血小板在活血化瘀中药研究中的应用
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[收稿日期] 2013-11-27
[基金项目] 国家自然科学基金项目（81202886，21275169）
[通信作者] *杨丰庆，副教授，博士生导师，Tel：（023）65106615，E-mail：
[作者简介] 王凤琴，硕士研究生，E-mail：
[摘要] 不同形式的血栓性疾病严重威胁人类的健康，阿司匹林、氯吡格雷等抗血小板聚集类药物是临床上常用的治疗用药。但随着西药抗血小板聚集药物抵抗性及副作用的出现，传统活血化瘀中药的抗血小板聚集研究逐渐成为一个重要方向。血小板是血栓形成的主要参与者之一，作为生物活性材料在活血化瘀中药研究中扮演着重要角色，主要包括中药抗血小板聚集活性评价及其活性成分筛选2个方面。该文针对近年来血小板在活血化瘀中药研究方面的应用进行了综述，为进一步的研究提供参考。
[关键词] 活血化瘀；血小板活化；抗血小板活性评价；活性成分筛选
血瘀证是一类与血液、血液循环有关的病理过程，涉及呼吸、血液、内分泌、循环等多个系统，与心脑血管、肿瘤、糖尿病等多种疾病的发生、发展有关[1]。活血化瘀中药在治疗血瘀证方面具有悠久的历史，常用的活血化瘀中药有上百种[2]。中医将活血化瘀中药大致分为以下几类[3]：和血药（如丹参、丹皮、生地黄、鸡血藤、当归、赤芍等）、活血药（如川芎、红花、蒲黄、益母草、五灵脂、郁金、三七、大黄、泽兰等）及破血药（如水蛭、血竭、三棱、莪术、桃仁等）。现代医药学研究发现，活血化瘀中药主要通过改善血流动力学、血液流变学、抑制血栓形成、抗动脉粥样硬化及心肌缺血、抑制炎症及肿瘤等过程发挥其活血化瘀作用[4]。
血小板是血液的重要组成部分之一，活化后具有黏附、聚集、释放等功能。当血管壁受损，血小板活化处于正常水平时，血小板能正常参与机体凝血机制[5]。同时，当血小板在受到诱导剂刺激时而致使血小板活化过高，血小板黏附性、聚集性、释放及代谢能力增强，此时血小板过度聚集形成血栓并参与炎症反应等。在血小板活化乃至血栓形成过程中，血小板释放二磷酸腺苷（ADP）和5-羟色胺（5-HT）等生物活性物质能进一步促进血小板的聚集和血栓的形成[6-7]，这会加剧许多病理过程的发生及发展，如动脉粥样硬化、肿瘤转移、冠心病、脑梗死等。因此，抗血小板药物例如阿司匹林在临床上对于心血管疾病的预防和治疗具有重要的作用。然而，近年来此类药物抵抗性及副作用的出现使得人们急需开发新的药效强、副作用小的抗血小板药物，而活血化瘀中药无疑成为此类研究的热点之一[8]。目前，许多活血化瘀中药已被证明具有抗血小板聚集活性，其中比较有代表性的是红花、丹参、川芎、银杏叶、三七、人参、葛根等[9]。近年来，血小板用于活血化瘀中药的研究主要包括2个方面，一是通过检测中药对血小板黏附、聚集、释放等功能的影响来评价中药的抗血小板活性、推断活血化瘀机制；二是通过考察活血化瘀中药成分与血小板膜受体的作用强弱筛选中药中的潜在活血化瘀活性成分。
1 血小板用于活血化瘀中药抗血小板活性评价
血小板活化程度过高是形成血栓的主要原因之一。血管受损及一些活化诱导剂（胶原、凝血酶、血小板活化因子、二磷酸腺苷等）均能引起血小板的活化。处于活化状态的血小板的黏附性、聚集性增强。黏附性是指血小板与非血小板表面相互黏附，血小板黏附于血管内壁后即发生聚集反应。血小板聚集是指血小板之间的互相黏着，是血栓形成中较为关键的一步。
