不同消毒剂及激素对江西省野生白花凤仙花组培诱导的影响
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摘要 [目的]研究不同消毒剂和激素对江西野生白花凤仙花外植体诱导效果的影响。[方法]把江西省铜鼓县大沩山野生白花凤仙花移植温室内，待其长出新枝后，剪去带有腋芽的嫩梢为材料，研究0.1%升汞、2%次氯酸钠、10%次氯酸钙和饱和漂白粉溶液等不同消毒剂在不同处理时间对外植体的消毒效果，以及不同浓度的6-BA和NAA组合对外植体诱导率的影响。[结果]以酒精消毒30 s后再用0.1%升汞消毒，白花凤仙花外植体诱导的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA，诱导率高达94%。[结论]消毒剂和激素对江西野生白花凤仙花外植体的诱导均有一定程度的影响。
中图分类号 S681.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）15-0164-02
Effect of Different Disinfectantand and Hormone on Tissue Culture Induction of Wild White Impatiens in Jiangxi Province
ZHANG Fu-yuan LI Dan-dan LIAO Zhong-ming ZHONG Xiao-hong
（Jiangxi Environmental Engineering Vocational College，Ganzhou Jiangxi 341000）
Abstract [Objective] To study different disinfectants and hormone on wild white Impatiens in Jiangxi Province induction effect.[Method] Transplant the raw Impatiens of Dawei Mountain of Tonggu County in Jiangxi Province to greenhouse，after the new branch come out，cut tender tip with axillary bud as materials，disinfection effect of different disinfectant such as the concentration of 0.1% mercuric chloride，2% sodium hypochlorite，10% calcium hypochlorite and saturated bleaching powder on explant in different processing time were study，as well as the effect of the combination of different concentrations of 6-BA and NAA on explant induction rate.[Results] With 0.1 percent mercury bichloride disinfect after with alcohol disinfect for 30 second Impatiens explant induction medium was MS+2.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA，induction rate was 94%.[Conclusion] Disinfectants and hormone all had a certain degree of influence on wild white Impatiens induction in Jiangxi Province.
Key words wild white Impatiensh；disinfectant；hormone；tissue culture；induction；Jiangxi Province
野凤仙（Impatiens dayibi.Franch.）系白花凤仙花科白花凤仙花属草本植物。花期6―10月，色黄，其花“头翅尾足俱，翘然如凤状”，故名。喜生于沟谷、湿地或溪流岩石边。人们观赏花卉，不仅重其色，爱其香，也很注重其姿态，该花生得格外其巧，宛如飞翔的金凤，叫人赞不绝口。谢花后结实如小毛桃，一个个倒挂着，像个小吊钟，颇有风趣。野凤仙是美丽的花坛植物，宜群植于庭前、路边、篱旁，也可盆栽观赏。全草及种子入药，有活血调经、舒筋活络，治跌打损伤、风湿疼痛之效[1-3]。
