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甲状腺肿瘤在内分泌系统中是较为常见的一种肿瘤,绝大多数是女性,在临床上的症状主要表现为颈前部肿块,发病率极高,如果得不到及时有效的治疗,会对患者的身体健康以及生活质量造成严重影响[ 1 ]。对甲状腺肿瘤患者给予及时、准确的诊断具有非常重要的意义,随着临床诊断和治疗技术的不断发展,彩超被广泛应用于临床诊断中,提高了临床诊断符合率。现在对我院在2010年03月到2012年12月收治的160例甲状腺肿瘤患者使用彩超诊断的临床资料进行回顾性分析,探讨彩超对甲状腺肿瘤的临床诊断价值,报道如下。
1资料和方法
1.1一般资料 对我院在2011年03月到2012年12月收治的160例甲状腺肿瘤患者使用彩超诊断的临床资料进行回顾性分析,其中男性患者占20例,女性患者占140例,患者的年龄在18岁到70岁之间。通过病理检查证实,恶性患者占28例,良性患者占132例;甲状腺瘤患者占102例,结节性甲状腺肿患者占54例,甲状腺癌患者占8例。所有患者均经过临床检查确诊[2],临床症状表现为颈部肿块,通过回顾性分析160例甲状腺肿瘤患者使用彩超诊断的临床资料,探讨彩超对甲状腺肿瘤的临床诊断价值。
1.2方法
1.2.1 所有甲状腺肿瘤患者均给予彩超诊断检查,指导患者取仰卧位,把双肩垫高,让患者的头部尽量后仰,尽量把颈前部充分暴露出来,涂抹耦合剂,使用彩色多普勒超声仪器进行诊断,使用探头(频率在7.5~10.0MHz之间)对患者的颈部进行横向、纵向以及斜向等多切面扫查,观察甲状腺瘤的形状、大小、包膜、边界、钙化以及浸润等情况,是否出现蟹足样浸润、回声情况以及颈部淋巴结转移的情况;使用彩色超普勒超声血流显像技术测定其峰值流速以及阻力的指数。把诊断的结果和手术手病理检查结果进行对比观察,探讨彩超对甲状腺肿瘤的临床诊断价值。
1.2.2 对甲状腺肿瘤经过彩超诊断的结果与手术病理检查的结果进行对比观察,对比观察甲状腺肿瘤患者通过彩超检查的血流指标以及峰值流速、阻力指数情况,并做好记录。若周边部出现血流信号,内部没有信号,则表明患者为良性肿瘤,若内部的血流信号较丰富,周边部的血流信号较少,并且是高速动脉血流信号,则表明患者为恶性肿瘤。
1.2.3 选用SPSS18.0软件对观察的数据进行统计学处理,使用t对计量数据进行检验,P
2 结果
102例甲状腺瘤患者中误诊的患者占10例,符合率为90.2%;54例结节性甲状腺患者中误诊的患者占8例,符合率为85.2%;4例甲状腺癌患者中没有出现误诊例数,符合率为100%;甲状腺癌患者在峰值流速以及阻力的指数上均优于甲状腺瘤和结节型甲状腺患者,存在的显著差异性具有统计学意义(P
3讨论
甲状腺作为人体最大的具备分泌功能的器官,能够使内分泌产物放于细胞外,其分泌物能够对人体生长发育起到非常重要的作用。甲状腺肿瘤在临床上是较为常见的一种肿瘤,主要的发病人群为女性,如果得不到及时有效的治疗,会对患者的身体健康以及生活质量造成严重影响。甲状腺恶性肿瘤疾病并发症发生率较低,临床表现症状不明显,若甲状腺肿瘤的面积较大,则会造成气管压迫,导致呼吸困难,因此对甲状腺肿瘤疾病进行早期诊断十分重要。彩超显像技术能够对病变部位血流情况进行准确显示,为诊断良、恶性提供了准确的指导,降低了临床误诊率。
随着临床诊断技术的不断发展,彩超以其操作简便、可重复性高以及无创等优点被广泛应用于临床诊断中,能够对甲状腺组织的细小变化进行显示,结合观察甲状腺患者的外在表现和体检,提高了临床诊断符合率。在彩超声像图检查的显示中,甲状腺内出现形态规则的椭圆形或者圆形的肿块,边界较清晰、包膜完整,分布均匀,回声密集、细小。超声诊断显示腺体的两侧叶出现不对称增大,表面上能够发现小结节,粗糙的边界不够清晰,结节的内部出现不规则光点,在不同程度上出现钙化、囊性变。彩超应用于甲状腺肿瘤疾病的诊断中,其优点主要是能够对甲状腺血流的速度和状态变化进行检查,能够对甲状腺患者的二维血流状况进行直接观察,在对甲状腺内血流方向进行显示的同时,对患者血流的速度和性质变化进行辨别,能够更好地判断血管性病变;能够对动脉、静脉进行辨别,能够对分流、返流进行更可靠的分辨;能够更好地分析血流束起源、长度、宽度以及面积。
甲状腺细胞间质的成分减少,周边、内部血流信号较丰富,加快了血流的速度,加上内部的血流分布较为紊乱,血管的内径不规则,增加了阻力的指数。甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿都属于良性肿瘤,其周期和内部的血流较为稀疏,相对降低了峰值的流速。彩超应用于甲状腺肿瘤的临床诊断中,不仅仅能够提高诊断的准确率,还能够对甲状腺肿瘤的血流情况进行观察,为临床治疗提供更为可靠的理论依据,具有安全、准确性[3],被广泛应用于临床诊断中。上述结果显示:102例甲状腺瘤患者中误诊的患者占10例,符合率为90.2%;54例结节性甲状腺患者中误诊的患者占8例,符合率为85.2%;4例甲状腺癌患者中没有出现误诊例数,符合率为100%;甲状腺癌患者在峰值流速以及阻力的指数上均优于甲状腺瘤和结节型甲状腺患者(P
参考文献
[1] 黄兆仙.甲状腺肿瘤彩色多普勒超声图与病理对照研究[J].实用医技杂志,2013,20(3):248-249.
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[4] .彩超对甲状腺肿瘤的诊断价值[J].中国现代医生,2008,46(1):110.