活化的血小板的物质代谢会发生显著性变化，主要有：①血小板内颗粒释放的特异性物质增加，包括P-选择素（CD62P、血小板α颗粒膜蛋白140），β-血小板球蛋白（β-TG），血小板第4因子（PF4），CD40L或可溶性CD40L（sCD40L），GPⅡb/Ⅲa复合物，5-HT，CD63等；②血小板内花生四烯酸代谢增加，包括血栓素A2（TXA2），血栓素B2（TXB2）及11-脱氢TXB2（11-DH- TXB2）；③血小板活胞内第二内信使钙离子上升及环磷酸腺苷（cAMP）下降。在这些物质中，有的是血小板活化时才表达，可以特异性表征血小板的活化水平，如P-选择素是目前最具特异性的表征血小板活化的分子，被认为是活化血小板标志物的金标准；而有些物质能进一步促进血小板聚集及血栓形成，如5-羟色胺能激活血小板并强化胶原、ADP等对血小板聚集的作用。因此，血小板或血浆内的此类物质的量也被广泛用于评价活血化瘀中药的抗血小板聚集活性，并且比血小板黏附性和聚集性实验更为灵敏。
中药抗血小板活性评价一般包括体外实验（in vitro）、活体外或离体实验（ex vivo）及体内实验（in vivo），测试项目包括血小板黏附性、聚集性及相关物质检测，有时还辅助以体内动物血瘀模型实验对评价方法进行验证。活性评价的一般过程是：①实验动物分组给药（体内实验或活体外实验）；②取血，制备富血小板血浆（PRP）或血小板悬液（WP），并保持一定的血小板浓度；③PRP（WP）中加入诱导剂，分别测试血小板黏附性及聚集性变化；④用相应的酶免疫测定试剂盒、流式细胞术等方法测试血小板释放物及代谢物的改变；⑤血瘀模型相关参数的观察及测定，主要包括出血时间、凝血时间、凝血酶原时间、活化部分凝血酶时间、凝血酶时间等。
近年来，许多文献报道了有关通过检测用药后血小板黏附性、聚集性及血小板相关释放物、代谢物的变化来评价中药抗血小板作用及药理机制研究的方法及应用，研究对象包括传统活血化瘀中药活性成分、单味中药提取物（表1）[10-63]、中药复方（表2）[64-83]、中成药（表3）[84-107]。研究对象大多表现出了体外或（和）体内抑制血小板黏附、聚集及释放、代谢活性；同时，相应的活体内药理辅助实验也证明了此类药物的抗血栓作用。甲磺酸胺银杏内酯B是血小板活化因子拮抗剂银杏内酯B的衍生物。刘成鼎等[10]通过比较空白对照组、各剂量组及阳性对照组中家兔血小板黏附性大小及释放物的含量对其抗血小板作用进行了研究。实验结果显示，甲磺酸胺银杏内酯B能抑制胶原引起的血小板黏附，降低血小板活化因子（PAF）引起的5-HT，β-TG及PF4的释放。这说明甲磺酸钠银杏内酯B具有较好的抗血小板活化作用。并且，相比于银杏内酯B，甲磺酸胺银杏内酯B具有较好的水溶性，可开发为注射液，在一定程度上解决临床上银杏内酯B使用受限的问题。桃红四物汤具有较好的活血化瘀作用，韩岚等[66]采用旋转玻球法、比浊法、酶联免疫吸附法分别测定桃红四物汤对正常及造模血瘀大鼠的血小板黏附性、聚集性及释放物质的变化。结果显示，桃红四物汤能有效地抑制正常大鼠血小板黏附及ADP和肾上腺素诱导的血小板聚集，降低造模大鼠血浆内vWF，TXB2，GMP-140的含量及TXB2/6-keto-PGF1α比值。说明桃红四物汤对血小板活化过程中黏附、聚集及释放3个阶段均有一定的抑制作用，并由此推断，桃红四物汤的抗血小板活化活性与其能够降低血小板vWF及GMP-140含量，抑制TXB2生成，调节TXB2/6-keto-PGF1α平衡有关。在诸多相似的研究中，香橼[31]、黑豆[62]、西芹[63]等食材也表现出抗血小板活化及抑制血栓形成活性。
2 血小板用于活血化瘀中药潜在活性成分色谱法筛选
受体理论认为：药物发挥药效的前提是药物与受体的特异性结合。药物的亲和性（与受体的结合能力）一定程度上反映了药物的药效强弱。基于此，血小板作为附有多靶点的生物介质被逐渐用于活血化瘀中药中抗血小板活性成分的筛选研究。
