 为卷取温度,对于AB的温度范围是由所生产带钢的钢种和规格来确定。而数学模型的主要任务就是根据所轧带钢的钢种和规格要求,确定打开第一组集管的位置(即A点),所需打开的冷却集管的组数以及相应的冷却集管开启和关闭的组合(即确定B点),后者可由带钢冷却策略来确定。带钢轧后冷却过程中,带钢经历了空冷、水冷、再空冷等热交换过程,因此带钢轧后控冷过程中应包括如下数学模型:1)带钢空冷过程中的温度场计算模型;2)带钢水冷过程中的温度场计算模型;3)热交换系数数学模型;4)热传导系数数学模型;5)与热交换过程相关的物理参数数学模型;6)带钢的冷却速度计算模型;7)卷取温度前馈控制数学模型;8)卷取温度反馈控制数学模型;9)模型参数自学习模型。

3 层流冷却PLC控制系统

整个控制系统选用西门子公司的S7-400作为主控制器。S7-400CPU的最强大功能也可用一个集成的PROFIBUS-DP接口达到,并可作为主设备或从设备设置或与扩展接口模块ET200M通讯,可连接64个站(1个ET200M站最多可插入8个模块)。数据传输率为12M位/S。计算机控制系统采用开放式结构,有利于系统今后的扩充和升级。层流冷却计算机控制系统设置为2级系统,其中1级为基础自动化系统,2级为过程控制系统,通信网络采用工业以太网(Industrial Ethernet)和PROFIBUS-DP现场总线[3]。层流冷却计算机控制系统的结构如图2所示。

过程控制级主要是对整个冷却过程进行跟踪和控制,进行各种控制数学模型及参数的计算与设定。在设定计算完成后,设定值传递给基础自动化系统,数据由其进行管理,控制具体的执行时序。该级通过光纤工业以太网与基础自动化级的PLC及现场生产控制计算机系统进行通讯。

基础自动化级包括PLC 控制器及其远程I/O、操作台及相应的应用程序,负责冷却过程中根据设定值和带钢的位置对相关阀门的开闭动作时序进行控制,并提供各测量值和检测信号。PLC层流冷却系统配置及网络组成

层流冷却系统PLC由主站和3个远程I/O站组成。主站包括2台柜子,分别为电源柜、PLC柜。ET200M1和ET200M2为控制冷却现场控制箱,这些控制箱安装在层流冷前设备的走台上,ET200M3安装在控冷操作台上,与指示灯和开关、按钮相连[4]。

4 层流冷却系统控制过程

根据中厚板轧机控冷工艺的要求,层流冷却控制系统主要通过PLC对集管控制单元的气动薄膜阀进行ON/OFF控制。侧喷阀的开关控制。以ON/OFF控制方式来对其进行控制。侧喷需要3个继电器输出方式的DO。根据控冷区钢板的微跟踪,可计算出钢板的头部距离和尾部距离(相对于控冷入口热检)。在钢板头部到达相应的侧喷阀时,打开相应的侧喷阀;在钢板尾部离开后关闭相应的侧喷阀。为了吹掉钢板上残存的冷却水、水汽及氧化铁皮,确保HMD和红外测温仪的可靠工作,控制冷却区的入口和出口分别安装压缩空气吹扫装置,端部压缩空气吹扫阀的控制需要2个继电器输出方式的DO。钢板头部到达冷后吹扫阀前的一定位置,打开冷后吹扫阀。当控冷出口热检检测到钢板尾部时,关闭冷后吹扫阀[5]。

控制系统中对所有模拟输入信号进行数据采集和处理,包括控制冷却区入口钢板温度、控制冷却区出口钢板温度、电动调节阀开度、高位水箱冷却水温度、高位水箱水位、集管的流量。这些信号均为4~20mA电流信号,经标度变换后存入相应的寄存器中,同时通过以太网络传送给过程计算机,供过程计算机模型计算时使用[6]。

5 层流冷却设备

层流冷却装置形式为无惯性管式层流冷却。层流冷却设备安装在四辊轧机和矫直机之间,控冷机械设备区域全长19m,在控冷辊道上下方共布置14组层流冷却集管。前10组为粗冷段,后4组为精冷段。粗冷段作为主冷区,精冷段为精调控制区。出水方式为上集管上排布直集管,下部喷管,在中厚板上形成层流。上、下高密集管控制阀组28组;侧喷装置3组(每组2个喷嘴),侧喷装置控制阀组3组,用侧喷泵供水;压缩空气吹扫装置2组,控制阀组2组;气动控制系统管线;挡水板自水冷系统等组成,如图3。

图3层流冷却系统设备配置图

每组集管由1组控制阀组控制,每组控制阀组由1个手动蝶阀(检修)、1个电动调节阀(流量调节)和1个气动薄膜阀组成。侧喷装置是用于喷扫钢板表面的积水,提高每组上部层流集管的冷却效率。侧喷装置的高压水由两台侧喷泵提供,两台泵的工作方式为一工一备。吹扫装置是用于将钢板表面上的热水膜和蒸汽膜吹扫掉,同时将冷却区域内的热气挡在冷却区域内,使冷却区前后设置的一次仪表得到保护,能够测到准确、真实的数据,以确保热检和红外测温仪的可靠工作。

同时在层流冷却线上布置了相应的检测仪表,包括热金属检测器、激光检测器、高温计等来实现跟踪带钢、温度实测及模型修正功能。在供水总管上设置了水温与水压测量仪表,高位水箱上设置液位计等。

6 系统应用

层流冷却控冷系统改造完成后,经过现场检测,冷却速度可以控制在10~12℃/s,温度控制精度在15%以内的带钢达到96.37%。各项指标满足了控冷工艺的要求,所生产的产品质量均符合国家要求。同时不断在生产过程中优化和学习,完善层流冷却系统的模型和功能。为轧制一些特殊要求的钢种提供了有利保证。

参考文献:

[1]宋建桥,控制轧制技术和控制冷却技术在炉卷轧机中的应用[J].宽厚板,2004,10(4):22-25

[2] 片锦香,柴天佑,贾树晋,岳恒.层流冷却系统过程优化控制仿真实验平台[J]系统仿真学报2007,19(20)5667-5671

[3] 王才仁,谢志雄,庄庆辉.韶钢热轧带肋钢筋控轧控冷工艺生产实践[J].轧钢,2007,24(6):69-71

[4] 黄远坚,王学志.控轧控冷工艺在2500mm中厚板生产线上的应用[J].宽厚板,2006,12(1):24-29

集精系统范文第3篇

【关键词】 ,中药

[摘要] 目的:从神经内分泌调节及基因表达的角度,探讨调整性早熟儿童青春发育进程的滋阴泻火中药和益肾填精中药有效调节下丘脑垂体促性腺机能、促生长机能的作用机制。方法:青春期大鼠分别予以喂饲滋阴泻火中药或益肾填精中药。采用神经生物学实验方法(下丘脑推挽灌流、组织匀浆、脑片孵育及免疫组化法)检测下丘脑促性腺区促性腺激素释放激素(gonadotropinreleasing hormone, GnRH)的含量、脉冲释放频率与幅度,以及中枢氨基酸递质、神经肽Y及β内啡肽释放的变化;采用定量逆转录聚合酶链反应检测下丘脑GnRH、生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone, GHRH)、生长抑素(somatostatin, SS)、腺垂体卵泡刺激素(follicular stimulating hormone, FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、生长激素(growth hormone, GH)、长骨干骺端胰岛素样生长因子Ⅰ(insulinlike growth factorⅠ, IGFⅠ)基因及蛋白的表达水平。结果:滋阴泻火中药可明显抑制下丘脑促性腺区兴奋性氨基酸递质的释放,促进抑制性氨基酸递质、神经肽Y和β内啡肽的释放,使下丘脑GnRH神经元的功能活动降低,下调GnRH、FSH及LH基因的表达水平,上调下丘脑SS基因的表达,并下调垂体GH及长骨干骺端IGFⅠ基因的表达,从而明显抑制下丘脑垂体的促性腺机能及促生长机能。益肾填精中药则可明显抑制下丘脑促性腺区神经肽Y的释放,使下丘脑GnRH神经元的功能活跃,上调GnRH、FSH及LH基因的表达,下调下丘脑SS基因的表达,上调垂体GH及长骨干骺端IGFⅠ基因的表达,从而明显促进下丘脑垂体的促性腺机能及促生长机能。结论:滋阴泻火中药和益肾填精中药可通过调整机体的神经内分泌调节机制,调整下丘脑GnRH、SS,腺垂体FSH、LH、GH及长骨干骺端IGFⅠ基因的转录,有效调节下丘脑垂体的促性腺机能及促生长机能。这可能是滋阴泻火中药和益肾填精中药可有效调整性早熟患儿青春发育进程及改善骨骼发育的主要作用机制。

[关键词] 中药; 青春期,早熟; 神经递质; 神经肽Y; β内啡肽; 下丘脑垂体性腺轴; 生长抑素生长激素胰岛素样生长因子Ⅰ轴

Effects of Chinese herbal medicine on modulating the course of puberty development in children with precocious puberty

ABSTRACT Objective: To explore the therapeutic effects of Ziyin Xiehuo Recipe (ZYXHR) for nourishing yin and lowering fire and Yishen Tianjing Recipe (YSTJR) for nourishing kidney and replenishing essence on regulating the gonadotrophic and somatotrophic functions of hypothalamicpituitary axis, and to reveal the mechanisms of ZYXHR and YSTJR in modulating the course of pubertal development of children with precocious puberty. Methods: The pubertal rats were fed with ZYXHR or YSTJR for 30 days, and the parameters of rats were monitored as the followings: The content of gonadotropinreleasing hormone(GnRH), the frequency and amplitude of GnRH impulse releasing, the releasing amounts of aminoacid neurotransmitters, and neuropeptide Y (NPY) and βendorphin (βEND) in the gonadotrophic area of the hypothalamus were detected with neurobiological methods (pushpull perfusion, homogenate, incubation of brain slices, and immunohistochemical staining). The levels of gene and protein expressions of GnRH, growth hormone releasing hormone (GHRH) and somatostatin (SS) in hypothalamus, and follicular stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH) and growth hormone (GH) in adenohypophysis as well as insulinlike growth factorⅠ (IGFⅠ) in metaphysis were determined with real time reverse transcriptionpolymerase chain reaction (RTPCR). Results: The ZYXHR could reduce the activity of GnRH neurons in hypothalamus through inhibiting the release of central exciting aminoacid neurotransmitters, whereas promoting the release of central inhibiting aminoacid neurotransmitters, NPY and βEND in gonadotrophic area of hypothalamus. The expression levels of GnRH, FSH and LH mRNAs were downregulated while the expression level of SS mRNA in hypothalamus was upregulated in the ZYXHRtreated group. The GH mRNA in hypophysis and the IGFⅠ mRNA in metaphysis were both downregulated by ZYXHR. The YSTJR could promote the activity of GnRH neurons in hypothalamus through inhibiting the release of NPY in gonadotrophic area of hypothalamus, upregulating the expression levels of GnRH, FSH, LH and GH mRNAs in hypophysis, and IGFⅠ mRNA in metaphysis, while downregulating the expression level of SS mRNA in hypothalamus. Conclusion: The ZYXHR and YSTJR could both regulate the gonadotrophic and somatotrophic functions of hypothalamicpituitary axis through modulating the neuroendocrine regulation and the gene expressions of GnRH and SS in hypothalamus, GH, FSH and LH in hypophysis, and IGFⅠ in metaphysis. These may be the chief mechanisms of ZYXHR and YSTJR in modulating the course of pubertal development and ameliorating the skeletal development in children with precocious puberty.

KEY WORDS Chinese materia medica; puberty, precocious; neurotransmitters; neuropeptide Y; βendorphin; hypothalamicpituitarygonadal axis; somatostatingrowth hormoneIGFⅠ axis

复旦大学医学院儿科医院近十余年来对儿童特发性性早熟的发病规律、诊断及治疗进行了系统的研究,制定了一套调整其青春发育进程的中药治疗方案,包括在起病时诱导其缓解,缓解后巩固并维持疗效,待至正常青春期年龄时,则促使其更好地青春发育。临床研究已证实该中药治疗方案能有效地调整患儿的青春发育进程并改善其骨骼发育[1]。本研究系在临床已取得疗效的基础上,进一步从神经内分泌调节及基因表达的角度研究该中药治疗方案的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 同窝SD雌性大鼠240只,1.5月龄(相当于青春期),体质量160~180 g,饲养于自然光照环境中。

1.2 动物分组及药物处理 240只大鼠随机分为3组:(1)滋阴泻火中药组80只,喂饲滋阴泻火中药;(2)益肾填精中药组80只,喂饲益肾填精中药;(3)正常对照组80只,喂饲等量生理盐水。滋阴泻火中药(Zhiyin Xiehuo Recipe, ZYXHR)由生地黄15 g、炙龟板12 g、黄柏9 g、知母9 g、牡丹皮9 g等组成;益肾填精中药(Yishen Tianjing Recipe, YSTJR)由熟地黄15 g、龟板胶9 g、仙灵脾9 g、鹿角胶9 g、肉苁蓉9 g、菟丝子9 g等组成。由复旦大学医学院儿科医院中药制剂室煎制成浓缩合剂,约含生药3 g/ml。每组大鼠均予以灌胃给药,1次/d,5 ml/d,治疗30 d为1个疗程。

1.3 检测指标

1.3.1 下丘脑促性腺区神经递质及神经肽的含量 兴奋性氨基酸递质谷氨酸(glutamic acid, Glu)、天门冬氨酸(aspartic acid, Asp)及抑制性氨基酸递质γ氨基丁酸(γaminobutyric acid, GABA)采用推挽灌流及高效液相色谱法检测;β内啡肽(βendorphin, βEND)采用推挽灌流及放射免疫法检测;神经肽Y(neuropeptide Y, NPY)采用免疫组化法检测。

1.3.2 下丘脑促性腺区促性腺激素释放激素(gonadotropinreleasing hormone, GnRH)的释放方式及含量 (1)GnRH周期性分泌中心――下丘脑内侧视前区(medial preoptic area, MPOA):采用推挽灌流及放射免疫法测定GnRH脉冲释放的频率与幅度;组织匀浆、放射免疫法及免疫组化法测定GnRH的含量。(2)GnRH紧张性分泌中心――内侧基底下丘脑弓状核(arcuate nucleus, ARC)及正中隆起(median eminence, ME):采用脑片孵育、放射免疫法及免疫组化法测定GnRH的含量。