关键词:超声表现;彩色多普勒超声;甲状腺肿瘤
甲状腺癌是头颈部的常见恶性肿瘤,女性较为多见。在所有影像学检查中,超声检查对于甲状腺病变的诊断检测较为敏感,而且操作简便、价廉、无创,也是甲状腺疾病最常用的影像学检查方法,目前已经广泛用于甲状腺疾病的术前诊断和随访,具有较好的临床价值。加上彩色多普勒血流显像的叠加应用,为良、恶性甲状腺肿瘤的诊断提供了更加可靠的理论依据,提高了早期诊断的水平。
1资料与方法
1.1一般资料
2008年12月-2011年12月来我院的56例甲状腺肿瘤病人中,良性肿瘤患者26例,恶性肿瘤患者30例,所有患者全部经手术及病理的证实,男性患者12人,女性患者44人。年龄21-77岁,平均年龄44岁。
1.2方法
使用百胜MyLab50型彩色多普勒超声诊断仪,线阵探头频率为7.5-12MHz。嘱患者仰卧位,头稍后仰,以充分暴露颈部,涂以耦合剂,先用二维超声(2D)对甲状腺及其周边做横切、纵切、斜切等多方位扫描,进行甲状腺的常规检查,测量其二侧叶和峡部的大小,观察并记录甲状腺占位病灶部位的大小、数目、形态、边界模糊度、周边有无声晕、内部回声的强弱及均匀性、有无蟹足样浸润和钙化灶、以及肿瘤后方回声等等,然后引入彩色多普勒血流显像(CDFID),观察和记录甲状腺病灶的周边和内部彩色血流情况的分布及丰富度,测定收缩期的最大血流速度和舒张期的最小血流速度以及阻力指数(RI)。
2结果
3结论
肿块内部回声的强弱,取决于各肿块内的各组织成分所占的比例,因为恶性肿瘤组织类型多样,有纤维组织、癌组织、玻璃样变组织等,形成了多个声阻抗反射界面,所以二维超声图像上多表现为回声强弱不均;此外一些恶性肿瘤组织有侧方回声失落或后方声衰的表现,是因为肿瘤组织内部以及周边有许多增生的纤维结缔组织和超声无法探测到的极小的钙化。
微钙化可以是甲状腺良恶性肿瘤相对特异性的指标之一。钙化是由于肿瘤细胞生长迅速,供血不足,肿块中血管及纤维组织过度增生,从而使得钙盐沉积形成。当甲状腺内占位病灶中有沙砾样钙化灶时,需要特别警惕甲状腺癌的可能,结合临床资料或通过超声引导下穿刺活检以确诊。
由实验可知,多普勒超声可以观察肿块内的血流信号,便捷地反映肿瘤微血管的生成情况,作为一种无创性显示肿瘤内血液供应的技术,可以用于手术前良恶性肿瘤的鉴别诊断,有利于提高对甲状腺癌诊断的准确率,还为指导手术治疗提供一定的诊断依据。
早期发现甲状腺癌十分重要,如果能早期发现和诊断并积极治疗,则预后将会改善,病患存活时间也将有相应的延长。随着科研的进步,二维超声和多普勒超声的联合应用在甲状腺癌的早期发现和鉴别诊断中的地位不断提升,已成为甲状腺首选的辅检查方法,具有诊断符合率高、快速、无创、无辐射、廉价、简便、可重复的优点,对甲状腺肿块定位准确。高频超声对甲状腺肿瘤的检出率相当高,可以清晰地显示甲状腺实质内2mm的小肿块,甚至可以观察小肿块内的细微结构应用高分辨力的二维超声和多普勒超声联合检查,若观察到大小形态不规则、边界不清晰,内部回声不均、周边没有声晕、后方有声衰或侧壁有回声失落、内有沙砾样钙化灶或伴有颈部淋巴结肿大,以及彩超显示肿块内血流信号异常丰富等表现,则提示该肿块是恶性肿瘤的可能性大。对于多发性的甲状腺结节,还要考虑良恶性肿块并存的可能。
参考文献
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[2]汤钊猷.现代肿瘤学[M].第2版.上海:复旦大学出版社,2000.1083-1091.
【关键词】结节性甲状腺肿瘤;甲状腺腺瘤;临床病理
【中图分类号】R736.1【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2014)01-0030-02 甲状腺疾病在临床中比较多见,对患者采用活检能够提升监测准确率,因此对于该疾病的治疗具有较重要的作用[1]。因为甲状腺疾病的发生原因比较复杂,而且还有良性和恶性的分别,所以诊断对于治疗来说是非常重要的过程[2]。此次根据256例甲状腺患者的临床病例资料来进行探讨分析,现进行如下报道。
1 资料与方法
1.1 一般资料 我院2009年至2012年共有256例甲状腺患者接受治疗,其中男性患者55人,女性患者201人,年龄最小15岁,最大72岁。
1.2 方法 所有甲状腺疾病患者在手术前进行细针穿刺诊断或进行术中冷冻诊断。将手术切除的病理标本放入10%福尔马林溶液中固定,继而进行石蜡包埋切片,将病理标本进行HE染色。对冷冻病理标本给予OCT包埋,使用恒温冷冻切片机进行切片,并给予快速HE染色。分析甲状腺疾病患者的临床病理资料及HE染色结果。
2 结 果
甲状腺疾病患者的一般情况中,256例甲状腺疾病患者的一般临床资料显示,女性患者显著高于男性患者,男女比例约为1:4。本组甲状腺疾病患者的疾病高发年龄为31-50岁,共126例,占49.22%。256例甲状腺疾病患者的疾病类型中,174例(67.97%)为结节性甲状腺肿瘤,82例(32.03%)为甲状腺腺瘤,其中甲状腺滤泡性腺瘤26例(10.16%),嗜酸细胞腺瘤12例(4.69%)。比较256例甲状腺疾病患者术前、术后病理诊断结果的差异结果显示,术前诊断准确率为90.63%。
3 讨 论
甲状腺疾病并非罕见疾病,临床病理活检能够对该疾病起到精确诊断的作用,该疾病的发病原因比较复杂,而且病变类型多,在此次研究中,我们发现甲状腺患者的群体特征有以下几点:男性患者少,女性患者多,男性患者仅为女性患者的四分之一;高发年龄段集中于31至50岁,一共有49.22%的患者是这个年龄段。还有就是此次研究的患者中诊断准确率为90.63%。
结节性甲状腺肿与甲状腺腺瘤是临床最常见的甲状腺疾病。临床病理诊断中发现少数单结节性甲状腺肿瘤,尤其是单结节性甲状腺肿瘤易被误诊为甲状腺腺瘤。单结节性甲状腺肿瘤具有厚薄不均的包膜,甲状腺滤泡在结节内受到挤压结节性甲状腺肿瘤具有明显的滤泡增生复旧现象,同时存在淋巴细胞浸润,包膜内外的组织结构基本一致;单结节性甲状腺肿瘤发生钙化、坏死、出血改变的发生率高于甲状腺腺瘤;而腺瘤中发生囊性变的几率显著高于单结节结节性甲状腺肿瘤[3]。