目前常用的方法是一种离线的血小板膜固相色谱法[108]（即固相萃取结合色谱分析法）：首先，建立中药提取物的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱；然后，保持生物活性的离体血小板用中药提取物在适宜温度下孵育一段时间，离心过滤；对未结合成分的洗脱；破坏血小板释放与血小板结合成分，离心过滤，用相同的色谱条件分析与血小板结合的成分；最后，对比中药提取物的HPLC指纹图谱，确定与血小板结合的成分。通常情况下，该方法亦结合质谱技术（MS）对成分进行结构鉴定。
Yu等[109]用血小板膜固相色谱法研究脉络宁注射液中的活性成分，筛选出5个能和血小板有较强结合作用的物质：新绿原酸、咖啡酸、异绿原酸及它们的异构体。用流式细胞术测定结果显示咖啡酸能显著抑制P-选择素的表达。Wang等[110]用血小板膜固相色谱法研究三七中的抗血小板聚集活性成分，筛选出5个能与血小板特异作用的成分，其中4个被确认为腺苷、鸟苷、人参皂苷Rh1及人参皂苷F1，并且通过血小板聚集实验验证了三七中的腺苷和鸟苷有抗血小板聚集的活性。由此说明固相色谱法筛选活血化瘀中药活性成分具有一定的可靠性。另外，贾俊[111]、赵黄刚[112]、樊宏伟[113]等用类似的方法筛选分析了红花、三七及丹参提取物的潜在抗血小板聚集活性成分（表4）。
血小板电色谱法作为一种在线分离分析技术也用于活血化瘀中药的筛选。吕瑞等[114]用物理吸附法将血小板部分涂覆在毛细管内壁上，测定血小板在不同涂覆长度时毛细管内的淌度变化计算中药丹参水提物和三七乙醇提取物中的成分与血小板的结合常数，结合常数的大小反映成分与血小板结合能力的大小及抗血小板活性的大小。结果显示，三七醇提物中的腺苷的结合常数较大，这与以往有关腺苷抗血小板聚集活性的研究相吻合，说明血小板能有效地用于电色谱法筛选中药抗血小板活性成分。在该研究方法中，血小板通过物理吸附法被固定在毛细管内壁，最大限度地保留了其生物活性；采用部分涂覆的方法能显著提高电渗流，提高分析 效率。涂层血小板电色谱法结合了毛细管亲和电泳和电色谱的优点，能够直观地表现药物与血小板作用的动力学参数，是一种比较有应用前景的活血化瘀中药活性成分筛选方法（表4）。
3 血小板在活血化瘀中药研究中存在的问题
3.1 活性评价方面 目前，活血化瘀中药抗血小板活性评价研究已经取得一定的进展。大量的实验结果论证了一些常见活血化瘀中药、复方及成分的抗血栓机制[8]。同时，该方法还用于研究一些没有文献记载但在民间确有疗效的中药的抗血小板活性。如李静等[115]通过研究发现香椿子正丁醇提取物能抑制凝血酶引起的血小板细胞内钙离子浓度上升及血小板膜GPⅡb/Ⅲa受体表达，并可以初步推测该抑制作用与其抗凝血及抗血栓作用相关。但是，活血化瘀中药抗血小板药理研究还存在一些不足：①黏附性和聚集性测试不灵敏，目前多数抗血小板聚集测试仍采用传统的比浊法，而此方法受血样因素影响大，在反映中药血小板聚集性方面不够灵敏；②药理研究主要在药效的观察方面，分子水平药理机制的研究较少[8]；③机制研究方面仅仅是通过观察检测推断药理机制，有待于进一步的严密实验验证。如研究结果[116]显示人参皂苷Rg1能抑制大鼠血小板聚集，但血小板内cAMP没有变化，并依此推断人参皂苷不是通过升高血小板内cAMP含量来抑制血小板活性，诸如此类的结论尚待进一步深入的研究。