1.3.3 下丘脑GnRH mRNA、腺垂体卵泡刺激素(follicular stimulating hormone, FSH)mRNA、黄体生成素(leuteinizing hormone, LH)mRNA的表达水平 采用定量逆转录多聚酶链反应(reverse transcriptionpolymerase chain reaction, RTPCR)方法进行检测[2]。

1.3.4 下丘脑生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone, GHRH)mRNA、生长抑素(somatostatin, SS)mRNA的表达水平 采用漂浮法原位杂交技术进行检测。

1.3.5 腺垂体生长激素(growth hormone, GH)mRNA、肝脏胰岛素样生长因子Ⅰ(insulinlike growth factorⅠ, IGFⅠ)mRNA及长骨干骺端IGFⅠ mRNA的表达水平 采用实时荧光定量RTPCR方法进行检测。

1.3.6 下丘脑SS蛋白及腺垂体GH蛋白的表达水平 采用免疫组化法进行检测。

1.4 神经生物学实验方法

1.4.1 推挽灌流 用0.35% 戊巴比妥按10 ml/kg予以大鼠腹腔注射麻醉后,采用脑立体定位仪固定大鼠头部,将推挽套管插至视前区(含视前内侧核)。在大鼠处于清醒状态时予以灌流,用恒流泵推动人工脑脊液,以50 μl/min的速度注入视前区, 稳定30 min后开始收集灌流液,每10 min收集1管,连续收集2 h。灌流结束后,在灌流套管内注入20 μl绘图墨水后取出全脑,10% 多聚甲醛固定1周后,切片观察套管位置,定位准确者其灌流液可用于样品检测。收集的样品置于-70 ℃保存,备GnRH、NPY及氨基酸类递质的测定。

1.4.2 组织匀浆 大鼠断头,迅速取出全脑,置于冰浴上,分离视前区。组织用冰酸性丙酮溶液抽提,2次超声匀浆,4 ℃离心5 000 r/min,10 min,合并上清液,真空抽干后置-20 ℃保存,稀释后备GnRH的测定。

1.4.3 脑片孵育 大鼠断头,迅速取出全脑,置于冰浴上,分离内侧基底下丘脑(含弓状核及腹内侧核),垂直切成2片,迅速移入0.5 ml人工脑脊液(预先置于37 ℃水浴中,并通以95% O2和5% CO2)中孵育。平衡30 min后,更换新的人工脑脊液0.5 ml,再孵育30 min后,收集孵育液。收集的样品置于-70 ℃保存,备氨基酸类递质的测定。

1.4.4 免疫组化 大鼠在乙醚吸入麻醉下,开胸暴露心脏,从其左心尖向左心室插入11号注射针头。先以温生理盐水200 ml快速冲净组织内血液,继以冰冻的4%多聚甲醛磷酸缓冲液(pH 7.4)250~300 ml予以灌注,取出大鼠全脑,先后移入20%蔗糖多聚甲醛液及30%蔗糖磷酸缓冲液中,待下沉后进行冰冻切片,切成30 μm厚的冠状脑片,采用抗生物素蛋白生物素过氧化物酶复合物(avidinbiotinperoxidase complex, ABC)法进行常规免疫组化染色后,用Leica图像分析处理系统测定阳性物质的积分光密度值。

1.4.5 高效液相色谱荧光法 采用高效液相色谱荧光法检测灌流液样品中的兴奋性氨基酸递质(Glu, Asp)及抑制性氨基酸递质(GABA)的含量,用Beckman公司的System gold软件进行梯度控制及色谱数据处理,以外标法计算样品浓度。

1.4.6 GnRH、βEND及NPY的放射免疫法测定 上述收集的孵育液及灌流液样品中的GnRH、βEND及NPY含量均按常规放射免疫法测定。

1.5 统计学方法 所有实验数据均采用SPSS 11.0软件予以统计学处理,计量资料均数用x±s表示,组间比较采用t检验及单因素方差分析。

2 结果

2.1 滋阴泻火中药对下丘脑促性腺区神经递质及βEND释放的影响 滋阴泻火中药组下丘脑内侧视前区Asp及Glu的释放量较正常对照组明显减少,而GABA及βEND的释放量则明显增加,差异有统计学意义。提示滋阴泻火中药可使下丘脑内侧视前区兴奋性氨基酸递质的释放明显减少,抑制性氨基酸递质及β内啡肽的释放明显增加。见表1。

2.2 滋阴泻火中药及益肾填精中药对下丘脑促性腺区NPY释放及含量的影响 滋阴泻火中药组下丘脑NPY含量较正常对照组明显增加,差异有统计学意义,提示滋阴泻火中药可促进下丘脑NPY蛋白的表达;而益肾填精中药组ARC及ME处NPY的含量较正常对照组则有明显减少,差异有统计学意义,提示益肾填精中药可以抑制内侧基底下丘脑NPY蛋白的表达。见表2。

2.3 滋阴泻火中药对下丘脑促性腺区GnRH释放及含量的影响

2.3.1 滋阴泻火中药对下丘脑视前区GnRH脉冲释放方式的影响 检测一系列按时间顺序收集的灌流液样品,可以反映下丘脑视前内侧核GnRH脉冲释放的频率与幅度。滋阴泻火中药组GnRH脉冲释放的幅度比正常对照组明显降低,其脉冲释放频率也明显减低,差异有统计学意义,提示滋阴泻火中药可以明显抑制下丘脑视前内侧核GnRH的脉冲分泌。见表3。

表1 滋阴泻火中药对下丘脑视前区氨基酸递质及βEND释放的影响(略)

Table 1 Effects of ZYXHR on releasing contents of aminoacid transmitters and βEND in preoptic area of hypothalamus

*P<0.05, **P<0.01, vs normal control group.

表2 滋阴泻火与益肾填精中药对下丘脑NPY含量的影响(略)

Table 2 Effects of ZYXHR and YSTJR on NPY contents in hypothalamus

*P<0.05, vs normal control group.

表3 滋阴泻火中药对下丘脑视前区GnRH脉冲释放方式的影响(略)

Table 3 Effects of ZYXHR on impulse releasing of GnRH in preoptic area of hypothalamus

*P<0.05, **P<0.01, vs normal control group.

2.3.2 滋阴泻火中药及益肾填精中药对下丘脑视前区组织匀浆GnRH含量的影响 益肾填精中药组下丘脑视前区GnRH的含量较正常对照组明显增高,差异有统计学意义,提示益肾填精中药可以明显增加下丘脑视前区GnRH的含量。见表4。

表4 滋阴泻火与益肾填精中药对下丘脑视前区组织匀浆GnRH含量的影响(略)

Table 4 Effects of ZYXHR and YSTJR on GnRH contents in homogenate of preoptic area of hypothalamus

*P<0.05, vs normal control group.