临床研究中,单结节性甲状腺肿瘤的包膜外滤泡组织会有增复旧的情况,因此临床诊断的时候,选择的样本要准确,并且和患者的过往病史一同来进行确诊,这一就能够将结节性甲状腺肿瘤和甲状腺肿瘤进行区分。使用细针来穿刺,方便快捷,临床使用率比较高,可是诊断的准确率却不高,特别是滤泡性腺瘤,具有较大误差。
此次研究中将冷冻诊断和细针穿刺诊断进行了对比分析,而且我们得知甲状腺滤泡性腺瘤的诊断存较大的困难度。全部256例患者有24例患者诊断不明确,这些患者中的一半属于甲状腺滤泡性腺瘤。因为该种腺瘤经过检验发现,其细胞形态特异性比较隐蔽,临床中用细针穿刺来采取样本,并非随时都能够进行的,因此具有较大的局限性,患者的病变组织结构也不能够窥见全貌,而且进行样本采集的时候,组织会因为挤压,导致细胞出现形变,这一就给诊断带来了很大的阻碍,临床诊断准确率直接受到影响,特别是恶性肿瘤的诊断更是如此,其诊断准确率比较低。因此相比细针穿刺诊断,冷冻诊断的效果更加理想,能够获得较高的诊断准确率。
总之,临床中细针穿刺的诊断准确率没有冷冻诊断高,所以比较推介在临床中广泛使用冷冻诊断,以提升甲状腺肿瘤的诊断几率,早日为患者进行治疗,不延误最佳治疗时机,让患者获得较好的治疗效果和康复效果。
参考文献
[1]王庆明.甲状腺疾病392例病理分析[J].病理与临床,2009,47(29):92-94.
【关键词】 甲状腺肿瘤; 病理诊断; 免疫组化
【Abstract】 Objective:To analyze the pathological distribution characteristics of thyroid tumor and to evaluate the utility of different immunohistochemical qualitative diagnosis for benign and malignant tumors.Method:190 patients with thyroid nodules in the hospital from February 2011 to April 2014 were selected as the research objects.All patients were diagnosed by ultrasound scan and aspiration biopsy.Postoperative specimens were used for microscopy pathology examination and immunohistochemical.Pathological diagnosis was conducted by pathologists and ultrasound doctors.Result:Benign tumors accounted for 24.74%,swollen thyroid nodule accounted for 57.45%,thyroid adenoma accounted for 42.55%.Malignant tumor accounted for 75.26%,including papillary carcinoma 83.92%,follicular carcinoma 11.89%,medullary carcinoma 0.70%,undifferentiated carcinoma 3.50%.Among the papillary carcinoma,classical type accounted for 55.00%,follicular type accounted for 16.67%,latent accounted for 27.50%,acidophil accounted for 0.83%.The positive expression rate of CK19 in papillary carcinoma was higher than that in other tumors,the difference was statistically significant(P
【Key words】 Thyroid tumor; Pathological diagnosis; Immunohistochemical
First-author’s address:The Second Hospital of Chaoyang City,Chaoyang 122000,China
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2016.07.031
甲状腺结节是内分泌系统的常见病,无论良恶性病变均可表现为甲状腺结节,调查显示50岁以上人群甲状腺结节发生率高达50%[1]。约5%的甲状腺结节是恶性肿瘤,其余多为良性肿瘤或过度增生。我国甲状腺恶性肿瘤年发病率约为3.1/10万,居头颈部恶性肿瘤之首,近年来因社会环境危险因素增多,甲状腺癌发病率呈逐年上升趋势,年平均增长率高达4%[2]。约90%甲状腺癌为分化型甲状腺癌,其生长缓慢、淋巴转移率较高、多分布于颈前部两侧软组织内不易诊断发现,但其恶性程度低、预后较好,10年生存率可达50%以上[3]。甲状腺良性结节可以向恶性转变,近年来随着体检的普及,甲状腺肿瘤特别是甲状腺癌病理类型趋于复杂,诊断难度上升,超声引导下细针穿刺活检(FNAB)可明显提高术前诊断准确性,但因良恶性细胞分布不均衡,定性诊断符合率仍较低,甲状腺结节病理诊断仍主要依赖于手术,而在未获得明确诊断的条件下,患者对手术可能存在抵触情绪,限制了甲状腺肿瘤的病理诊断[4]。为此,本研究试分析甲状腺肿瘤病理特征,并与免疫组化检查结果进行对比,总结病理诊断经验,现具体报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择医院2011年2月-2014年4月收治的甲状腺结节患者190例(190个结节标本)作为研究对象。纳入标准:(1)临床资料完整,具有完整的彩超、相关生化指标、术中以及术后病理诊断结果;(2)单发;(3)符合手术治疗标准;(4)无颈部手术历史;(5)诊断为甲状腺肿瘤。所选患者中男80例,女110例,年龄33~69岁,,平均(46.1±3.5)岁。就诊原因:甲状腺肿块139例,体检51例。