3.2 色谱法筛选活性成分方面 血小板作为介质用于色谱法活血化瘀中药抗血小板活性成分研究是一种在受体理论指导下的快速、高效活性物质追踪方法，已较为成功地用于三七、丹参、红花等活血化瘀中药潜在活性成分的筛选中，但是此方面的应用还存在一些不足：①血小板在用于色谱法筛选活血化瘀中药活性成分主要集中在血小板膜固相色谱法。在此方法中，药物筛选过程和物质分离鉴定过程是分开的，不能反映血小板和药物作用的动力学参数[117]，无法直接反映不同成分之间的相对活性大小，药物的作用效果仍需进一步的药理实验验证。生物色谱是近年来发展起来的一种在线分析药物与受体特异性作用的技术，已有红细胞、血管内皮细胞、白细胞、巨噬细胞、心肌细胞等活细胞及细胞膜用于中药活性成分筛选研究[117]，但鲜有血小板在此技术上的应用。所以，血小板作为一种活性生物材料也有待于在生物色谱法筛选活血化瘀中药方面得到发展及应用。②用涂层毛细管电谱法测定了丹参水提物及三七醇提物与血小板的结合常数，是血小板用于在线药物分析的初步尝试。但实验结果和以往研究还有不相符的地方，方法条件等问题还有待改进。基于血小板膜受体生理活性及已有的血小板筛选分析方法，可以展开血小板在生物色谱或毛细管亲和色谱方面的应用研究，为活血化瘀中药筛选及药理活性研究提供方法学基础。
[参考文献]
[1] 杜金行，李腾飞，史载祥. 血瘀证及活血化瘀临床研究回顾与展望[J]. 中华中医药杂志，2012，27（9）：2247.
[2] 徐大鹏. 活血化瘀中药之药理研究[J]. 科技与企业， 2012，21（15）：358.
[3] 杜金行，史载祥. 血瘀证与中西医结合诊疗共识[J]. 中国中西医结合杂志， 2011，31（6）：839.
[4] 高冲，刘璐，胡爱菊，等. 活血化瘀中药的药理作用研究进展[J]. 药物评价研究，2013，36（1）：64.
[5] 王婕，国丽平，王怡. 中药对血小板功能影响的研究进展[J]. 北京中医药，2008，27（11）：893.
[6] 李泓. 花生四烯酸代谢、血小板激活因子、血小板膜蛋白与脑缺血[J]. 国外医学・神经病学神经外科学分册， 1996，23（2）：80.
[7] 章靓，陈旺，庞文生，等. 血栓形成机制及血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂的研究进展[J]. 国际药学研究杂志，2009，36（4）：268.
[8] Liu Y， Yin H J， Shi D Z， et al. Chinese herb and formulas for promoting blood circulation and removing blood stasis and antiplatelet therapies[J]. Evid Based Complement Alternat Med， 2012，doi：184503.
[9] 魏蕾，宫鹏. 中药有效成分抗血小板聚集的研究进展[J]. 安徽医药，2012，16（12）：1879.
[10] 刘成鼎，崔娇，潘苏华，等. 甲磺酸内酯B抗血小板粘附和释放作用研究[J]. 中药药理与临床， 2009，25（6）：42.
[11] 刘洪，潘苏华，刘成鼎，等. 甲磺酸胺银杏内酯B对PAF诱导家兔血小板聚集和释放产物的影响[J]. 中成药，2010，32（6）：914.
[12] 冯玉丽，占葆娥，张书楠，等. 穿心莲内酯在动物体内抗血小板凝聚的实验研究[J]. 国际检验医学杂志，2013，34（4）：385.
[13] 谢笑龙，吴敏，吴芹，等. 异钩藤碱对血小板聚集和血栓形成的影响[J]. 中国药学杂志，2011，43（4）：280.
[14] 谢笑龙，龚其海，路远富，等. 钩藤碱对家兔血小板聚集及胞浆游离钙离子浓度的影响[J]. 中国药理学与毒理学杂志，2011，25（1）：68.
