猪断奶后多系统衰弱综合征(PMWS)的诊断与防治措施

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摘要：猪圆环病毒2型（PCV－2）所引起的断奶猪多系统衰弱综合征（pmws）已给世界各国养猪业造成巨大的经济损失，且近年来呈现不断扩散的趋势。5~12周龄仔猪是猪圆环病毒感染的主要对象，症状表现为生长缓慢、精神不振、食欲减退、咳嗽、呼吸困难等，少数伴有腹泻和中枢神经症状。可依据临床症状和病理变化给出初步的诊断，进一步确诊需运用分子生物学手段。要通过采取综合性措施进行预防，以减少养猪场PMWS的发病率。

关键词：猪多系统衰弱综合征（PMWS）；猪圆环病毒；断奶猪

中图分类号：S858．28文献标识码：B文章编号：1007－273X（2011）05-0027-02

断奶猪多系统衰弱综合征（postweaning multisystemic wasting syndrome，PMWS）主要由猪圆环病毒2型（PCV－2）所致，1991年在加拿大西部首次发现［1］，如今已广泛分布于各国，美国、法国、德国、意大利、日本、中国、荷兰、墨西哥等国均有报道。该病临床症状主要表现为断奶猪皮肤苍白、体质下降，该病被公认为是继繁殖与呼吸障碍综合征之后的又一个重要的猪传染性疾病。2000年至今，我国大陆范围内发生了多起断奶猪多系统衰弱综合征，由于未使用恰当的防治方法进行控制，该病发病率和死亡率较高，严重地区死亡率可达40％，给养猪业带来巨大的经济损失。本文就此病的病原、临床症状、发病机理、诊断方法、防治措施等方面进行了论述。

1病原与临床症状

猪圆环病毒（porcine circovirus，PCV）属于圆环病毒科圆环病毒属［2］，1974年最初由Tischer从猪肾传代细胞系PK－15中分离得到。该科病毒特性与现存的病毒不同，是最小的动物病毒之一，直径为14～17nm，结构呈对称20面体，悬浮密度为1．37g／cm3，沉降系数52S。核酸是单股环状的负链DNA，基因组大小约为1．76kb。病毒衣壳蛋白分子量为36 000U，由一条多肽链组成。PCV能抵抗外界pH值为3的酸性环境，甚至在72℃的高温下也能存活，氯仿对其无失活作用，缺乏血凝活性。根据猪圆环病毒核苷酸序列、抗原等差异分为PCV－1和PCV－2两种血清型，PCV－1无致病性，包括PCV－PK15和其他存在于猪群内但无致病性的PCV；PCV－2有致病性，目前有从北美、欧洲等地的PMWS病体中分离出来的一些毒株被列入PCV－2。

患病的断奶仔猪主要表现为渐进性消瘦、生长缓慢、精神不振、食欲减退、咳嗽、呼吸困难等，少数伴有腹泻或黄疸症状，患病仔猪扎堆。感染后期淋巴结肿大，免疫能力大幅度降低，并且常与其他疾病混合感染，急性暴发死亡率可达10％以上，病后一般2～8d死亡，即使存活下来，其发育也会受阻而成为僵猪。剖检后可发现全身的淋巴结肿大，以腹股沟浅淋巴结肿大最明显，有白色坏死点分散在肾脏皮质和髓质。胆汁粘稠，混有细小颗粒，胰脏、脾脏和胸腺萎缩。少数仔猪可出现皮肤出血、坏死及肾衰竭。

2发病机理

PCV－2型病毒是引起PMWS的主要病原，有报道指出如果不存在PCV－2，断奶猪就不可能发生该病，有时发病和免疫刺激存在一定相关性［2］，PMWS还可与猪肺炎支原体、沙门氏菌、猪链球菌Ⅰ型、多杀性巴氏杆菌等病原的协同感染有关，使PCV－2的破坏性被这些病毒所利用，从而引起组织机能障碍和免疫抑制作用。此外，在PCV－2存在时，通风不好、猪舍潮湿寒冷、猪群密度大、管理不善、不同年龄猪混合饲养等不利的环境因素均可诱发该病且进一步加速扩散。PCV-2易感于5～12周龄断奶猪，水平、垂直传播均可。可经呼吸道、口腔感染不同年龄的猪，少数母猪也可经胎盘垂直感染给仔猪，此外PCV－2也可随传播。通过人工对猪接种PCV-2试验，发现同一猪群的感染率竟高达100％，感染猪的粪便、鼻分泌物中均可分离出PCV－2。

也有试验报道猪体内存在PCV－2，但没有引起PMWS。事实上，PCV－2感染是产生PMWS的必要条件，在病猪的体内能提取出大量的PCV－2抗原或DNA；不过猪血清中存在PCV－2抗体不一定能使猪发病。如今很多国家的养猪场都检测到PCV，但是并没有全部暴发PMWS，这主要是由于不同的病毒类型或者是不同的环境因素导致的。

3诊断

3．1剖检诊断

对死亡或发病晚期的病猪进行解剖以做出初步诊断，一般可发现肺间质变宽，红色或灰褐色斑点呈现于组织表面，偶尔可见肺脏化脓性病变。对于免疫系统而言，通常为全身淋巴结肿大，肠系膜、腹股沟和颌下淋巴结等部位的肿大尤为明显。