1.2 方法 体检主要通过手触及,若触及新的结节或甲状腺明显增大,则进行超声检查。超声检测仪器选用SEQUOIA-512彩色多普勒超声诊断系统。对于符合手术治疗标准者,给予甲状腺患侧腺叶全切和/或峡部切除、预防性淋巴结清扫,获取甲状腺切除标本,用10%的福尔马林溶液固定手术切除的病理标本,然后进行石蜡包埋切片,对病理标本进行HE染色处理,给予冷冻病理标本OCT包埋,使用恒温冷冻切片将其切片,并快速进行HE染色处理,然后进行病理分析。首先,进行大体观察,记录结节位置、大小、数量、质地及切面情况,而后病理科医师与超声医师共同进行病理诊断,对比病灶超声特征、HE染色切片特征。以低倍镜观察病灶边界、结构、形态,高倍镜观察组织、细胞,重点观察砂粒体分布、有无纤维假包膜、有无囊性病变。制片的过程,标本的预处理取材固定脱水透明浸蜡包埋切片烤片脱蜡脱油过水蒸馏水防脱片制备抗原修复内源性过氧化物酶的灭活PBS缓冲液冲洗抗室温(25±8)℃孵育PBS缓冲液冲洗非生物素型酶聚合物检测PBS缓冲液冲洗DAB显色复染脱水透明封固,最后进行免疫组织化学检测与结果判定。
1.3 统计学处理 采用Windows Excel收集录入数据资料,以SPSS 18.0软件对所得数据进行统计学处理,计数资料以率(%)表示,比较采用 字2检验,以P
2 结果
2.1 病理诊断情况 良性肿瘤47例(图1),占24.74%,其中甲状腺结节肿瘤27例,占57.45%,甲状腺腺瘤20例,占42.55%。恶性肿瘤143例,占75.26%,其中癌120例,占83.92%,滤泡癌17例,占11.89%,髓样癌1例,占0.70%,未分化癌5例,占3.50%;癌中经典型占55.00%,滤泡型占16.67%,隐匿型占27.50%,嗜酸细胞性占0.83%(图2)。
2.2 甲状腺肿瘤免疫组化
2.2.1 CK19表达情况 癌CK19表达阳性率高于其他肿瘤,比较差异有统计学意义(P
2.2.2 其他几种常用的肿瘤基因表达 恶性肿瘤hTERT、Ki67、VEG、Ret、P53表达阳性率均高于良性肿瘤,比较差异均有统计学意义(P
3 讨论
甲状腺肿瘤是人体最常见的肿瘤类型之一,随着年龄的增加,其发病率逐年上升,有尸检表明,约半数人伴有甲状腺结节,其中绝大多数为甲状腺肿瘤,在临床体检工作中,约4%~8%的成年人有甲状腺结节。近年来,甲状腺癌发病率显著上升,已成为增长最快的恶性肿瘤之一,不同病理类型甲状腺瘤治疗方式、预后存在显著差异,如何准确的判断甲状腺病理类型成为学术界关注热点。甲状腺早期筛查主要通过超声以及FNAB,但都无法明确病理类型,最终病理诊断还依赖于镜检及免疫组化[5]。
本研究表明,手术患者恶性肿瘤达到75.26%。关于良性肿瘤手术治疗的适应证,目前尚无明确的标准,对于高危患者主张手术治疗,若早期筛查恶性肿瘤特征不明显,也可进行随访。甲状腺肿瘤病理类型较多,良性肿瘤包括甲状腺结节肿瘤及甲状腺腺瘤,恶性肿瘤主要为癌、滤泡癌、髓样癌及未分化癌,本研究中癌占83.92%,略低于早期研究,近年来滤泡癌、髓样癌、未分化癌比重有上升趋势[6]。癌按照病理特征又可分为经典型、滤泡型、隐匿型、嗜酸细胞性,其中经典型约占半数以上,分化较好,解剖结构清晰,术前诊断符合率较高,而对于其他类型癌,因影像学检查特征多不规则,恶变风险高,也多主张手术切除,对于术中发现的微小结节快速冰冻病理检查也多可满足需要[7-8]。免疫组化对标本组织进行染色行定量及半定量分析为目前评价肿瘤血管生成的常用方法,是辅助定性诊断的重要方法,hTERT、Ki67、VEG、Ret、P53表达检测均具有较高的特异度,本次研究均达到100%,但恶性肿瘤表达阳性率仅为75%~92%。CK19表达对癌敏感度较高,有助于病理分型,但对于其他类型的预后较差的恶性肿瘤敏感度不足。可以联合CK19及其他类型表达检测提高辅助诊断效用[8]。近年来,许多学者致力于活检穿刺病理检测技术,Lee等[9]对4585例甲状腺结节细针穿刺,进行BRAF V600E突变的高灵敏度检测,结果证实BRAF V600E突变有助于提高甲状腺结节定性诊断符合率。Rossi等[10]的一项前瞻性研究也证实BRAF V600E突变检测可提高诊断效用。活检穿刺诊断以其创伤小、简单快捷的优点在临床上应用广泛[11-12]。但其诊断假阴性准确率很高,对滤泡性腺瘤的诊断较困难,部分甲状腺滤泡性腺瘤患者的组织样本细胞形态不明显,需依靠明确的血管与包膜润浸来确诊[13-15]。临床病理实践中,组织样本取材单纯应用细针穿刺具有一定的局限性,无法全面观察病变组织结构和周围组织形态,因此,联合超声定位技术,尽可能采集高质量的样本,联合免疫组化、镜检可提高术前诊断效用,指导手术操作。
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摘要:蛋白质组学是在后基因组时代出现的一个新的研究领域,肿瘤蛋白质组学是其重要分支。本文从甲状腺肿瘤特异性分子标志物以及甲状腺癌治疗的分子靶点等几个方面,详细介绍了近几年来甲状腺肿瘤蛋白质组学的研究现状。
关键词:甲状腺癌;肿瘤蛋白质组学;二维凝胶电泳;质谱
Progress in research of thyroid oncoproteomics
Shi Bingyin, Li hao
(Department of Endocrinology, the First Affiliated Hospital, Medical School of Xian Jiaotong University, Xian 710061, China)
ABSTRACT: Proteomics is a new research area of the postgenomic era. Oncoproteomics is an important branch of it. Here we discuss the investigative outcome of thyroid oncoproteomics in recent years, such as specific tumor biomarkers and antineoplastic drug.