2.3.3 滋阴泻火中药对内侧基底下丘脑GnRH释放的影响 孵育液中GnRH的含量,尤其是用KCl激活释放后孵育液中GnRH的含量代表下丘脑ARC及腹内侧核GnRH的储备状况,可以反映该部位GnRH合成的水平。滋阴泻火中药组GnRH的激活释放量较正常对照组明显减少,差异有统计学意义,提示滋阴泻火中药可抑制下丘脑GnRH的合成。见表5。

表5 滋阴泻火中药对内侧基底下丘脑GnRH释放的影响(略)

Table 5 Effects of ZYXHR on GnRH releasing in medial basal hypothalamus

*P<0.05, vs normal control group.

2.3.4 滋阴泻火中药及益肾填精中药对下丘脑GnRH含量的影响 滋阴泻火中药组下丘脑GnRH含量较正常对照组明显减少,差异有统计学意义,提示滋阴泻火中药可以抑制下丘脑GnRH的蛋白表达;益肾填精中药组下丘脑GnRH的含量较正常对照组则有明显增加,提示益肾填精中药可以促进下丘脑GnRH的蛋白表达。见表6、图1。

2.4 滋阴泻火中药及益肾填精中药对下丘脑GnRH,腺垂体FSH、LH基因表达的影响 滋阴泻火中药组GnRH、FSH及LH cDNA扩增产物含量均较正常对照组明显降低,差异有统计学意义,提示滋阴泻火中药可以下调下丘脑GnRH及腺垂体FSH、LH mRNA的表达水平;益肾填精中药组GnRH、FSH及LH cDNA扩增产物含量均较正常对照组明显增高,差异有统计学意义,提示益肾填精中药可以上调下丘脑GnRH及腺垂体FSH、LH mRNA的表达水平。见表7。

表6 滋阴泻火与益肾填精中药对下丘脑GnRH含量的影响(略)

Table 6 Effects of ZYXHR and YSTJR on GnRH contents in hypothalamus

**P<0.01, vs normal control group.

图1 滋阴泻火与益肾填精中药对下丘脑GnRH含量的影响(略)

Figure 1 Effects of ZYXHR and YSTJR on GnRH contents in hypothalamus

A: Positive expression of GnRH in MPOA in normal control group (×100); B: Positive expression of GnRH in ARC in normal control group (×200); C: Positive expression of GnRH in ME in normal control group (×200); D: Positive expression of GnRH in MPOA in ZYXHRtreated group (×100); E: Positive expression of GnRH in ARC in ZYXHRtreated group (×200); F: Positive expression of GnRH in ME in ZYXHRtreated group (×200); G: Positive expression of GnRH in MPOA in YSTJRtreated group (×100); H: Positive expression of GnRH in ARC in YSTJRtreated group (×200); I: Positive expression of GnRH in ME in YSTJRtreated group (×200).

表7 滋阴泻火及益肾填精中药对下丘脑GnRH和垂体FSH、LH基因表达的影响(略)

Table 7 Effects of ZYXHR and YSTJR on expressions of GnRH gene in hypothalamus, and FSH and LH genes in hypophysis

**P<0.01, vs normal control group.

2.5 滋阴泻火中药及益肾填精中药对下丘脑SS基因及蛋白表达的影响 滋阴泻火中药组下丘脑室周核SS mRNA及蛋白的阳性神经元数、单位面积阳性神经元数及阳性细胞面积光密度明显高于正常对照组,差异有统计学意义;益肾填精中药组与之相反,其阳性神经元数、单位面积阳性神经元数及阳性细胞面积光密度均明显低于正常对照组,差异有统计学意义。提示滋阴泻火中药可以上调下丘脑室周核SS基因及蛋白的表达水平,而益肾填精中药则可下调其表达水平。见表8、9和图2、3。

2.6 滋阴泻火中药及益肾填精中药对下丘脑ARC GHRH基因表达的影响 滋阴泻火中药组及益肾填精中药组ARC GHRH mRNA阳性神经元数及阳性细胞光密度与正常对照组比较均无统计学差异,提示滋阴泻火中药及益肾填精中药对大鼠下丘脑ARC GHRH mRNA的表达无明显影响。见表10、图4。

2.7 滋阴泻火中药及益肾填精中药对腺垂体GH及肝脏、长骨干骺端IGFⅠ基因表达的影响 滋阴泻火中药组腺垂体GH、肝脏及长骨干骺端IGFⅠ cDNA复制数明显低于正常对照组;益肾填精中药组肝脏及长骨干骺端IGFⅠ cDNA复制数则明显高于正常对照组,差异均有统计学意义。提示滋阴泻火中药可以明显下调腺垂体GH、肝脏及长骨干骺端软骨细胞IGFⅠ基因的表达水平;而益肾填精中药则明显上调腺垂体GH、肝脏及长骨干骺端软骨细胞IGFⅠ基因的表达水平。见表11。

2.8 滋阴泻火中药及益肾填精中药对腺垂体GH蛋白表达的影响 滋阴泻火中药组腺垂体GH单个细胞面积、每个视野阳性细胞数及阳性细胞面积均低于正常对照组,差异有统计学意义;益肾填精中药组每个视野阳性细胞数及阳性细胞面积均明显高于正常对照组,差异有统计学意义,但单个细胞面积与正常对照组比较则无统计学差异。提示滋阴泻火中药可以抑制腺垂体生长激素细胞合成GH;而益肾填精中药则促进其合成GH。见表12、图5。

表8 滋阴泻火与益肾填精中药对下丘脑室周核SS mRNA表达水平的影响(略)

Table 8 Effects of ZYXHR and YSTJR on expression level of SS mRNA in periventricular nucleus of hypothalamus

*P<0.05, vs normal control group.

表9 滋阴泻火与益肾填精中药对下丘脑室周核SS蛋白表达水平的影响(略)

Table 9 Effects of ZYXHR and YSTJR on expression level of SS protein in periventricular nucleus of hypothalamus

*P<0.05, vs normal control group.

图2 下丘脑室周核SS mRNA阳性神经元(略)

Figure 2 Positive neurons of SS mRNA in periventricular nucleus of hypothalamus in three groups

A: Normal control group; B: ZYXHRtreated group; C: YSTJRtreated group.

图3 下丘脑室周核SS阳性神经元(略)

Figure 3 Positive neurons of SS protein in periventricular nucleus of hypothalamus in three groups

A: Normal control group; B: ZYXHRtreated group; C: YSTJRtreated group.

表10 滋阴泻火与益肾填精中药对下丘脑ARC GHRH mRNA表达水平的影响(略)

Table 10 Effects of ZYXHR and YSTJR on expression level of GHRH mRNA in ARC of hypothalamus

图4 下丘脑ARC GHRH mRNA阳性神经元(略)

Figure 4 Positive neurons of GHRH mRNA in ARC of hypothalamus in three groups

A: Normal control group: B; ZYXHRtreated group; C: YSTJRtreated group.

表11 滋阴泻火与益肾填精中药对腺垂体GH cDNA及肝脏、长骨干骺端IGFⅠ cDNA复制数的影响(略)

Table 11 Effects of ZYXHR and YSTJR on gene copy number of GH cDNA in hypophysis and IGFⅠ cDNA in liver and metaphysis

*P<0.05, vs normal control group.