[15] 王辉，刘刚，罗顺德. 莲心碱对血小板聚集、凝血功能和血栓形成的影响[J]. 中国药理学通报， 2010，26（6）：768.
[16] Qu W， Wu F H， Li J， et al. Alkaloids from Houttuynia cordata and their antiplatelet aggregation activities[J]. Chin J Nat Med，2011，9（6）：425.
[17] 杨静娴，史相国，徐志立，等. 乌苏里藜芦碱抗血栓作用机制的研究[J]. 中国医药指南，2010（32）：177.
[18] 孟庆玉，戴岳，林海，等. 夏天无总碱对家兔血液流变性及血小板聚集的影响[J]. 中药药理与临床，2009，25（3）：32.
[19] Zhou Q， Jiang L， Xu C H， et al. Ginsenoside Rg1 inhibits platelet activation and arterial thrombosis[J]. Thromb Res， 2014，133（1）：57.
[20] 田建明，宋丽晶，李浩，等. 人参皂苷Rg2对大鼠体内血栓形成及血小板聚集的影响[J]. 上海中医药杂志，2009，43（11）：79.
[21] 邓东红，黄艳平，杨杰，等. 芒果苷对血小板聚集和释放CD62P的影响[J]. 中药材， 2011，34（9）： 1408.
[22] 卢芙蓉，秦铀，沈霖，等. 葫芦巴总皂苷对链脲佐霉素诱导的糖尿病大鼠血小板活化的调节作用[J]. 中国医院药学杂志，2010，30（5）：369.
[23] 陈小萍，刘文，丁航，等. 田七总皂甙对凝血酶诱导的兔血小板聚集的影响[J]. 现代医学，2010，38（4）：337.
[24] 丛悦. 知母甾体皂苷抗血小板活性作用机制的研究[D]. 北京：军事医学科学院放射与辐射医学研究所， 2010.
[25] 可燕，蒋嘉华，王现珍，等. 三七根及花总皂苷抗肿瘤诱导的血小板聚集研究[J]. 中药材，2010，33（1）：96.
[26] 陈江斌，孙小梅，方永有. 三七总皂苷对冠心病心绞痛患者血浆内皮素-1和血小板功能的影响[J]. 中国中西医结合急救杂志，2009，16（2）：96.
[27] Lau A J， Toh D F， Chua T K， et al. Antiplatelet and anticoagulant effects of Panax notoginseng： comparison of raw and steamed Panax notoginseng with Panax ginseng and Panax quinquefolium[J]. J Ethnopharmacol，2009，125：380.
[28] Hua L， Wen H， Wen Y Q， et al. Anti-thrombotic activity and chemical characterization of steroidal saponins from Dioscorea zingiberensis C. H. Wright[J]. Fitoterapia，2010，81（8）：1147.
[29] Gong G H， Qin Y， Huang W， et al. Anti-thrombosis effect of diosgenin extract from Dioscorea zingiberensis C. H. Wright in vitro and in vivo[J]. Phytomedicine，2011，18（6）：458.
[30] Zhang R， Huang B Z， Du D， et al. Anti-thrombosis effect of Diosgenyl saponins in vitro and in vivo[J]. Steroids，2013，78（11）：1046.
[31] Yu H Y， Park S W， Chung I M， et al. Anti-platelet effects of yuzu extract and its component[J]. Food Chem Toxicol，2011，49（12）：3018.
[32] 于晓风，曲绍春，刘巍，等. 西洋参茎叶20s-原人参二醇组皂苷对实验性脑缺血大鼠血小板功能及血液流变学的影响[J]. 中药材，2011，34（2）：272.
[33] 周敏，李晓静，李晓辉，等. 丹参酮IIA对免疫性血管炎、血小板及凝血功能影响的实验研究[J]. 血栓与止血学，2009，15（1）：8.
[34] 孟莉. 丹参酮IIA磺酸钠注射液对冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者血小板活化功能的影响[D]. 北京：北京中医药大学，2013.
