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羊水胎粪污染新生儿外周血中的GM―CSF、IL―6检测及其临床意义

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摘要:目的 探讨血清中的GM-CSF、IL-6含量在诊断新生儿感染性疾病中的价值,为临床提供早期发现早期诊治新生儿感染的理论依据。方法 分别对出生时羊水有无胎粪污染初分娩的新生儿外周血血清中的gm-csfil-6含量进行测定,并与常规检查进行比较。结果 两组新生儿感染发生率有显著性差异,GM-CSF、IL-6含量升高,有统计学差异。结论 羊水胎粪污染与新生儿感染有密切关系;羊水胎粪污染新生儿的GM-CSF、IL-6含量显著升高临床意义显著,应给予干预抗感染治疗措施。

关键词:羊水胎粪污染;感染;IL-6;GM-CSF;新生儿

羊水污染是新生儿出生时比较常见的现象,近年来,国内外研究表明羊水污染与新生儿患感染性疾病的关系密切,尤其是重度羊水污染患儿。对临床来讲早诊断、早治疗至为重要。炎症因子GM-CSF、IL-6含量的检测是早期诊断和预测感染的重要指标,本研究拟测定初分娩新生儿血GM-CSF、IL-6含量,结合常规血检对于亚临床表现新生儿感染起鉴别预测作用。

1资料与方法

1.1一般资料 2012年9月~2013年7月在我院妇产科分娩的足月新生儿,出生后即入住新生儿科,共计44例,根据出生时有无羊水胎粪污染分为两组,无羊水污染者为对照组共计24例,男:女为1∶1.4,剖宫产:顺产为1∶1.3,平均出生时胎龄(38±1.9)W、平均出生体重(3.1±0.6)kg,其中轻度窒息6例,重度窒息3例;羊水污染Ⅲ°污染为实验组共20例,男:女为1∶1,剖宫产:顺产为1∶2.3,平均出生时胎龄(38±1.5)W、平均出生体重(2.9±0.6)Kg,其中轻度窒息7例,重度窒息6例。

所有新生儿均无先天性畸形,无免疫系统疾病等,新生儿生后感染临床表现,①对照组:新生儿感染表现体温低、反应差、皮肤花斑、喂养困难、血培养阳性各1例,其他,感染率4.2%。②Ⅲ°组:新生儿感染表现皮肤花斑、喂养困难各4例、发热、体温低各2例、反应差3例、肺炎4例、血培养阳性各1例,其他,感染率25%。

1.2标本采集与测定 实验组与对照组均于出生后24 h内采集血标本3 mL置于EDTA试管中,2 h内送检验科用自动血细胞分析仪进行血常规检测,并分装离心置于Eppendorf管中,-20℃冻存待测。CRP含量测定:采用C-反应蛋白测定试剂盒(颗粒增强免疫透射比浊法),GM-CSF、IL-6水平测定:采用高灵敏度的双抗体夹心ELISA法。由上海逸峰生物科技有限公司分装检测。

2结果

2.1实验组与对照组新生儿出生前后感染情况、常规炎症检测、GM-CSF、IL-6含量的比较,两组新生儿感染:实验组20例感染率25%,对照组24例感染率4.2%,分别比较进行χ2统计分析,P

本实验采用全自动血细胞分析仪检测白细胞在实验组与对照组新生儿外周血中的计数和CRP检测,两组新生儿血的白细胞计数及分类、CRP含量均数不相等,组间分别进行比较t检验分析,见表1。

2.2预后 20例Ⅲ°羊水污染新生儿均给予病因治疗、对症治疗和经验性抗菌药物抗感染治疗均痊愈出院;其中1例足月小样儿治疗后加重转上级医院。24例对照组42%患儿给予上述对症治疗和经验性抗感染治疗,均痊愈出院。

3讨论

3.1羊水污染对新生儿的影响 多数医师认为胎儿宫内窘迫致羊水污染,但目前认为把羊水胎粪污染当作一个独立的胎儿缺氧指标证据不足。新生儿先天性败血症的死亡率高,Carroll等[1]报道33%羊水培养阳性的胎儿和4%羊水培养阴性的胎儿患有菌血症,因此胎儿亚临床感染远比传统认识的常见和严重得多。