迄今为止，该花不但花卉市场上未见踪影，即便是各生态科技实验园也很少见，国内外学术期刊暂未发现对野凤仙的研究报道。一方面随着人们对生态文化认识的增强，需要满足人们对奇花异草的欣赏，另一方面为填补建设鄱阳湖生态经济区野生植物的利用（本花是在鄱阳湖周边的修河源和云山发现的，属奇花异草）[4]，通过植物组织培养方法快速大量繁殖，投放市场，会产生极大的经济效益、生态效益和社会效益。试验利用多组培养基配方进行组织培养试验，找出最适合江西野生白花凤仙花组织培养所需的激素种类和水平及消毒剂种类和浓度，为江西野生白花凤仙花高效组培和快速繁殖提供一定的试验依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
研究对象为江西省铜鼓县大沩山野生白花白花凤仙花，移植江西环境工程职业学院温室内，待其长出新枝后，剪去带有腋芽的嫩梢为材料。试验所用主要试剂均为国产分析纯，市售。
1.2 试验方法
取通过酒精处理30 s的江西野生白花凤仙花外植体，分别用0.1%升汞、2%次氯酸钠、3%次氯酸钙和饱和漂白粉溶液处理，其中升汞处理时间分别为4、6、8、10、12、16、20 min，其他3种消毒剂处理的时间分别为10、15、20、25、30 min。消毒处理后使用无菌水对江西野生白花凤仙花外植体进行冲洗，冲洗次数为5遍，冲洗完的外植体，依据腋芽的分布切块，接种在MS培养基中，分析不同消毒剂对外植体组培的影响；另外在MS培养基中，外源激素添加6-BA和NAA，6-BA设3个浓度梯度，分别为1、2、3 mg/L；NAA设0.2、0.4、0.8、1.6 mg/L 5个浓度梯度，分析2种激素不同浓度组合对外植体组培的影响。
1.3 数据统计与分析
30 d后对不同消毒剂、不同处理时间下外植体的成活率、死亡率、污染率、诱导率进行计算和统计。其计算公式如下：
成活率（%）=（外植体成活数量/外植体接种数量）×100
死亡率（%）=（外植体死亡数量/外植体接种数量）×100
污染率（%）=（外植体污染数量/外植体接种数量）×100
诱导率（%）=（成功诱导芽数量/诱导外植体数量）×100
2 结果与分析
2.1 不同消毒剂对外植体消毒效果的影响
2.1.1 0.1%升汞。由表1可以看出，当外植体使用。1%升汞消毒后，接种MS培养基中，其外植体污染的数量与消毒时间呈反比。使用浓度0.1%的升汞消毒，处理8 min开始出现外植体死亡，并且升汞处理的时间越长，外植体死亡的比例越高，与处理时间呈正比关系。而0.1%升汞消毒后的外植体存活率呈波动曲线变化，随着处理时间延长，逐步增加，10 min时存活率达到峰值87%，然后随着处理时间继续延长存活率显著下降。由此可知，在以追求外植体存活为目标的组培中，用浓度为0.1%的升汞消毒时最适宜消毒时间为10 min。
2.1.2 3%次氯酸钠。由表2可以看出，使用3% 浓度的次氯酸钠消毒江西野生白花凤仙花外植体时，任何处理时间段的结果都不理想，污染率非常高（80%～100%），而存活率最高的只有5%，因此该消毒方式不适合野生白花凤仙花外植体组培时的消毒。
2.1.3 10%次氯酸钙。由表3可以看出，使用浓度为10%的次氯酸钙对野生白花凤仙花外植体消毒时，其处理结果与3%次氯酸钠消毒处理的结果相似，均为污染率太高，而存活率太低，不适合用于野生白花凤仙花外植体组培时的消毒。
2.1.4 饱和漂白粉溶液。由表4可以看出，使用浓度饱和的漂白粉对野生白花凤仙花外植体消毒时，死亡率达到90%～100%，而任何消毒时间的江西野生白花凤仙花外植体存活率均为0，这种方法消毒处理后进行组培无法获得满意的结果，因而不适用于野生白花凤仙花外植体消毒。
2.2 不同浓度6-BA和NAA组合对外植体诱导率的影响
由表5可以看出，当NAA浓度一定时，随6-BA浓度的增加白花凤仙花外植体的诱导率总体趋势是增加的。当NAA浓度为0.4 mg/L时诱导率最大为94%。但在6-BA的浓度为3.0 mg/L时有玻璃化现象出现，且随着NAA 浓度的增加玻璃化现象更明显。综合以上情况可知，最适宜白花凤仙花外植体诱导的培养基为MS +2.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA；在此培养基中，白花凤仙花的诱导率高达94%。
3 结论与讨论
试验研究了4种消毒剂在不同处理时间对江西野生白花凤仙花外植体的消毒效果，包括0.1%升汞、3%次氯酸钠、10%次氯酸钙、饱和漂白粉溶液等。结果表明，0.1%升汞为最适宜的消毒药剂，在消毒时间为10 min时存活率高达87%，污染率仅为10%。同时，试验还通过比较不同浓度的6-BA和NAA组合对江西野生白花凤仙花外植体诱导率的影响，从而得到最适宜的培养基为：MS+2.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA，白花凤仙花的诱导率高达94%。目前，对江西省野生白花凤仙花的组培研究还未见报道。试验利用江西省野生白花凤仙花为外植体成功的诱导出其组培瓶苗，为实现江西省野生白花凤仙花的商业化大规模生产提供了技术储备。
4 参考文献
[1] 北京林业大学园林系花卉教研组.花卉学[M].北京：中国林业出版社，2004.
[2] 徐耀良，陈艺林.浙江白花凤仙花属分类群[J].植物分类学报，1999，37（2）：194-200.
[3] 陈艺林.国产白花凤仙花属新种[J].植物分类学报，1999，37（1）：88-89.
[4] 《江西植物志》编辑委员会.江西植物志：第二卷[M].北京：中国科学技术出版社，2004.