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头孢处理对切花的影响释解

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试验材料“卡罗拉”月季采自海南佳裕生物开发有限公司的花圃,采摘标准为外观一致且外层花瓣开始松散的“卡罗拉”,为防止或减弱空腔化,采摘时尽量保留足够长的花茎,采摘切口为平切(尽量缩小切口的面积,从而减少空气进到花枝的导管内)。采摘后20支一扎用聚乙烯保鲜膜包裹,在1h内运送到实验室。试验试剂:注射用头孢唑啉钠(先锋5号,广州白云山天心制药股份有限公司生产,规格为0.5g/瓶,按C14H14N8O4S3计算);注射用头孢呋辛纳(深圳致君制药有限公司生产,规格为1.0g/瓶,按C16H16N4O8计算)。注射用头孢曲松钠(规格为1.0g/瓶,按C18H16N8O7S3计算,海南思迈药业有限公司生产),去离子水等。仪器与设备:DDS-307电导率仪(上海伟业仪器厂生产),水浴锅、电子天平、滤纸、干湿球湿度计、电炉、抽真空注射器、三角瓶、剪刀等。试验方法试验在海南琼州学院生物科学与技术学院实验室进行,室内温度17~28℃,空气相对湿度80%~90%。把采摘的切花月季从花朵下35cm处裁剪,裁剪的切口为斜切口,角度为45°,椭圆形,目的是增大切口面积,促进花枝对水分的吸收。

因头孢菌素种类繁多,所以该试验选用的是第1、2、3代头孢中销量最大的具有代表性的头孢菌素,第1代头孢菌素选用‘注射用头孢唑啉钠’(先锋5号),第2代头孢菌素选用‘注射用头孢呋辛纳’,第3代头孢选用‘注射用头孢曲松钠’;并以动物使用的浓度为参考,设计成质量百分比为0.010%、0.025%、0.050%、0.100%、0.200%5种浓度。为更有针对性地研究头孢菌素对切花月季“卡罗拉”的细胞膜透性的影响,首先做筛选试验,并根据切花瓶插寿命的长短筛选出以下5个处理:0.010%头孢曲松钠、0.010%头孢呋辛钠、0.100%头孢呋辛钠、0.010%头孢唑啉钠、0.025%头孢曲松钠。项目测定相对电导率测定:测量叶片和花瓣的相对电导率采取浸泡法,取适量待测的“卡罗拉”的花瓣用自来水洗净后再用蒸馏水冲洗3次,用滤纸吸干表面水分,将花瓣分别剪成合适长度的长条(一般要避开主脉),迅速称取3份鲜样(各3份),每份为0.1g,分别置于具有刻度的试管中(试管中有10mL去离子水),盖上玻璃塞置于室温下浸泡处理12h后用电导仪测定浸提液电导率R1,接着沸水浴加热30min,冷却至室温并摇匀后测量浸提液电导率R2,R1/R2即是要测的相对电导率。该试验共设6次重复,每天定时测量1次数据。1.4数据分析差异性统计分析采用SPSS.13.0和Excel软件进行。

不同头孢菌素处理对鲜切花月季细胞膜透性的影响由图1、2可知,随着瓶插天数的增加,5个处理和空白对照相对电导率(REC)都逐渐增大,与空白对照相比,5个处理都不同程度地抑制了叶片和花瓣REC的增加速度。由图1可知,在叶片相对电导率方面,0.010%头孢曲松钠处理抑制效果最好,从处理的第2天开始,叶片相对电导率均低于其它处理及空白对照。其次,0.010%头孢呋辛钠和0.100%头孢呋辛钠抑制效果也很明显,0.010%头孢呋辛钠比0.100%头孢呋辛钠抑制效果相对较好。再次,0.010%头孢唑啉钠和0.025%头孢曲松钠效果相对较差,尤其是0.025%头孢曲松钠,在5个处理中其抑制效果最不理想。由图2可以看出,对REC的抑制仍然是0.010%头孢曲松钠效果最好,REC数据波动不大,几乎在一条斜率线上。其次效果较好的是0.010%头孢呋辛钠,其中,在处理的第4天和第5天对REC的抑制效果优于所有处理。0.100%头孢呋辛钠处理REC数据也比较平稳,数据也在一条斜率线上。0.010%头孢唑啉钠处理和0.025%头孢曲松钠处理效果比较差,尤其是0.025%头孢曲松钠处理抑制效果略优于CK。2.2各处理间相对电导率差异性比较分析由表1可知,在5%的概率水平上,处理前叶片相对电导率差异性不显著,在处理的前7d,0.010%头孢曲松钠、0.010%头孢呋辛钠和0.100%头孢呋辛钠与空白对照差异性显著,0.010%头孢唑啉钠在处理的第2、4、5、6天与空白对照差异性显著,其它3d差异性不显著,0.025%头孢曲松钠在处理的前6d与空白对照差异性显著,第7天差异性不显著。处理的第1天,各处理间差异性相对较小,从第2天开始,处理间差异性较大,其中0.010%头孢曲松钠在减缓相对电导率增加方面,效果表现突出。由表2可知,在5%的概率水平上,花瓣的相对电导率在处理前差异不显著,0.010%头孢曲松钠和0.010%头孢呋辛钠在处理期间,每天花瓣中的相对电导率与空白对照差异性均显著,0.100%头孢呋辛钠仅仅在处理的前2d与空白对照差异性不显著,其它5d差异性均显著,0.010%头孢唑啉钠在处理的前6d与空白对照差异性均显著,只有第7天差异性不显著,0.025%头孢曲松钠仅在处理的第5天与空白对照差异性不显著,其它6d,差异性均显著。

该试验结果表明,所筛选出的5个处理都是低浓度的头孢菌素,质量百分比浓度为0.200%的头孢菌素均被淘汰,质量百分比浓度为0.100%的头孢菌素只有0.100%头孢呋辛钠入选。可见,高浓度的头孢在干扰细菌细胞壁合成的同时也干扰了切花细胞壁的合成,导致切花“卡罗拉”提前凋谢。在抑制REC增加方面,对3代头孢菌素比较发现,低浓度的头孢菌素第3代优于第2代,第2代优于第1代,尤其是低浓度的第3代头孢菌素(注射用0.010%头孢曲松钠)对叶片和花瓣相对电导率抑制效果最佳。头孢菌素通过杀死切换切口处的细菌和真菌,防止因菌类感染导致的导管堵塞,从而缓解了水分胁迫,减缓了细胞膜透性的增加。5个处理均不同程度地抑制或减缓了相对电导率增加。头孢菌素能有效地抑制或减缓切花“卡罗拉”的相对电导率的增加,证明了切花切口处的细菌和真菌对头孢菌素敏感,头孢菌素能明显地抑制或杀死这些菌类。

作者:刘书伟 王燕 黄绵佳 袁学军 曾凌云 单位:琼州学院 海南大学