[35] Liu J Q， Lee T F， Miedzyblocki M. Effect of tanshinone IIA， a major component of Salvia miltiorrhiza， on platelet aggression in healthy mewborn piglets[J]. J Ethnopharmacol，2011，137（1）：44.
[36] Xia Q， Wang X， Xu D J， et al. Inhibition of platelet aggression by curdione from Curcuma wenyujin essential oil[J]. Thromb Res，2012，130（3）：409.
[37] 王云，韩继举，赵晓民，等. 蒺藜总黄酮对大鼠血小板黏附和聚集功能的影响[J]. 中国医院药学杂志，2011，31（20）：1714.
[38] 刘文，梁念慈. 槲皮素-7-硫酸酯钠盐对血栓形成的影响[J]. 中药药理与临床，2011，27（3）：30.
[39] 廖霞，刘文，丁航. 柚皮素对凝血酶诱导的兔血小板聚集的影响[J]. 时珍国医国药，2010，21（11）：2909.
[40] 张晓晖，穆桂萍. 葡萄籽原花青素对血小板聚集与实验性血栓形成的影响[J]. 国际中药杂志， 2010，32（1）：14.
[41] 朱卫华，常青，李自成，等. 大蒜素对兔髂动脉球囊内皮剥脱术后血小板黏附的影响[J]. 暨南大学学报，2011，32（4）：397.
[42] 李威，汤晓蓉，杨飞，等. 蓝萼丙素对血小板活化的影响[J/OL]. 中国科技论文在线，2013， http：//www. paper. edu. cn/releasepaper/content/201305-516.
[43] 张恩立，许勤龙，李家明，等. 阿魏酰胍丁胺对家兔血小板聚集性的影响[J]. 时珍国医国药，2013，24（1）：142.
[44] 许勤龙，周鹏，李家明，等. N-（4-胍基丁基）丁香酰胺对家兔血小板聚集的影响[J]. 安徽医药，2012，16（12）： 1762.
[45] Singh K A， Nayak M K， Jagannadham M V， et al. Thrombolytic along with anti-platelet activity of crinumin， a protein constituent of Crinum asiaticum [J]. Blood Cells Mol Dis，2011，47（2）：129.
[46] 吴少瑜，吕琳，徐伟万，等. 蝮蛇蛇毒中小分子肽抑制血小板聚集作用的研究[J]. 中国民族民间医药，2010，6：13.
[47] 李恒，和七一，余晓东，等. 白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶对血小板聚集的影响及机制研究[J]. 中国生化药物杂志，2010，31（2）：77.
[48] Yi T， Chen H B， Zhao Z Z， et al. Comparison of the chemical profiles and anti-platelet aggregation effects of two “Dragon′s Blood”drugs used in traditional Chinese medicine[J]. J Ethnopharmacol，2011，133（2）：796.
[49] Xin N， Li Y J， Li Y， et al. Dragon′s blood extract has antithrombotic properties， affecting platelet aggression functions and anticoagulation activities[J]. J Ethnopharmacol，2011，135（2）：510.
[50] 李伟，张军平，徐士欣，等. 丹酚酸B对血小板聚集及释放sP-sel和sCD40L的影响[J]. 中华中医药学刊，2013，31（1）：48.
[51] Fan H Y， Fu F H， Yang M Y， et al. Antiplatelet and antithrombotic activities of salvianolic acid A[J]. Thromb Res，2010，126（1）：e17.
[52] 谷培. 丹参酚酸盐对健康人及冠心病患者血小板聚集的影响[D]. 石家庄：河北医科大学，2012.
[53] 闫文亮. 花生壳提取物对家兔血小板聚集的影响[J]. 中国药房，2010，21（31）：2896.
[54] Lee B J， Jo I Y， Bu Y M， et al. Antiplatelet effects of Spatholobus suberectus via inhibition of the glycoprotein GPIIb/IIIa receptor[J]. J Ethnopharmacol，2011，134（2）：460.
[55] Zhang Q C， Zhao Y， Bian H M， et al. Anti-thrombotic effect of a novel formula from Corni Fructus with malic acid， succinic acid and citric acid[J]. Phytother Res， 2014，28（5）：722.