表12 滋阴泻火与益肾填精中药对腺垂体GH细胞的影响(略)

Table 12 Effects of ZYXHR and YSTJR on GH cells in adenohypophysis

*P<0.05, vs normal control group.

图5 腺垂体GH阳性细胞(略)

Figure 5 GHpositive cells in adenohypophysis in three groups

A: Normal control group; B: ZYXHRtreated group; C: YSTJRtreated group.

3 讨论

内侧基底下丘脑(包括ARC和腹内侧核)是GnRH的紧张性分泌中心,维持GnRH分泌的基础水平;下丘脑内侧视前区(视前内侧核)是GnRH的周期性分泌中心,其功能活动与GnRH的周期性脉冲式分泌有关,是诱发排卵前LH峰的重要部位[3,4]。青春发育的显著标志不仅是下丘脑GnRH基础分泌的增加,更重要的是GnRH脉冲分泌的频率和幅度增加[5]。女性在青春期的后期,当血中雌二醇浓度升至一个临界水平并持续一定时间后,会引起下丘脑GnRH的脉冲分泌突然剧增,导致腺垂体LH分泌剧增达到峰值,从而诱发卵巢排卵[6]。

多种中枢神经递质及神经肽参与下丘脑GnRH合成与分泌的调节。兴奋性氨基酸递质(Glu和Asp)可促进GnRH的释放,引起垂体LH分泌的增加,并参与雌性大鼠排卵前LH峰的形成[7];抑制性氨基酸递质(GABA)则可抑制GnRH的释放,GnRH神经元受到GABA的紧张性抑制,在青春期开始前及垂体LH分泌峰值出现前,均可出现GABA水平的下降[8]。βEND亦可明显抑制GnRH的释放。

本实验结果表明,滋阴泻火中药可明显抑制中枢兴奋性氨基酸递质的释放,促进抑制性氨基酸递质、NPY及βEND的释放,对下丘脑GnRH周期性及紧张性分泌中心均可产生显著的抑制作用,使下丘脑GnRH神经元的功能活动明显降低、GnRH的基因表达水平明显下调、GnRH的合成及分泌明显减少,从而抑制下丘脑垂体的促性腺机能。益肾填精中药则可明显抑制NPY的释放,对下丘脑GnRH周期性及紧张性分泌中心均可产生明显的促进作用,使下丘脑GnRH神经元功能活跃,上调GnRH基因的表达水平,促进GnRH的合成及分泌,从而明显增强下丘脑垂体的促性腺机能。

青春期的长骨线性生长加速是由于下丘脑垂体生长轴及下丘脑垂体性腺轴功能活跃并协同调控的结果。垂体GH合成及分泌的显著增加,通过血液循环分别作用于肝细胞及长骨干骺端软骨细胞、成骨细胞上的GH受体,合成及释放大量IGFⅠ。IGFⅠ作为细胞分裂原,可刺激长骨干骺端软骨细胞分裂增殖,同时IGFⅠ又具有自分泌及旁分泌作用,可促使局部IGFⅠ进一步增加。GH可直接作用也可经IGFⅠ介导,促进软骨细胞、成骨细胞的分裂增殖,使胶原及硫酸黏多糖增多,并促进骨基质内矿物质的沉积,加速骨的形成,从而加速长骨的线性生长。

GH的合成和释放受下丘脑GHRH及SS的调控。GHRH神经元位于下丘脑ARC及腹内侧核,其神经纤维伸入ME,分泌的GHRH通过垂体门脉系统,作用于垂体GH细胞,促进GH的合成和分泌。SS神经元在下丘脑内分布广泛,对骨骼生长起调节作用的主要是位于下丘脑室周核的SS神经元,其轴突伸入ARC,抑制GHRH神经元,从而抑制垂体GH的合成。此外,SS纤维亦伸入ME,分泌的SS经垂体门脉系统作用于垂体GH细胞,抑制GH的释放[9,10]。

滋阴泻火中药可显著上调下丘脑室周核SS基因及蛋白的表达水平,显著下调腺垂体GH基因及蛋白的表达水平,使肝脏及长骨干骺端软骨细胞IGFⅠ基因的表达亦相应下调,从而明显抑制下丘脑垂体生长轴的功能;益肾填精中药则可显著下调下丘脑室周核SS基因及蛋白的表达水平,显著上调腺垂体GH基因及蛋白的表达水平,使肝脏及长骨干骺端软骨细胞IGFⅠ基因的表达亦相应上调,从而明显促进下丘脑垂体生长轴的功能。

本实验结果表明,滋阴泻火中药及益肾填精中药可通过调整机体的神经内分泌调节机制,调整下丘脑GnRH、SS,腺垂体FSH、LH、GH及长骨干骺端IGFⅠ基因的转录,有效调节下丘脑垂体的促性腺机能及促生长机能。这可能是滋阴泻火中药及益肾填精中药可有效调整性早熟患儿青春发育进程及改善骨骼发育的主要作用机制。

[参考文献]

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3 沈 皓, 蔡德培, 陈伯英. 补肾中药对下丘脑垂体促性腺机能的影响. 中西医结合学报, 2004, 2(1): 5357.

4 Wetsel WC, Valenca MM, Mercanthaler I, et al. Intrinsic pulsatile secretory activity of immortalized luteinizing hormonereleasing hormonesecreting neurons. Proc Nact Acad Sci U S A, 1992, 89(9): 41494153.

5Wu FC, Butler GE, Kelnar CJ, et al. Ontogeny of pulsatile gonadotropin releasing hormone secretion from midchildhood, through puberty, to adulthood in the human male: a study using deconvolution analysis and an ultrasensitive immunofluorometric assay. J Clin Endocrinol Metab, 1996, 81(5): 17981805.

6Bourguignon JP, Franchimont P. Pubertyrelated increase in episodic LHRH release from rat hypothalamus in vitro. Endocrinology, 1984, 114(5): 19411943.

7 Spergel DJ, Krsmanoric LZ, Stojilkovic SS, et al. Glutamate modulates [Ca2+]i and gonadotropinreleasing hormone secretion in immortalized hypothalamic GT17 neurons. Neuroendocrinology, 1994, 59(4): 309317.

8Jarry H, Hirsch B, Leonhardt S, et al. Amino acid neurotransmitter release in the preoptic area of rats during the positive feedback actions of estradiol on LH release. Neuroendocrinology, 1992, 56(2): 133140.

