送春花无菌苗生根培养研究
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摘要：以送春花：学名为马利筋（Asclepias curassvia）的种子作为外植体，进行进瓶诱导并建立无菌体系，在此基础之上对其进行增殖培养，并对增殖培养中生长健壮的无菌苗进行了生根诱导研究，结果表明：马利筋较好的生根诱导培养基为：MS+NAA1.0 mg/L。
关键词：马利筋；组织培养；生根培养
1材料
用增殖培养后长势强壮的带顶芽的无菌苗作为生根材料。
2培养基
生根培养采用1/2MS为基本培养基，生长调节剂种类为NAP、IBA。生长素调节剂水平（单位均为：mg/L）为NAA：0.1、0.3、0.5、0.7；IBA：0-1、0.3、0.5、0.7。各处理因子、水平组合如表1：
取马利筋在幼苗增殖中生长健壮带顶芽的无菌苗，接入组号为Y1～Y8的培养基中，接后的材料放入培养室进行培养，每隔3天观察记录其生根状况和生长状况。 3评价项目与方法
观察比较不同生长调节剂对马利筋无菌苗进行生根培养的生长情况，并对各无菌苗的生长情况进行总结。
生根率（%）=生根的苗数，总接种苗数×100（5）
4结果与分析
4.1马利筋第1次生根培养研究
本次试验是在增殖培养的基础上，培养基选用1/2MS培养基，采用2种生长调节剂的不同浓度对生长健壮带顶芽的无菌苗所进行生根培养，其中NAP，的浓度为分别为0.1、0.3、0.5、0.7，IBA的浓度为0.1、0.3、0.5、0、7，Y1～Y4为NAA，Y5～Y6为IBA。每隔3天观察1次，记录结果。最终结果见表3：
从表3可以看出，第1次生根诱导采用了1种培养基和2种不同浓度的生长调节剂对马利筋无菌苗进行生根培养，由于马利筋这种植物在增殖培养过程中发现对培养基的挑选为主要因素，而在第1次生根培养过程中由于时间关系，只选用了1种培养基进行生根试验，最后没有出现生根现象，证明1/2MS+NAA的不同浓度的培养基不适合马利筋的生根培养。通过观察可以得出，采用NAP，为生根诱导培养的生长调节剂，马利筋随着NAP，浓度不断升高，相应的愈伤组织也在不断变大，这些愈伤组织都带绿点、黄褐色，不同颜色、形态或结构的愈伤组织，其再生能力也可能不同。但最后这些愈伤组织都没有形成根，其中原因不得而知。而采用IBA作为生长调节剂则没有愈伤组织的形成。当NAA的浓度为0.5mg/L时，幼苗生长较好，生长健壮，产生丛芽较多，有愈伤组织；当NAP，的浓度为0.7时有较大的愈伤组织，有黄叶出现，植株纤细。
4.2第2次生根培养
由于第1次生根培养没有成功，所以在第1次生根培养的基础上进行了第2次生根培养。本次试验选用的培养基为MS培养基，采用1种生长调节剂的不同浓度对生长健壮带顶芽的无菌苗所进行生根培养，其中NAA（单位均为mg/L）的浓度分别为1.0、1.5、2.0、3.0。每隔3天观察1次，记录结果。最终结果见表4：
表4马利筋第2次生根诱导结果
4.3分析结果
从表4可以看出，在马利筋的生根诱导培养中，当NAP，的浓度为1.0mg/L时，生根率高达87.5%，根生长良好，植株生长旺盛。说明该NAP，的浓度适于马利筋无菌苗的生根诱导，这一组合的培养基是比较理想的生根诱导培养基。当NAA的浓度为1.5mg/L时，虽然生根率达到62.5%，但随着浓度的升高，死亡率也在上升，可知浓度抑制了植株的增粗生长，促进了植株的伸长生长，同时产生大量黄叶，导致37.5%的植株死亡，所以这一浓度并不适于马利筋的生根培养诱导。而NAP，的浓度超过2.0mg/L时，只有少量的马利筋幼苗生根，死亡率高达75%以上，个别的幼苗愈伤组织过于巨大，影响其正常的生长，所以当NAP，的浓度高于2.0mg/L时，已不适于马利筋的生根诱导培养。试验最终结果表明：比较理想的生根诱导培养基为MS+NAA1.0mg/L。
5结论
对马利筋无菌苗进行第1次生根试验时发现，采用了1种培养基和2种不同浓度的生长调节剂对马利筋无菌苗进行生根培养，由于马利筋这种植物在增殖培养过程中发现对培养基的挑选为主要因素，而在生根培养过程中由于时间关系，只选用了1种培养基进行生根试验，最后没有出现生根现象，证明1/2MS培养基不适合马利筋的生根培养。通过观察可以得出，采用NAA为生根诱导培养的生长调节剂，马利筋随着NAP，浓度不断升高，相应的愈伤组织也在不断变大，这些愈伤组织都带绿点、黄褐色，不同颜色、形态或结构的愈伤组织，其再生能力也可能不同。但最后这些愈伤组织都没有形成根，其中原因不得而知。而采用IBA作为生长调节剂则没有愈伤组织的形成。当NAA的浓度为0.5mg/L时，幼苗生长较好，生长健壮，产生丛芽较多，有愈伤组织；当NAA的浓度为0.7时有较大的愈伤组织，有黄叶出现，植株纤细。在马利筋的第2次生根诱导培养中；当NAA的浓度为1.0mg/L时，生根率高达87.5%，根生长良好，植株生长旺盛。说明该NAA的浓度适于马利筋无菌苗的生根诱导，这一组合的培养基是比较理想的生根诱导培养基。当NAP，的浓度为1.5mg/L时，虽然生根率达到62.5%，但随着浓度的升高，死亡率也在上升，可知浓度抑制了植株的增粗生长，促进了植株的伸长生长，同时产生大量黄叶，导致37.5%的植株死亡，所以这一浓度并不适于马利筋的生根培养诱导。而NAP，的浓度超过2.0mg/L时，只有少量的马利筋幼苗生根，死亡率高达75%以上，个别的幼苗愈伤组织过于巨大，影响其正常的生长，所以当NAA的浓度高于2.0mg/L时，已不适于马利筋的生根诱导培养。试验最终结果表明：比较理想的生根诱导培养基为MS+NAA1.0mg/L。