3．2实验室诊断

若需确诊该病，必须依靠实验室诊断方法。可取出病猪的淋巴结、肺脏或脾脏利用分子生物学手段进一步诊断，方法主要包括间接免疫荧光试验（IIF）、免疫荧光技术、间接免疫过氧化物酶技术、酶联免疫吸附试验（ELISA）、竞争性酶联免疫吸附试验（C－ELISA）、聚合酶链式反应技术（PCR）、DNA原位杂交（ISH）、电镜观察等。现简要介绍PCR、免疫荧光技术、DNA原位杂交、酶联免疫吸附试验等方法。

3．2．1聚合酶链式反应（PCR）Ouardanj建立一种多重PCR方法，该法是根据PCV和谷氨酸链中的开放读码序列而设计，包括两套可对PCV检测和定型的引物。第一套含两对引物，其中一对通过扩增ORF2上的488bp来检测PCV－1和PCV－2；另外一对扩增的对象不同，为PCV－1中ORF1上的375bp。第二套也包括两对引物，第一对和第二对引物分别扩增ORF1上的646bp和PCV－1的ORF2上的425bp。

3．2．2免疫荧光技术Dulac等较早建立免疫荧光技术，此方法通过对猪血清中的病毒抗体进行检测以确定PCV的感染情况。步骤是先滴加10倍稀释待检猪的血清于PCV感染的PK－15单层细胞之上，待其反应30min后吸干洗涤，滴加异硫氰酸荧光素标记的兔抗猪抗体在此反应30min后吸干、洗涤、镜检，设置未感染的PK－15细胞作为空白对照，若镜检发现荧光细胞则结果为阳性。

3．2．3DNA原位杂交技术（ISH）利用圆环病毒特异探针检测核酸从而在病变组织细胞中观察到明显标记。Allan用PCV－PK15的RF型DNA作为探针，能够检测到固定组织细胞中的病毒核酸。这种方法特异性强、灵敏度高，且能精确定位PCV在组织器官中的位置，不足之处在于无法区分PCV的血清型。

3．2．4酶联免疫吸附试验（ELISA）郎洪武等用PCV－2克隆化的特异性表达抗原对反应板进行包被［3］，然后利用ELESA检测猪血清中的PMWS抗体，如果被检测的样品OD值与对照样品的OD值之比大于3，则结果为阳性，小于3则为阴性。

4防治措施

4．1注射疫苗或血清

目前国内已经有PCV－2疫苗可以进行免疫接种，也可采取病猪的脏器如肺脏、淋巴结等组织制作自家组织灭活疫苗，对养猪场内的健康猪进行接种，能达到一定的预防效果。仔猪在10日龄左右接种，而母猪在产前20d时接种一次。研究表明猪蓝耳病病毒（PRRSV）和猪细小病毒（PPV）是PMWS的并发性病原体，为预防PCV与其他病毒混合感染，断奶前对仔猪接种PPV和PRRS疫苗可以降低PMWS的发病率，不过应禁止在急性PCV－2感染期间接种疫苗。此外还可利用血清疗法进行预防［4］，血清的制备方法是将本养猪场健康的母猪用感染仔猪的脏器自然感染后，使母猪体内产生相应的抗体，收集母猪血液，分离血清对断奶期仔猪采取肌肉注射和腹腔注射。注意应使用本养猪场的猪血清，选择合适的供血母猪，注意血清的贮存和注射方法。

4．2加强饲养管理

由于PMWS是通过呼吸道、口腔、粪便等接触传播，首先应该保证猪场内部实行全进全出的管理制度，禁止从疫区引猪，来访的车辆及货物等需要严格控制，同时防止其他动物如鼠、飞鸟等进入猪场，以阻断猪群之间的传播途径；其次猪群密度不应过大，猪舍通风换气良好，严格消毒，仔猪早断奶，不允许将不同年龄的猪进行混群饲养，尽量每栏只养一窝猪，及早对病猪或死猪进行隔离、深埋，最大程度避免交叉感染；再次，应将猪断奶、断水、换料、转群等过程中产生的应激因素降到最低。饲料中应加入充足的维生素、氨基酸和各种微量元素等，提高猪的抵抗力。在易感时期，为进一步防范免疫抑制作用，也可在饲料中加入免疫增强剂和一定量的霉菌毒素吸附剂。另外，给病猪喂食粥料或湿拌料能提高病猪的采食量。

4．3添加药物

猪感染PCV－2后，可继发感染支原体、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌等病原菌，因此添加能控制病原菌继发性感染的药物可起到一定的预防作用，且需对母猪和仔猪同时用药。例如可在产前、产后母猪以及仔猪饲料中添加支原净100mg／kg＋金霉素300mg／kg＋阿莫西林200mg／kg，分别连续使用一周或两周，可杀灭猪体内的病原菌，还能阻断母猪、仔猪间的垂直传播。

通过综合运用上述各种方法可降低PMWS发病率，减少经济损失。其中饲养管理措施是最重要的，不能过度依赖药物及疫苗，应结合当地具体的情况采取相应的综合手段，尽可能完善养猪场内的饲养条件。

参考文献：

［1］LIU Q，WANG L，WILLSON P，et al． Quantitative， competitive PCR analysis of porcine circovirus DNA in serum from pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome［J］． J Clin Microbiol，2000，39（9）：3474－3477．

［2］戴益民，何厚军．猪圆环病毒病（PCVD）研究进展［J］．动物科学与动物医学，2003，20（10）：38－40．

［3］左玉柱，丁壮． 猪断奶后多系统衰弱综合症（PMWS）［J］．畜牧市场，2010（3）：10－12．

［4］银梅，唐海蓉，陈桂香，等． 断奶仔猪多系统衰弱综合征［A］． 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集［C］，2005．