柱前衍生高效液相色谱法测定太子参中精氨酸的含量

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【摘要】目的：建立太子参药材中精氨酸的含量测定方法。方法：样品用0.1mol/L盐酸一乙醇（9：1）混合溶液提取，采用邻苯二甲醛（0PA）与一氯甲酸芴甲酯（FMOC）联用全自动柱前衍生化，Hypersil ODS柱，波长为338nm，检测太子参药材中精氨酸的含量。结果：精氨酸在0.2～4Ng范围内呈良好的线性关系，平均回收率为101.2%。结论：本方法灵敏、准确，快速，具有良好的重复性和稳定性，可用于太子参中精氨酸的含量测定。不同产地来源、不同批次太子参中的精氨酸含量存在一定差异。

【关键词】太子参；氨基酸；柱前衍生；HPLC

【中图分类号】R927 【文献标志码】A 【文章编号】1007-8517（2013）19-0007-03

太子参为《中国药典》收载的常用补益中药，别名孩儿参、童参、四叶参、米参等，系石竹科植物孩儿参[Pseudostellaria heterophylla（Miq.）Pax]的干燥块根，具有益气健脾、生津润肺等功效。临床用于脾虚体倦、食欲不振、病后虚弱、气阴不足、自汗口渴、肺燥干咳等症状。研究表明，太子参中含有环肽、氨基酸、多糖等化学成分。其中，氨基酸是太子参滋补功能的重要药用成分，与太子参的补益功效有着非常密切的关系。因此，太子参中氨基酸成分应作为质量标准控制的一个重要指标，但在中国药典尚未制定氨基酸含量测定的相关标准。

氨基酸分析常用的方法主要有衍生化离子交换色谱法和衍生化高效液相色谱法，前者需要使用氨基酸分析仪，后者使用一般分析实验室常规配备的高效液相色谱仪和C18色谱柱即可完成，且分析时间短，灵敏度高，已逐渐取代氨基酸分析仪在许多领域中的应用。常用的柱前衍生化HPLC测定氨基酸的方法有AQC（6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯）法、DNFB（2，4-二硝基氟苯）法、DABS（磺酰氯二甲胺偶氮苯）法、PITC（异硫氰酸苯酯）法和OPA-FMOC（邻苯二甲醛和9-芴甲基氯甲酸酯）法等。前4种方法需手工衍生，反应活性差、速度慢且易受试剂干扰。OPA-FMOC法可克服上述缺点，应用广泛

本文采用邻苯二甲醛（OPA）与—氯甲酸芴甲酯（FMOC）联用全自动柱前衍生化高效液相色谱法建立了太子参中精氨酸的含量测定方法。分离效果好，谱图重现性好，分析和检测结果令人满意，可推广应用于中药材中氨基酸类成分含量测定。

1 仪器与试药

Agilent 1100系列高效液相色谱仪；DAD检测器；精氨酸对照品（批号：024-201004，由中国食品药品检定研究院提供），一氯甲酸芴甲酯（FMOC） （批号：FA120119，购自LANCASTER公司）；乙腈、甲醇、四氢呋喃为色谱纯，其他试剂均为分析纯。太子参药材来自福建、湖南、安徽，经上海市食品药品检验所季申主任药师鉴定。

2 方法与结果