KEY WORDS: thyroid cancer; oncoproteomics; twodimensional electrophoresis; mass spectrometry
甲状腺癌是内分泌肿瘤中最常见的一种,目前已从基因水平对其进行了广泛研究,但基因的功能最终需要通过相应的蛋白质发挥作用,而在DNAmRNA蛋白质的转录及翻译过程中存在转录后剪切、翻译后修饰加工等多种方式,所以基因与蛋白质的表达之间存在着一定差异,有必要从蛋白质整体水平揭示肿瘤的发生发展,阐述其癌变本质。肿瘤蛋白质组学借助蛋白质组学研究技术,如二维凝胶电泳(twodimensional electrophoresis, 2DE),电喷雾电离质谱(electrospray ionization mass spectrometry, ESIMS)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrixassisted laser desorption ionization timeofflight mass spectrometer, MALDITOFMS)等,可动态、整体、定量的考察甲状腺癌发生发展过程中蛋白质种类、数量的改变,比较肿瘤细胞与正常细胞蛋白质的表达差异,帮助研究者寻找用于肿瘤诊断及指导治疗的特异性分子标志物[1]。现将近几年来甲状腺肿瘤蛋白质组学的研究进展介绍如下。
1 诊断甲状腺肿瘤的特异性分子标志物
1.1 Galectin3 Galectin3(Gal3)是β半乳糖苷酶结合蛋白家族成员,分子质量为31ku,主要存在于细胞质中,亦可位于胞膜及胞核。已有研究证明[2],Gal3可作为甲状腺恶性肿瘤特别是甲状腺状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)的一个表型特征,考虑Gal3的表达和PTC细胞保持高度增殖活性有关,但其具体作用机制仍不明确。Paron等[3]利用2DE和MALDIMS方法研究大鼠甲状腺细胞系FRTL5和Kiras癌基因转化细胞系Kimol的细胞核蛋白质表达差异,发现Gal3过度表达于Kimol中,而在FRTL5中不表达。研究表明Gal3通过和甲状腺转录因子(thyroid transcription factor1, TTF1)的同源结构域相互作用使TTF1的转录活性上调,其N末端还可和细胞内的单链DNA及RNA结合。TTF1是NKx型蛋白的一种,这些蛋白具有高度保守的同源结构域序列,故NKx同源盒基因家族其他成员也可和Gal3相互作用。TTF1是甲状腺特有的甲状腺球蛋白和甲状腺过氧化物酶基因转录的调控因子,它的表达水平和甲状腺细胞增殖水平成正比。Gal3通过和TTF1的相互作用调控甲状腺细胞的生长分化过程,在肿瘤的转化和转移方面起重要作用。
1.2 DDIT3、ARG2、ITM1和C1orf 24 Cerutti等[4]在研究甲状腺滤泡癌和滤泡性腺瘤的蛋白质表达差异过程中,发现4种蛋白质的表达有统计学意义。它们分别为DNA损伤诱导转录因子3(DNA damageinducible transcript 3, DDIT3)、2型精氨酸酶(arginase type Ⅱ, ARG2)、膜整合蛋白1(integral membrane protein 1, ITM1)和1号染色体开放读码框架24又名niban蛋白(chromosome 1 open reading frame 24, C1orf 24)。进一步利用免疫组化方法研究发现,85.2%(23/27)的甲状腺滤泡癌DDIT3和ARG2的表达均为阳性,而甲状腺滤泡型腺瘤DDIT3和ARG2双阳性率仅为9.4%(3/32),联合检测DDIT3和ARG2诊断甲状腺滤泡癌,准确率可达83%。DDIT3在细胞应激及DNA损伤修复时表达,细胞内RAS和PAX8PPARG通路亦可激活其表达,推测DDIT3和肿瘤细胞的恶性增殖及浸润性有关[5]。ARG2是精氨酸酶同工酶的一种,位于线粒体内,可将精氨酸水解为鸟氨酸及尿素,而鸟氨酸可以脱羧生成腐胺,然后转变为多胺。多胺是重要的生物学调控物质,在细胞分化、细胞周期的调节中起关键作用。精氨酸酶活性增加可导致细胞内鸟氨酸水平升高,进而促使癌症发生。ITM1是一个高度保守的蛋白,推测它是一种新型通透酶。C1orf24分布于骨骼肌、胰腺及前列腺内,在甲状腺癌中的作用尚不明确。
1.3 组织蛋白酶B Srisomsap1等[6]利用2DE对多种甲状腺疾病组织的蛋白质表达情况进行了研究,共分离出32个特异性蛋白质点,分子质量在15-30ku之间,等电点在4.5-6.5左右。这些蛋白质功能各有不同,包括参与构成细胞骨架的相关蛋白(肌动蛋白、原肌球蛋白、肌球蛋白)和蛋白构象改变有关的蛋白质――热休克蛋白27,与转录及翻译有关的蛋白(核苷二磷酸激酶、延长因子1β)以及超氧化物岐化酶、组织蛋白酶B(cathepsin B, CB)等。CB是细胞溶酶体中的一种半胱氨酸蛋白酶,可降解层连蛋白、纤连蛋白、IV 型胶原等细胞外基质成分。研究表明, CB在乳腺癌、甲状腺癌、肺癌、卵巢癌等多种恶性肿瘤中表达上调,且活性明显升高[7]。肿瘤细胞CB的表达上调及活性增强有助于降解基底膜主要成分――层粘蛋白和IV 型胶原,同时CB通过激活其他蛋白酶如胶原酶、尿激酶等产生协同作用使肿瘤易于侵袭及扩散。利用ESIMS分析CB,结果显示有4个特异性的斑点:CB1、CB2、CB3、CB4,其中CB2、CB3在甲状腺滤泡型腺瘤、PTC和甲状腺滤泡癌中的表达明显上调,而在结节性甲状腺肿和Graves病中表达减低。提示可以通过检测CB水平鉴别那些在显微镜下难以区分的甲状腺滤泡型腺瘤和结节性甲状腺肿。
