芡实多糖的提取及含量测定

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摘要：研究芡实多糖的最优提取方案。采用超声波提取法，在复合酶的催化作用下，采用四因素三水平正交试验对芡实多糖进行提取来确定芡实多糖的最优提取方案。在纤维素酶用量25%和果胶酶用量20%，料液比为1：10，超声时间为1小时，超声温度为60℃，测得芡实多糖的多糖提取率为4617%。利用超声波辅助提取的方法，提取率高；为芡实多糖的提取工艺提供了指导性意义。

关键词：芡实 多糖 超声波 复合酶

中图分类号：R284文献标识码：A文章编号：1009-5349（2017）09-0192-01

芡实是中国传统中药材睡莲科芡属的果实，味甘、涩、性平，归肾、脾二经，能够固肾涩精，补脾止泻，用于遗尿尿频，脾虚久泻。芡实多糖是芡实最主要的活性成分，具有抗氧化、抗菌、降低血糖、改善心肌缺血、降低尿蛋白、预防胃粘膜损伤等多方面的药理作用

一、实验

（一）药材

芡实（西安市售，购买于陕西康盛堂药业有限公司，在50℃下烘干3小时，粉碎）；无水乙醇、蒽酮试剂、浓硫酸、无水葡萄糖对照品、果胶酶、纤维素酶。

（二）芡实多糖的提取

准确称取10g芡实粉末，过40目筛，加入复合酶酶解，分别加入一定蒸馏水搅拌，设置超声提取温度和超声时间，在高速离心机里在6000r/min离心5分钟，取上清液，减压浓缩、醇沉、冷冻干燥得到成品。

二、葡萄糖标准曲线的绘制

精确称取无水葡萄糖00261g，加入水定容至100ml备用。精密称取蒽酮01g，在加入100ml 80%的硫酸溶解备用。准确用量筒量取02ml、04ml、06ml、08ml、10ml、12ml的葡萄糖溶液，加水至2ml，再加入蒽酮试剂6ml，摇匀，分别编号。在波长625nm处分别测定吸光度，记录下测出的数据，得到葡萄糖标准曲线方程为：y=90848x+01183（R2 =09978）

三、超声处理正交试验结果及分析

利用超声波复合酶辅助的条件下，进行四因素三水平的正交试验L9（34），选择四因素（超声时间、超声温度、料液比、酶用量）中对芡实多糖影响较大的超声条件进行正交优化试验L9（34）。所得的正交试验数据如表1所示：

表1超声处理正交结果与分析（n=3）

由正交表显示，料液比对芡实多糖的提取的效果最为显著，影响因素的顺序为：料液比>超声时间>超声温度>酶用量。最佳超声提取条件A2B1C3D2，即超声温度为60℃，超声时间为1小时，复合酶（纤维素酶25%+果胶酶20%），料液比1：10，测得芡实多糖的多糖提取率为4617%。利用超声波辅助法来提取芡实多糖方法可行，为提取工艺优化提供了指导意义。

参考文献：

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