集精系统范文第4篇

关键词:轴承清洗;清洗液;电热系统;铁路货车

DOI:10.16640/ki.37-1222/t.2016.14.007

在铁路货车再制造过程中,利用轴承清洗流水线对轴承进行拆解和重新装配。在流水线的脱脂和精洗两个工位,需要分别接入加热的清洗液对零部件进行高压冲洗,溶解并带走油脂。清洗液是一种加注了清洁剂的混合液体,在清洗轴承过程中是循环利用的。某工厂使用的货车轴承清洗流水线原来配套的清洗液为蒸汽加热方式。蒸汽加热的优点是热源接入迅速、液体温升快;缺点是需要配备热水锅炉,液体温度可控性差、能源利用率低,大量蒸汽气泡随液流进入水泵造成冲击与气蚀降低了水泵使用寿命,水汽翻腾带走大量液体也会加速清洗液的损耗。为了解决蒸汽加热的弊端,决定改为电加热,并对清洗液循环系统做优化改造。

1 设计思路

在脱脂工序,用加热的清洗液对加热的轴承进行灌洗,冲流出轴承内部的脂及杂质,杂质经沉淀流入集污器,固态油脂经浮游进入集油器。而在精洗工序,用加热的清洗液对分解的零件进行浸洗和高压冲洗,进一步溶解脂、清洗零件表面。两处工作的清洗液最终流回到液水箱循环再使用。

采用电加热方式首先要解决清洗液中的溶脂及污垢、污泥等杂质沉积粘附在加热管表面造成局部过热导致电热丝烧损或管子破裂。所以,需要对清洗液循环方式进行改造。基本思路是:针对脱脂和精洗分别设置了两套独立的清洗液循环、加热系统,增强清洗液循环系统的过滤能力。清洗液在液箱内加热后经水泵加压进入管道,输送给冲洗装置,冲洗后依次回流到一级沉淀池和二级过滤池,分离杂质、清除浮油,再回到液箱中。

2 主要结构

2.1 水泵

采用自吸式污水泵。为了保证使用性能,根据供水压力和流量要求,脱脂和精洗工位分别选用不同功率有水泵。

2.2 加热箱

箱体分为箱体和盖板,采用不锈钢制造,箱壁为夹层结构,内、外层之间填充聚氨酯硬泡,以达到保温目的。箱体设置有回流口、输液口、溢流口、排液口及注液口。排液口设置在底部,便于排放污液、污泥及杂质。溢流口和注液口布置在正常液面以上。回流口布置在液面之上并接近液面,利用回流清洗液在液体表面散射形成紊流,产生泡沫,使油脂与水分离后飘浮在液面。 输液口布置在距离箱体底部约400mm高度位置,与回流口斜对角分布。液体内部使用三个隔板围成 “之”字形结构,这样可以使得自流回来的清洗液到达输液口有较长的流动距离和足够时间分离气泡,沉淀杂质,吸收热能,也使得液体的交替使用合理有序。

2.3 电热管

电热管由不锈钢管外壳、电阻丝和绝缘填充体、堵头等组成,均匀分布安装在箱体内两侧壁上,发热部分完全没入液体。它采用L形结构,使靠近侧壁及底部的液体都能受热。功率由加热的液体额定时间内交换能量来确定。根据能量守衡关系,电热管功率

由于清洗液中溶解了油脂,按照水包油乳化液的比热容计算。

2.4 过滤沉淀池

设置两级过滤沉淀池,目的是为了进一步沉降和过滤清洗液在回程中带入的杂质和油脂,避免造成油脂状胶合物粘附在电热管外表面造成散热不均,影响使用寿命。沉淀池中设置有隔板和滤网,能使浮油和油脂从水中分离出来飘溢出过滤池,同时沉降油泥和杂质。

2.5 输液管道

清洗液在管道内流动可以分为两部分。一是从水泵出口输送到冲洗装置,管道内液体压力大约为0.5MPa~0.7MPa;清洗液自冲洗装置流经收集器后再回到液水箱,水管内液体为自重回流常态,管道内液体的流速小于从水泵出来时的流速。因此,回水管的管径必须比输水管的管径大,一般取D回水=(2~2.5)D输水。回流管道尽可能少设弯路,并且距离尽可能短,以利于液流顺畅,回流及时。为了增强保温效果,输液管道外表面包裹聚氨酯硬泡。

3 电气控制系统

电气系统主要是对液体加热、保温和水泵的控制。电能转换为液体热能是一个缓慢过程,在温度升高过程中需要吸收大量热量。而液体温度保持过程所需吸收热量较少。合理配置和控制电热管工作功率既可以保证热水能量正常交换,也能降低能耗。

3.1 清洗液温度控制

电热管总功率为60kW,清洗液工作温度控制在(70±10)℃范围。加热升温过程中,全部电热管工作,液体从常温状态升高至70℃大约需要2h~2.5h。一般情况下,管道中的清洗液经冲洗循环回到电热箱后,温度下降4℃左右。温度上、下限控制分别设定为60℃和80℃,

(下转第17页)

(上接第7页)

利用温度感应器自动控制。功率控制设有自动控制和手动Ⅰ档、Ⅱ档控制。工作前加热手动控制接入60kW电热管,保温过程自动控制接入30kW功率的电热管。

3.2 液位控制

分别设置最低、最高液位控制。当液面到达最低液位,低位传感器发出信号自动控制水泵电机停机,切断电热管工作电源,红色信号灯亮,提示加注清洗液;而液面达到最高位置时,黄色信号灯亮,提示停止加注清洗液。

3.3 水泵控制

水泵设有过热、过流保护。正常情况下,水泵控制由人工操作。脱脂冲洗和精洗的供水水泵分别独立控制。为了减少清洗液在循环流动过程中热能损失,轴承分解停工作时间超过10min时,黄灯亮起,提醒是否关停水泵。

4 应用效果

清洗液循环系统应用表明,过滤浮油和沉淀杂质的能力大大增强,清洗液使用周期比过去可延长一半以上时间。液水箱保温效果好,常温状态下,热水箱内清洗液经过一个晚上只下降了15℃左右。温度得到控制,清洗液温度保持在60℃~80℃范围内。

5 结束语

流水线清洗液循环系统采用电加热,利用了清洁能源,提高了能源利用率,液体温度稳定可靠,保温性能好,过滤能力强,清洗液循环使用周期长,具有良好的推广应用价值。

参考文献:

[1]朱晓松,王连吉,李兴林等.一种成品轴承高效清洗方式[J].轴承,2016(01):18-20.

[2]董改花,蒋辉.基于PLC与MCGS的轴承清洗控制系统设计[J].工业控制计算机,2014(09):132-133,135.

[3]蒋萍萍.电热管制造工艺自动化控制与检测技术[J].制造业自动化,2012(18):41-43.

集精系统范文第5篇

【关键词】 男性;不育;密度;活力;活率;

常规分析是临床上诊断男性不育及评价男性不育的主要诊疗手段。对密度、活力、活率等常规参数综合分析,可以为不育症的诊断及疗效评价提供依据。本文将130例男性不育患者常规结果进行整理分析,现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2008年1月至2009年8月在医院就诊的130例男性不育患者,排除其器质性疾病和女方不育因素。受检者年龄为24~51岁,平均年龄为29.0岁。

1.2 方法

1.2.1 标本收集

禁欲3~7 d,在实验室附近用取精法,收集完整于清洁、干燥的小瓶内,置37 ℃培养箱中液化后进行常规分析。

1.2.2 检查

(1)一般性状:先肉眼观察样本的颜色、粘稠度及是否液化。如标本已液化,用广泛精密pH试纸测其pH。(2)分析仪分析:采用、微生物动、静态图像检测分析仪-CASAS-QS-III(清华同方)检测密度、活力、活率等指标。(3)其他参数:按《WHO人类及-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》[1]标准及《质量检测系统使用手册》进行检验。(4)质量分析正常参考值:①量2~5 mL;②密度≥20×106/mL;③活力:具有向前运动的(a级+b级)大于50 %或a级大于25 %;④pH7.2~8.0;⑤活率大于或等于75 %;(⑥液化时间:排精后在30 min内液化;⑦正常形态超过70 %或畸形率小于15 %。同时符合上述7项指标为正常,反之为异常。