3.2新生儿外周血常规和CRP含量变化及其意义 白细胞通过吞噬和产生抗体等方式来抵御和消灭入侵的病原微生物,新生儿感染发生血小板减少下降的发病机制是当机体发生炎症时循环中血小板淹没在炎症介质中,激活凝血因子。CRP是第一个被认为是急性时相反应蛋白的,这种急性反应蛋白在过去10年中常作为感染的常规标志物应用。血常规和CRP含量作为传统常规细菌感染指标,因其检测方法简便、快捷、经济,是各级医院尤其是基层医院感染鉴别的主要指标,具有一定的临床价值。本研究结果显示,实验组与对照组相比WBC、N%、CRP显著上调,PLT显著下调,按照第3版金汉珍《实用新生儿学》新生儿常用化验正常值:出生24 h内血常规均在正常范围内,所以无法真正判断感染,只有动态检测对比才能体现临床价值,对诊断实用价值不够理想,特异性和敏感度不高,有待进一步深入研究解决。

3.3 GM-CSF 和IL-6在新生儿细菌感染中的作用 当机体受到炎症的刺激下通过旁分泌等形式产生炎症因子,炎症因子以网络的形式发生相互作用,IL-1、TNF-α可诱导GM-CSF的产生,两者相互协调和级联叠加功能发挥重要促炎作用。"GM-CSF的细胞因子网络假说"明确GM-CSF除了起促炎反应,还有抗炎能力。在近几年GM-CSF对炎症作用机理的研究中有GM-CSF含量增高也有GM-CSF含量下降的报告,总之GM-CSF在炎症反应中的确有着重要的作用,但是其精确的作用机理尚需进一步明确。IL-6有调节免疫反应、急性期反应和血细胞生成, 在疾病和损伤过程早期, 炎症细胞因子( 包括TNF、IL-6、IL-1和IL-8) 很快被诱导产生出来,对许多炎症和损伤的愈合过程起介导和调节作用,在脓毒症中存在双重效应。IL-6水平升高作为一个信号调动机体防御反应, 对某些前炎症反应有分化和下调作用,对TNF的作用发挥负反馈调节效应。宿主免疫力受损害可促进细菌的迁移, 用IL-6治疗后可减少细菌的迁移, 从而减少并发的脓毒症[2]。但极高水平的IL-6可能导致免疫功能失调,加剧疾病的严重程度,Kanangat等[5]研究发现了这一现象。致炎因子对于细菌生长的这种双向效应也许可以帮助解释难以解决的急性呼吸窘迫综合征患者的频繁发生的医院感染。本实验旨在探讨GM-CSF、IL-6在羊水污染新生儿血清中含量的临床意义,研究结果表明:实验组与对照组相比,GM-CSF、IL-6在血清中的含量显著上升,与类似的炎症反应表现相似,GM-CSF、IL-6上升与分娩后新生儿感染率上升体现了一致性,因此有理由认为在新生儿分娩后GM-CSF、IL-6的含量上升与羊水Ⅲ°污染密切相关,亦与新生儿细菌感染紧密相关。

3.4总结 既往观察认为白细胞总数上升可能是感染或者窒息等应激反应所致,但很难鉴别,通过定时复查白细胞或CRP等指标进行粗略评价。近3年的卫生部抗菌药物的合理使用对新生儿的诊治提出了更高诊断技术水平的要求,同时患儿家属对刚出生新生儿存活及后遗症等方面预期值较高,要求临床医生在诊治上要有充分的理论依据,而忽略新生儿早期感染的炎症指标将带来患儿自身及医疗质量等方面的严重后果。根据新生儿免疫的特殊性大部分新生儿感染与菌血症有关,血培养是感染诊断金标准,但国内血培养阳性率低,只有7%~8%。根据上述统计分析笔者认为联合GM-CSF、IL-6炎症因子检测可以更早、更准确鉴别羊水污染患儿是否感染,为临床医生早期发现提供有力佐证。联合CRP和GM-CSF、IL-6测定更是为了配合卫生部抗菌药物专项整治活动中合理使用抗菌药物的要求,因新生儿各项脏器尚未发育成熟,作为两项炎症追踪指标,可以为医师减少或不使用抗菌药物以及及早停用抗菌药物提出指导性意见。

参考文献:

[1] Carroll SG, Papaioannou S, Ntumazah IL,et al. Lower genital tract swabs in the prediction of intrauterine infection in preterm prelabour rupture of the membranes[J].Bri J Obstetr Gynecol,1996,103(1):54-59.

[2]Liu Q,Djuricin G,Nathan C,et al.The effect of interleukin-6 on bacterial translocation in acute canine pancreatitis [J].Int J Pancreatol,2000,27:157-165.

[3]Kanangat S,Meduri GU,Tolley EA,et al.Effects of cytokines and endotoxin on the intracellular growth of bacteria[J].Infect Immun,1999,67:2834-2840.

[4]Keyworth N,Millar MR,Holland KT.Development of cutaneous microflora in premature neonates[J].Arch Dis Child,1992,67(7 Spec No):797-801.