1.4 MnSOD Russo等[8]研究发现甲状腺状癌细胞系TPC1和甲状腺未分化癌细胞系ARO的细胞核蛋白质2DE电泳图谱大致相似,其中有一个蛋白质点较为特殊,在TPC1中的表达显著升高,而在ARO中检测不出。利用MALDIMS肽质谱指纹鉴定后证实该蛋白为锰超氧化物岐化酶(Mn superoxide dismutase, MnSOD),免疫组化法表明MnSOD在正常甲状腺细胞的胞浆及胞核内均有表达,在PTC及甲状腺滤泡癌的胞核内表达水平明显降低,而在甲状腺未分化癌中几乎不表达,提示MnSOD可作为诊断甲状腺未分化癌的分子标志物。MnSOD在甲状腺细胞内的表达由TSH通过不依赖cAMP的途径调控。它可以有效清除胞内氧自由基,影响细胞信号传导通路,并可在基因水平调节转录因子的活性。考虑MnSOD在细胞核内表达水平的改变同细胞失去分化功能及具有侵袭性的改变是一致的,所以认为MnSOD可能是一种肿瘤抑制物,通过多种途径诱导细胞凋亡。
1.5 Maspin Boltze等[9]利用蛋白质组学方法研究原代培养的甲状腺细胞(primary cultured thyrocytes, PT)及2.0Gyα粒子照射PT后的转化细胞(transformed thyrocytes, TT)的蛋白质表达差异。TT在生长动力学方面显示出与PT巨大的差别,包括缺少接触抑制,分化较差等。利用2DE电泳技术分析PT和TT的蛋白质表达,分别分离出1220±43和1228±55个蛋白质点,其中554号蛋白质点较为特殊(分子质量39606u,等电点5.90),其表达丰度在TT中显著升高,经MALDIMS肽质谱指纹鉴别后证实该蛋白为Maspin蛋白。Maspin是一种抑制肿瘤的丝氨酸蛋白酶抑制剂[10]。研究表明Maspin和p53基因相互作用,在体外和体内抑制血管生成。免疫组化法证明Maspin蛋白可特异性的高表达于PTC,表达率为70%,而在正常甲状腺组织及其他几种甲状腺癌组织中几乎不表达。Ito等[11]研究证明,Maspin在分化较差的PTC细胞中的表达显著增多,而在分化较好的PTC细胞中的表达则相对减少。推测Maspin在PTC的发生和转归方面起着重要作用,但其具体作用机制仍有待进一步的研究[12]。
2 治疗甲状腺肿瘤的分子靶点研究
Paron等[13]利用2DE和MALDITOFMS方法研究大鼠甲状腺细胞p53基因突变株的蛋白质表达差异,大约有300个特异性蛋白质点被分离出,其中2个热休克家族的蛋白质,热休克蛋白90(Hsp 90)和热休克蛋白60(Hsp 60)表达上调,研究发现Hsp 90表达上调和哺乳动物的细胞增殖功能及p53突变株的稳定性密切相关,故Hsp 90可在癌细胞中过度表达。目前一系列以Hsp 90为靶点的抗癌药物正在研制当中[14],其中Hsp 90抑制剂格尔德霉素的衍生物17烯丙胺17脱甲氧格尔德霉素(17allylamino17demethoxygeldanamycin, 17AAG)在英国和美国已进入Ⅰ期临床试验。格尔德霉素可以特异性地作用于Hsp 90的ATP结合位点,抑制其ATPase活性,还可以通过调节Hsp 90的表达而发挥作用。Park等[15]研究发现格尔德霉素可以抑制甲状腺癌细胞的增殖,使突变的p53基因表达下调,并且抑制表皮生长因子介导的癌细胞浸润行为。Marsee等[16]研究证明,格尔德霉素可以通过减少甲状腺细胞对碘的清除作用来提高其浓集碘的能力,提示格尔德霉素可以作为131I治疗甲状腺癌的辅助药物。BragaBasaria等[17]将17AAG加入到各种甲状腺癌细胞系的培养基中后发现,在0.1mmol/L 17AAG的培养基中培养72h后,甲状腺状癌细胞生长部分受抑,甲状腺滤泡癌细胞生长完全受抑,甲状腺未分化癌细胞大量死亡,故甲状腺未分化癌细胞对17AAG的细胞毒性作用最敏感,而状癌细胞的敏感性最差,且癌细胞对17AAG的敏感程度和胞内Hsp 90水平成正相关。进一步研究发现17AAG只能促使甲状腺癌细胞死亡,而不能诱导其凋亡,推测甲状腺癌细胞抗凋亡的机制可能和抑癌基因的突变有关。目前对格尔德霉素治疗甲状腺癌的研究仅限于基础理论方面,尚未有动物实验报道。
3 甲状腺状癌细胞膜表面糖基化大分子的研究
研究表明,PTC细胞膜表面成分可被硫酸角质素(keratan sulfate, KS)异常糖基化,Magro等[18]利用抗KS抗原决定簇的单克隆抗体(373E1)研究了各种甲状腺组织中KS的表达情况。结果显示PTC的免疫组化染色阳性率为100%,且和组织学分型、瘤体大小、有无转移无关。甲状腺滤泡癌的免疫组化阳性率仅为21%,其他甲状腺组织几乎不表达KS结合蛋白成分。通过蛋白质组学技术,证明PTC特异性KS结合蛋白是甲状腺球蛋白(thyroglobulin, Tg)和转铁蛋白(transferrin, TF)的特殊糖化形式,且KS糖化型Tg在PTC的表达较KS糖化型TF多,二者相对比为11.8∶1。进一步研究发现,KS糖化型Tg和TF因其特殊糖化形式和较大的分子质量,与正常Tg和TF相比,表现为不同的活体内蛋白水解形式,KS糖化型Tg可保护自身不被组织蛋白酶K、梭菌蛋白酶及凝血酶分解,一些KS糖化型Tg的蛋白水解片段被鉴别后证实,和PTC特异性癌胚蛋白纤维结合素有相似的分子质量。KS糖化型Tg为甲状腺癌的研究提供了方便,对于那些术后需要长期监测血清Tg水平的PTC患者,未来可以监测更为特异性的血清KS糖化型Tg水平来评估病人的预后。
4 展望
目前,国内外肿瘤蛋白质组学研究正在蓬勃开展,其中结肠癌、乳腺癌的蛋白质数据库已建设完成,人们可直接在互联网上查询。肿瘤蛋白质组学在研究肿瘤发病机理、发现抗肿瘤药物的作用靶点、新药筛选与药物毒副作用分析等方面有巨大的实用价值。相对于其他实体肿瘤,甲状腺癌的蛋白质组学研究起步较晚,随着蛋白质组学技术平台和生物信息学的发展完善,基因组学、基础肿瘤学等各学科的优势发挥和有效衔接,最终将会描绘出甲状腺肿瘤的蛋白质网络,建立癌细胞和正常细胞信号传导通路的数学模型,利用这一模型,研究者可以发现新的蛋白质,了解各类信号传导通路在细胞生长、分化、成熟以及凋亡过程中的作用,进而为甲状腺肿瘤的诊断及干预治疗提供分子基础[19]。