1.2.3 统计学方法

数据以均数±标准差(x±s)表示,用SPSS11.5软件处理系统对数据进行χ2检验。

2 结果

2.1 130例男性不育患者常规分析

按照上述检验方法及参考指标对130例男性不育患者的进行常规分析及分类统计,见表1。表1 130例男性不育患者检查分析结果(略)

2.2 异常分类统计

按质量分析正常参考值对130例不育患者的检查结果进行分类统计(其中1人可出现2项或2项以上的异常结果),见表2。表2 130例不育患者异常分类统计(略)

3 讨论

男性不育症在临床上较常见,其集中表现为数量减少和质量的下降[1]。据报道,近半个世纪以来,在世界范围内,男性的数量已经下降4~5成[2],在我国男性质量亦呈下降趋势。数量减少主要表现为量过少和(或)密度降低,也有学者提出应为有效数降低[3]。本资料中,130例样本检查发现量少于2 mL者18例,占13.85 %;密度

综上所述,按照质量分析标准分类,本地区男性不育患者异常最主要为活率降低,其余依次为活力降低、少症、畸形症、量过少、液化不良、无症、粘稠度高。男性不育症病较为复杂,一个患者往往多种病因可同时存在,治疗时除做常规检验分析外,还应考虑存在的其他原因。在临床实践中,对不孕不育的就诊者应建议夫妻双方一起就诊,做综合分析及综合治疗。

参考文献

[1] 世界卫生组织.WHO人类及-宫颈粘液相互作用实验检验手册[M].4版.北京:人民卫生出版社,2001:51.

[2] 胡红.有效数在男性不育症中的研究[J].现代检验医学杂志,2003,18(2):42.

[3] Stefankiewicz J,Kurzawa R,Drozdzik M.Environmental factors dist-Urbing fertility of men[J].Ginekol Pol,2006,77(2):163.

集精系统范文第6篇

一、建立犯罪隐语语料库的必要性

借鉴国外经验的需要。将犯罪隐语编成专门的词典或整合为语料库,对情报收集及内容破译具有重要意义。在这一方面,英国、德国等国已有尝试并取得了良好效果。例如2009年英国建立了《犯罪隐语档案》,提供给警察参阅,在多起涉毒案件的侦查侦破中都发挥了重要作用,为打击涉毒活动提供了重要的信息与情报支撑。而我国目前尚未在这一领域进行系统化的应用研究,因此很有必要借鉴国外的经验做法开展符合我国国情的研究。

1.革新现有方式的需要。目前,我国对犯罪隐语的整理主要是书面化整理,即:收集犯罪隐语语料,然后分别解释每条隐语的含义等。这种书面化的材料有其不足:一是检索查询不够方便;二是如果某个词条释义有误,无法及时进行修改更正;三是许多犯罪隐语的含义是在不断变化的(违法犯罪分子常常更换暗语),如果发生了这些变化往往需要重新修订,实效性不强。建立犯罪隐语语料库能够很好地解决这些问题,它能够很方便地进行检索,并且能够根据工作的需要随时保持词条的更新,具有较强的时效性和可操作性。

2.整合现有资源的需要。目前国内许多公安机关、检查机关及海关等部门都收集有犯罪隐语,但这些隐语往往都是内部资料,不轻易给其他部门分享,而且还比较零散,这限制了犯罪隐语应用价值的发挥。而建立犯罪隐语语料库的目标就是整合目前国内收集到的此类隐语,构建一个没有地域屏障的犯罪隐语“仓库”并实现共享,最大限度地发挥该语料库在服务禁毒工作中的潜能。

3.适应研究理念的需要。语料库理论主张利用海量数据对纷繁复杂的现象做全局性研究,进而发掘其内在规律和运作机制。用这种方法来整理犯罪隐语,不仅有助于分析犯罪隐语的语义指代关系,而且还可以基于大量语言事实与统计数据推演犯罪隐语的构词规律和形成规则,进而为破译它们提供理论依据和方法支撑。这在公安技术逐渐信息化的今天,无疑具有现实意义。

二、建立犯罪隐语语料库的基本原则

1.精标注原则。精标注,就是对每一条隐语的指代内容、出现地区、使用群体差异甚至形成理据进行详细的标注。例如同一条犯罪隐语,其内容可能包含两个以上的义项,有的义项可能存在地区间的差异以及使用群体上的差异,这些都需要精细标明。以“猪肉”“一个”为例,“猪肉”一般指冰毒,但个别地区既可以指冰毒,还可以指海洛因;“一个”是表示计量的隐语,在贩毒者口中指1000克,在吸毒者口中往往指1克。这些具有地区性和群体性差异的隐语,如果不遵循精标注的原则,很可能会漏掉一些义项,导致语义上的误解。

2.动态监控原则。动态监控原则是就犯罪隐语语料库库容而言的,指语料库必须是开放式的,能够将新出现的隐语或者原有隐语新出现的一些信息(如义项)及时地纳入到语料库中。如果缺乏动态监控,构建起来的语料库就成了无源之水,从而变成“死库”。因此,动态监控原则要求构建的犯罪隐语语料库不仅仅关注新隐语的出现,而且还要关注语料库中隐语含义、使用范围、使用者的变化情况,做好语料数据的更新与管理,使其始终保持时效性。

3.应用共享原则。构建犯罪隐语语料库的最终目的是为某些涉毒案件的侦查提供隐语检索帮助。因此,构建这样一个语料库应遵循应用共享的原则,使语料库不仅仅局限于某个人、某个单位内部使用,而是将其推向整个公安业务系统,实现信息共享。在具体的操作方式上,可以探索将构建好的“犯罪隐语语料库”置于公安网,也可以研发单机版检索系统在电脑上使用。

三、关于建立犯罪隐语语料库的工作建议

1.注重收集整理,积累原始材料。犯罪隐语具有很强的地域性,不同地方的违法犯罪分子使用的隐语不尽相同。各地禁毒部门应当注重收集当地的犯罪隐语,给每条隐语标明出现的地区、指代的内容等信息,做成基础数据表,为犯罪隐语语料库的建立累积原始材料。

2.加强地方合作,实现信息共享。地方禁毒部门要在犯罪隐语资料方面加强合作交流,将整理的犯罪隐语根据“去伪存真、去粗存精”的原则进行必要筛选,实现各地成果共享,使不同地区间的犯罪隐语汇集成一个大“仓库”,为犯罪隐语语料库的建立奠定语料基础。

3.加大相关投入,促进成果转化。犯罪隐语语料库建设是公安技术信息化的重要体现,公安部门应加大对这一领域的投入,在科研立项、技术帮扶、经费保障等方面予以必要的支持。同时鼓励相关人员就犯罪隐语整理研究、语料库开发等方面加强同科研院所、机构的协作,促进技术成果的转化,使之更有效地为禁毒工作服务。

(基金项目:本文系中国刑警学院科学研究一般项目[2014];辽宁省教育厅人文社科研究一般项目[W2015395]。)

参考文献:

[1]欧阳国亮.中国当代犯罪隐语研究[M].群众出版社,2015.

