细胞DNA倍体定量分析在宫颈癌筛查中的临床应用价值

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【摘要】目的：探讨细胞dna倍体定量分析在宫颈癌筛查中的临床应用价值。方法：选取2012年1月～2014年1月在我院进行宫颈癌及癌前病变筛查的5231例女性作为研究对象，取所有受检者的宫颈细胞组织，分别做细胞DNA倍体诊断和巴氏染色诊断，比较两种方法的诊断结果。结果：5231例患者中DNA倍体定量分析阳性110例，阳性检出率2.10%；巴氏染色中组织学诊断阳性58例，阳性检出率1.11%。两种检测方法比较，DNA倍体定量分析诊断的宫颈癌及癌前病变检出率明显高于巴氏染色，差异具有统计学意义（P

【关键词】宫颈癌筛查；细胞DNA倍体；巴氏染色

【卫生部医药卫生科学技术发展研究中心科研课题项目，课题编号：W2011GJ26】

现对5231例女性宫颈细胞的DNA倍体定量分析结果和巴氏涂片诊断结果进行对比、分析，报道如下。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年1月～2014年1月在我院进行宫颈癌及癌前病变筛查的5231例女性作为研究对象，年龄在20～58岁之间，平均（37.13±4.48）岁。本组受检者均无肝肾功能不全、精神疾病史、急性生殖道炎症、子宫切除或宫颈锥切术史。检查前3d，均未进行过阴道给药或阴道冲洗，检查前24小时禁止。所有受检者均在非经期采集宫颈细胞样本，分别进行细胞DNA倍体定量分析和巴氏涂片检查。

1.2 方法

1.2.1 细胞采集

所有受检者均在常规妇检后，进行宫颈刷片取样。妇科专业医生使用阴道扩张器暴露宫颈后，手持宫颈刷刷柄，将刷头较长的刷丝插入子宫颈内约8mm处，用宫颈刷在受检者的子宫颈外口及宫颈管内顺时针同方向的旋转3至5圈，收集宫颈外口及宫颈管脱落细胞，停留8s后取出宫颈刷，将刷头向下垂直浸泡与样本收集管内，在保存液中搅拌，漂洗，离心2次后送实验室进行检验。

1.2.2 细胞薄片制作、染色

在对固定液离心后，倒出上层清液，使用适量蒸馏水进行稀释。对离心管进行振荡后，在装有细胞分散剂的试管中滴入细胞悬液（2滴），振荡混匀，使用吸管吸取一定量的细胞悬液，在备好的载玻片上垂直滴入。每份细胞悬液制作出2张细胞薄片，分别进行巴氏染色和Feulgen DNA染色。

1.2.3 巴氏涂片检测及细胞DNA倍体定量分析

由2名经验丰富的临床专业细胞学医师，对巴氏染色涂片进行阅片，检测阳性者在阴道镜下进行病理活检。Feulgen DNA染色应用Motic Cytometer型全自动细胞DNA倍体定量分析系统通过自动病理扫描处理进行测定诊断。当DNA倍体定量分析指数>2.5细胞或异倍体细胞峰时，立即进行活检。

1.3 诊断标准

病理诊断标准参考TBS分类法[2]，结果分为：宫颈细胞发生良性改变（BCC）、宫颈上皮内瘤变I级（CINI）、宫颈上皮内瘤变Ⅱ级（CINⅡ）、宫颈上皮内瘤变Ⅲ级（CINⅢ）、原位癌和鳞状细胞癌（SCC）和腺癌（AC）。

1.4 统计学方法

本次研究数据采用统计学软件SPSS19.0进行处理，以%（百分率）表示计数数据，数据比较采用卡方检验，P

2 结果

5231例患者中，DNA倍体定量分析指数>2.5细胞或异倍体细胞峰为110例，诊断阳性率为2.10%，其中68例患者见大量DNA倍体异常细胞，42例患者见少量DNA倍体异常细胞；巴氏染色中组织学诊断阳性结果58例，诊断阳性率为1.11%。

对检测阳性者进行病理活检，结果详见表1。从表1可知，DNA倍体定量分析的宫颈癌及癌前病变检出率显著高于巴氏染色诊断，差异具有统计学意义（P

3 讨论

巴氏涂片法是宫颈癌及癌前病变检查的传统检查方法，但越来越多的医学者在临床实践中发现，巴氏涂片法在对宫颈疾病筛查中会出现一定的假阳性或假阴性，原因在于巴氏染色时转移的部分细胞会因为人为用力不均，而破坏细胞形态，在人工进行研究分析时，细胞不具随机性且重叠，会超过80%的细胞被丢弃，此外，在常规细胞学检查分析上，检查结果很大程度是依靠经验丰富的临床医师的主观意识判定，从而增加了宫颈病变的漏诊率或误诊率[3]。

近年来，关于宫颈癌筛查中应用宫颈细胞DNA倍体定量分析的文献报道越来越多，尤其是在欧洲、北美一些发达国家，该方法已成为临床上的一种常规检测手段。宫颈细胞DNA定量分析是一项全自动的细胞学分析新技术，其工作原理是采用显微分光光度与图像处理分析技术想结合，直观的逐个测量每一个细胞，同时，永久保留细胞的图像。细胞DNA倍体定量分析可同时识别宫颈异常增生细胞和脱落细胞中的DNA异倍体细胞，其能在细胞形态发生明显改变前检测到细胞中的异常DNA倍体，DNA倍体异常往往是宫颈癌变前的表现，所以该方法对于早期检出宫颈癌及癌前病变具有重大意义。

本次研究结果显示：5231例患者中DNA定量分析阳性检出率为2.10%，巴氏染色法的阳性检出率为1.11%，DNA倍体定量分析诊断阳性率明显高于巴氏染色，差异具有统计学意义（P

【参考文献】

[1] 霍媛媛，景彩萍.宫颈液基细胞学检查联合细胞DNA倍体定量分析及宫颈活检在宫颈病变中的作用[J].延安大学学报（医学科学版），2012，10（1）：31-32.

[2] 范远芳，郭云翼，张维等.TCT和DNA倍体分析技术在宫颈癌筛查中的应用比较[J].中国实验诊断学，2014，18（2）：288-290.

[3] 武卫华.DNA定量细胞学与液基细胞学联合检测宫颈癌的研究进展[J].医学综述，2011，17（17）：2689-2691.