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关键词甲状腺肿瘤甲状腺肿胸骨后外科手术
胸骨后甲状腺肿瘤是指甲状腺肿瘤部分或全部位于胸骨入口水平以下,因手术中分离甲状腺下极视野小,止血操作不方便,往往出血较多或损伤喉返神经致声嘶,1996~2010年收治胸骨后甲状腺肿瘤患者48例,现就其临床特点、诊断、技术操作等问题进行讨论。
资料与方法
本组患者48例,男8例,女40例,男女比1:5,年龄35~72岁,平均53岁;病程1个月~30余年,约半数以上>10年;吞咽不适22例次,气憋胸闷感19例次,声嘶2例次,刺激性咳嗽5例次,无症状5例;手术后病理诊断:结节性甲状腺肿40例,伴桥本氏病1例,甲状腺瘤5例,甲状腺状癌2例。
辅助检查:全部病例均行颈、胸部X线摄片及CT、彩超检查。术前X线及CT发现气管移位47例次,受压变形15例次,肿瘤内见钙化点39例次,术前声嘶2例,经间接喉镜检查显示患侧声带麻痹,彩超显示实性肿块22例,囊实性肿块26例,对侧甲状腺肿大11例(仅4例有不超1/4腺体入胸骨后),颈部未探及明显肿大淋巴结。
治疗方法:全部病例均在气管插管全身麻醉下行颈部衣领式切口手术,于颈阔肌下分离皮瓣,切开颈白线至甲状腺峡部腺体包膜,根据肿瘤大小,决定切断患侧带状肌,先切断、结扎患侧甲状腺上极动静脉,再切断甲状腺峡部,将甲状腺与气管分离,解剖出患侧喉返神经上段及入喉处,向上牵拉患侧甲状腺上极,切断结扎患侧甲状腺中静脉,用手指沿肿物包膜作钝性分离,逐步将肿物下极向上抬起,将胸骨后甲状腺肿物拉到颈部,再解剖出患侧喉返神经下段,结扎患侧甲状腺下极动静脉,至胸骨后甲状腺叶切除。术中冰冻,2例为甲状腺状癌,再行峡部及对侧甲状腺部分切除。患者术中均放置负压引流管,术后第2、3天根据引流量多少拔除负压引流管。颈部术后均未加压包扎。
结果
术后出现声嘶5例,除2例术前出现声嘶,有3例因为患者颈部粗短、瘤体较大导致操作困难或操作不当损伤了喉返神经。术中出血1例,为处理下极时甲状腺下静脉破裂出血,当时用手指将出血点压向胸骨背面,待切下标本后暴露充分,在直视下结扎止血。无气管软化、胸膜损伤等严重并发症。40例结节性甲状腺肿,有4例对侧甲状腺出现结节性甲状腺肿而再行肿瘤剜除术,1例甲状腺状癌患者1年后出现患侧颈部淋巴结转移,而行颈清扫术,患者均全部存活。2例甲状腺癌患者分别生存8、5年。
讨论
关键词:甲状腺肿瘤;临床特点;手术效果
甲状腺肿瘤作为一种较为常见的临床多发病,其临床表现主要为甲状腺肿大以及颈部肿块[1]。有学者在研究中指出,甲状腺肿瘤患者的病情严重程度通常会受到众多因素的影响,且在对此类患者进行临床治疗时,手术治疗以及化疗是最为常用的方式,其疗效也相对较好[2]。为了对此类患者在手术治疗过程中的相关特点进行全面了解,本研究将对90例甲状腺肿瘤患者的临床资料进行分析。
1 资料与方法
1.1一般资料 将我院2012年10月~2013年10月所收治的90例甲状腺肿瘤患者作为研究对象,所有患者均为门诊确诊的患者,且符合国际卫生组织关于甲状腺疾病的诊断标准。将所有患者均分成两组,观察组有12例男性,33例女性,患者的年龄为20~78岁,平均(54.3±3.2)岁。对照组有16例男性,29例女性,患者的年龄为22~80岁,平均(57.3±2.6)岁。两组患者一般资料基本无差异,不具备统计学意义(P>0.05)。所有患者的颈部均存在不同大小的肿块,且存在清瘦、多饮、多食、易怒、失眠等高代谢综合症,所有患者在入院后均行颈部B超检查,同时对其行血液检查,以此来确定患者的血液甲状腺激素水平,排除存在其他严重疾病的患者。
1.2方法 对照组:该组患者入院后给予传统手术治疗,让患者处于平卧位,然后对患者给予局部麻醉处理,使其头部稍微后仰,在患者的病灶附近行4~6cm的弧形切口,将患者的皮肤与颈部括约肌切开后,对其皮瓣给予游离处理,然后再逐渐对其甲状腺以及带状肌进行分离,最后利用高频电刀来对患者的甲状腺组织以及血管进行切割,待肿瘤被切除后,对患者给予常规引流管留置处理。观察组:该组患者在入院后给予腔镜手术治疗,取其平卧位,对其进行局部麻醉处理,使其头部稍微后仰,在患者的病灶附近行2cm的弧形切口,其暴露病灶的方法与对照组一致。待带状肌与甲状腺分离后,将腔镜置入其中,然后利用超声刀来对患者的血管以及甲状腺组织进行分离,并根据患者的手术情况来对其行引流管留置。
1.3统计学分析 所有数据均采用SPSS16.0软件来进行分析,%表示计数资料,χ2为其对比结果检验指标, 表示计量资料,t为其对比结果检验指标。差异具有统计学意义则P
2结果
2.1手术治疗 观察组的术中出血量、手术时间均优于对照组,有统计学意义,P
2.2疗效 观察组的治疗总有效率以及并发症发生率均优于对照组,其差异具有统计学意义,P
3讨论
随着人们生活环境的日渐复杂化,各类疾病的发生率也变得越来越高,甲状腺肿瘤的发病率也呈现出逐年上升的趋势[3]。就病理学而言,甲状腺肿瘤主要包含了恶性和良性这两种,其中甲状腺癌症较为少见,还有部分甲状腺肿瘤具有特发性。临床医学显示,在对甲状腺肿瘤患者进行临床治疗时,其方式相对较多,例如外放射治疗、放射性核治疗、手术治疗以及内分泌治疗[4]。
有学者在研究报告中指出,40岁以上的女性是甲状腺肿瘤的高发人群,且以良性肿瘤较为常见[5]。一般情况下,甲状腺肿瘤患者的病程相对较长,且病情进展较为缓慢,当患者为单侧病变时,其肿块通常会表现为椭圆形或圆形,其表面较为光滑,且边界明显,按压时其硬度较强。此类患者的B超结果显示,肿瘤组织与周围组织未出现粘连的情况,肿块的位置会随着患者的吞咽活动而改变,且肿瘤的直径基本上在10cm以下。