[2]欧阳国亮.近年来涉毒隐语的新特点及识别思路[J].中国刑警学院学报,2015,(1).

集精系统范文第7篇

肾虚有阴阳之分

先天不足、后天失养、过度疲劳、精神紧张、情绪抑郁、睡眠不足、不节等原因均可引起肾的精、气、阴、阳的虚衰不足,即引起肾虚,肾虚可分为肾阴虚和肾阳虚两种不同的证型,可以从它们所表现出来的不同症状上加以区分。

肾阴又称“元阴”、“真阴”,是指肾精等维持人体各种机能运动的物质基础,对各脏腑组织起着濡润、滋养的作用。其中所说的肾精是指肾脏所藏之精,从广义来讲可以分先天之精和后天之精;从狭义上来讲就单指先天之精。先天之精禀受于父母,与身俱来,在出生之前就已形成,具有生育繁衍后代的作用,所以也叫“生殖之精”;后天之精是机体从饮食中摄取的营养成分和脏腑代谢所化生的水谷精微,藏之于肾,并滋养先天之精,促进机体的生长发育,所以也叫“水谷之精”或“脏腑之精”。先天之精与后天之精,二者相互为用密不可分。肾阴虚大多是由于劳力过度、过频等原因导致的肾精消耗过多而引起的,还有一部分人天生体质虚弱,肾精等物质基础本来就比较低下,这类人也往往容易出现肾阴虚。中医认为,阴虚生内热,所以肾阴虚的突出特点表现为腰膝酸软乏力,两手心、两脚心以及心口常有烦热感觉即五心烦热,睡觉时容易出现盗汗(入睡后汗出异常,醒来汗出即止)现象,平时常感觉咽干口燥。此外肾阴虚还有四肢乏力、眩晕耳鸣、颧红潮热、脱发、牙齿松动、记忆力减退、形体消瘦、失眠多梦、减退、男子遗精、妇女经少经闭等症状。

肾阳又叫“元阳”、“真阳”,指肾脏的阳气,是人体一身阳气的根本,是维持生命活动的动力源泉,对各脏腑组织起着温煦、生化的作用。其中,肾气是由肾精化生而来的能量,是肾脏的功能物质,按阴阳属性来分,肾气属阳,所以有时亦称肾气为肾阳。所以,如果肾阳虚则会表现为肾脏功能上的匮乏,整个身体阳气的温煦作用就会下降,出现腰膝冷痛、全身怕冷、神疲倦怠、手脚冰凉、尿频。此外,肾阳虚还有腰膝酸软、头晕目眩、耳鸣耳聋、阳痿、遗精、精冷不育或宫寒不孕、夜间多尿、大便溏泄等。

补肾要分清阴阳

肾阴虚和肾阳虚存在着如此大的差别,所以补肾必须分清阴阳,对症下药。如果不分清阴阳就盲目乱补,不仅迭不到治疗效果,而且会越补越虚,甚至会引发严重疾病。比如,肾阴虚的情况下内火本来就容易旺,如果这时再使用温热的壮阳药物,那就等于是火上浇油,患者热性就更大了;相反,如果患者肾阳虚,腰痛怕冷,此时却服用一些滋阴药物,那可谓是雪上加霜,患者同样也吃不消,阳虚症状反而加重。所以,补肾前要先辨明自己的肾虚症状是属于肾阳虚,还是肾阴虚,然后再选择适合自己症状的补肾药。肾阴虚人群宜选用六味地黄丸、左归丸等专补肾阴的代表药物,肾阳虚人群则宜服用温补肾阳的经典药物,如金匮肾气丸、右归丸等。

集精系统范文第8篇

新常态下的中国经济在中国政府强有力的推动下稳步转型,中国机床工业和机床市场也在经历转型,德马吉森精机很荣幸能够以自己不断的创新来积极参与其中,我们从未停止创新的脚步。2014年,具有新纪元意义的CELOS问世,让创意变成成品的流程更加简单快速,19款全新机型、全新的DMG MORI设计,几乎以全球同步的速度推向中国市场。德马吉森精机集团坚持“为了市场,深入市场”,预计到2016年全球年产能将达到20000台。

2014年,德马吉森精机在中国市场的整合已经形成了更为广泛的服务网络,未来我们可以为客户提供更多本地化优势服务。目前德马吉森精机中国在全国有超过160名技术服务人员,包括70名拥有专业技术和行业洞察力的应用工程师和20名培训师,有超过30个技术服务中心,新的服务热线也已于2014年4月1日开通,24/7服务热线在线提供专家建议。我们致力于实现“全球网络,快速现场”,希望通过对本地化服务力量的不断强化,为中国市场提供最多元化的机床解决方案,以最广泛的服务网络来提供快速服务响应及高备件可用性;提供资深专业化的应用技术、培训课程和交钥匙服务。

2014年德马吉森精机上海工厂完成生产设施扩建,产能可达80台/月,大约22000平米的天津新厂内200名高素质的工人每月可生产高达100台高精密的卧式加工中心,这些本地化的生产在为中国用户研发专属定制产品的同时,最大限度地保证原产国的品质。我们通过不断投资高科技生产厂、高质量部件和高素质员工,持续强化中国业务。未来我们还会寻求更高层次的本地化,通过产业分工与本地优秀的企业进行合作,将他们的创新能力整合到我们的全球价值链中,饯行“中国制造,为中国而造”的承诺。

2015年,在全球瞩目的CIMT期间,我们将在近2000平方米的超大展位上向中国市场最大程度地展现我们最新的产品、技术和理念,预计会展示30台机床产品,其中包括4台世界首秀、3台亚洲首秀和12台中国首秀机型。展出机型包括适用于高生产力大批量生产的超紧凑型卧式加工中心i50,以及聚焦于增材制造的LASERTEC65 3D,通过激光熔覆和铣削的独特结合,可实现最佳表面和零件精度。

德马吉森精机集团集技术驱动与服务于一体。我们要整合所有的技术资源,为我们的客户提供从售前的技术咨询到售后的机床尊享终身服务。开放参观日活动也是德马吉森精机中国重要的市场服务内容之一,我们不仅通过面对面的交流,了解客户的真实需求,展示先进的制造水平,更重要的是把先进的理念传递给市场,帮助客户实现自我提升。2015年,德马吉森精机中国将先后于广东、西安、天津、上海各地技术中心举办开放参观日活动。与此同时,我们也将继续组织客户参观团参加德国弗朗顿(Pfronten)开放参观日、IGA工厂参观日和位于意大利的欧洲机床展(EMO)。

2015年,市场仍将充满变化,也仍将充满机遇。德马吉森精机集团将会重点聚焦充满市场前景的工业领域:汽车工业,我们是保时捷团队的独家高级合作伙伴,专注于为未来汽车研发零部件和使用革新材料;航天航空业,我们预期未来20年每年乘客数量增加4.7%,我们的航天航空技术中心拥有12年丰富经验,参考所有应用领域提供完整的解决方案,通过多任务复合工艺机床可以达到300%的生产效率;医疗行业,我们相信未来5年内医疗市场将每年增长8%,德马吉森精机为人体植入物、手术器材、用于核磁共振/计算机断层摄影的零部件提供高效的生产方案;模具制造业,我们为模具制造业提供更高的精度和更好的表面质量。