甲状腺的位置较为特殊,其位于气管两侧,甲状软骨下方,它是甲状腺激素合成、分泌以及储存的主要场所,同时它还是维持全身热量以及耗氧量平衡,促进脂肪、碳水化合物、蛋白质的重要器官。基于此,在对患者行手术治疗时,一定要小心谨慎,否则就会伤到甲状腺,使其功能受损,对患者的正常生理功能造成损害。就解剖学而言,甲状腺的血流十分丰富,它与食管、气管以及咽喉部的动脉均存在密切联系,在手术时一定要避免伤到血管;同时甲状腺周围的神经分布也较多,且支配着食管、气管以及咽喉部的正常运转,因此,一旦手术不当就会造成严重的不良后果,因此,绝大部分患者不愿意接受手术治疗。
腔境作为一种全新的手术辅助方式,其具有疼痛轻、恢复快、创伤小、术后瘢痕较小等优点,对于甲状腺肿瘤患者而言,采用腔镜手术来对其进行治疗,不仅可以提高患者的治疗效果,而且还可以降低副作用[6]。本研究中腔镜手术在总有效率、并发症发生率、术中出血量、手术时间等方面均优于传统手术治疗,因此,其在临床中的应用也相对较广。
综上所述,甲状腺肿瘤患者的病灶部位较为特殊,常规治疗的效果相对较差,手术治疗的效果相对较好,但其风险较高,传统手术的切口相对较大,视野相对较窄,而甲状腺周围的血管、神经以及组织十分丰富,这就为患者的手术治疗增加了难度。腔镜手术不仅切口较小,且具有放大作用,在对患者进行肿瘤切除治疗时,可以避免对正常组织、血管、神经等造成伤害,降低了颈部其它器官被累及的概率。由此可见,在对甲状腺肿瘤患者进行临床治疗时,对于禁忌症较少的患者,尽量选择腔镜手术。
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关键词:改良Miccoli手术;甲状腺肿瘤;临床疗效
Abstract:Objective To evaluate the clinical efficacy of modified Miccoli operation and traditional operation in patients with thyroid tumor. Methods From February 2014 to March 2015, 279 patients with thyroid tumor were selected. 148 cases underwent modified Miccoli operation. The other 131 cases underwent traditional operation. The operation time(50.6±11.2 vs 76.8±28.5 min),peri-operative blood loss(13.7±8.2 vs 43.1±19.8 ml),length of incision(2.3±0.3 vs 6.7±2.4 cm),post-operative drain(23.6±7.4 vs 60.4±16.8ml),complication(1.3% vs 7.6%) and post-operative stay (2.8±1.2 vs 4.4±1.6 d) in Miccoli operation group and traditional operation group were compared. Results Compared to the traditional operation group,the operation time,peri-operative blood loss、length of incision,post-operative drain、complication and post-operative stay in modified Miccoli operation group were less. Statistical difference was found in the two groups. Conclusion Modified Miccoli operation is a minimal invasive, quick recovery, safe and feasible operation and is worth the clinical promotion.
Key words:Modified Miccoli operation; Thyroid tumor; Clinical efficacy
甲状腺肿瘤是一种以手术治疗为主的临床常见和多发疾病。传统开放手术常在颈部遗留约6~8cm长“自杀式”手术瘢痕,且具有术后并发症多、恢复慢、住院时间长等缺点[1]。随着腔镜技术的运用和发展,改良Miccoli手术以其微创、安全、高效等优势在甲状腺疾病的治疗中得到了广泛的应用和认可[2,3]。本文就通过回顾性研究我院行改良Miccoli 手术和传统手术治疗的279例甲状腺肿瘤患者,对比分析改良Miccoli手术和传统手术在甲状腺疾病治疗中的临床疗效。
1 资料与方法
1.1一般资料 选取 2014 年2月~2015 年3 月在我院行手术治疗的279例甲状腺肿瘤患者(148例行改良Miccoli手术,131例行传统手术)。两组患者的一般临床资料见表1,差异无统计学意义(P>0.05)。术前均无颈部手术史和手术禁忌症,术后病检均为良性病变。
1.2方法 传统组采用传统甲状腺腺叶切除的手术方式[4]。改良Miccoli手术组:取胸骨切迹上方1cm处约2~2.5cm 切口,利用腔镜器械建立操作空间,采用腔镜的真实虚拟放大成像技术,利用超声刀进行甲状腺微创手术。
1.3研究变量 对比分析改良Miccoli手术组和传统手术组在手术时间、术中出血量、切口长度、术后引流量、术后并发症、住院时间中的差异。
1.4统计学处理 数据采用SPSS 16.0 统计软件进行统计学分析。计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,以P
2 结果
改良Miccoli手术组患者手术时间、术中出血量、切口长度、术后引流量、术后并发症、住院时间均少于传统手术组(P