[56] Zhou Z Q， Wei X Y， Fu H Z， et al. Chemical constituents of Callicarpa nudiflora and their anti-platelet aggregation activity[J]. Fitoterapia， 2013， 88C： 91.
[57] 范莉，濮润，赵海誉，等. 红花抗ADP诱导的血小板聚集活性研究[J]. 中国中药杂志，2011，36（9）：1242.
[58] 高源，陈建伟，，等. 九香虫抗凝血作用的研究[J]. 现代中药研究与实践，2010，24（3）：34.
[59] 王斌，李敏，侯建平，等. 太白米不同提取部位对血瘀大鼠血栓形成及家兔血小板聚集的影响[J]. 中药药理与临床，2010，26（4）：44.
[60] 凌霜，张洪平，章丹丹，等. 桑枝不同溶剂提取物对血小板聚集、血管舒张及巨噬细胞活化的不同作用[J]. 中国中药杂志，2010，35（22）：3024.
[61] 张晨，熊昌源，赵亮，等. 葱白提取物对创伤性兔下肢深静脉血栓形成过程中血小板活化的影响[J]. 中国中医骨伤科杂志，2010，18（9）：13.
[62] Kim K Y， Lim K M， Kim C W， et al. Black soybean extract can attenuate thrombosis through inhibition of collagen-induced platelet activation[J]. J Nutr Biochem，2011，22（10）：964.
[63] Gadi D， Bnouham M， Aziz M， et al. Parsley extract inhibits in vitro and ex vivo platelet aggregation and prolongs bleeding time in rats[J]. J Ethnopharmacol， 2009， 125（1）： 170.
[64] 罗丹冬，张会平，王沛坚，等. 桂枝甘草汤提取物抗血栓形成的药效及机理的初步研究[J]. 新中医， 2010，42（7）：109.
[65] 何少玲，张荣，赵威，等. 陈皮、姜提取物对血瘀证大鼠血液流变学和血小板聚集率的影响[J]. 中药药理与临床，2012，28（1）：11.
[66] 韩岚，彭代银，许钒，等. 桃红四物汤抗血小板活化作用及机制研究[J]. 中国中药杂志，2010， 35（19）：2609.
[67] Jin W Y， Kim S H， Kim H K， et al. Antiplatelet and antithrombotic effect of Phyllostachys pubescens leaves and Mume Fructus combination[J]. Integr Med Res， 2013，2（2）： 70.
[68] Chen C， Li S X， Wang S M， et al. Investigation into the anti-thrombosis effect and contents of total saponins and flavonoids in the bioactive fraction of Naodesheng prescription[J]. J Ethnopharmacol， 2012， 144（1）： 208.
[69] Wang L， Wang Z Y， Wei X， et al. Mechanism of anti-arterial thrombosis of Dahuangzhechong Fang screened by Ti-Al intermetallic compound porous material[J]. T Nonferr Metal Soc， 2012， 22（12）： 3156.
[70] 吴同和. 血府逐淤汤干预阿司匹林抵抗患者血小板聚集的研究[J]. 时珍国医国药，2012， 23（6）：1586.
[71] 梁进权，宓穗卿，王宁生，等. 水蛭、虻虫配伍的抗凝血和抗血小板聚集的作用[J]. 中药材，2009，32（9）：1347.
[72] 白旭东，许琳，杜瑞卿，等. 赤芍总苷与黄芪多糖配伍抑制血小板聚集的药效优化[J]. 中国医院药学杂志，2011，31（16）：1321.
[73] 张彦华，唐于平，郭建明，等. 活血化瘀方对ADP诱导的家兔血小板聚集和凝血酶时间的影响及量效关系研究[J]. 中国中药杂志，2009，34（21）：2821.
[74] 王爱云，陆茵，张丽娟，等. 活血化瘀类方水提液对血小板聚集的影响[J]. 中药药理与临床， 2010，26（3）：18.
[75] 周卫，宿树兰，刘培，等. 蒲黄-五灵脂药对不同提取物活血化瘀效应的比较研究[J]. 南京中医药大学学报， 2010，26（3）：211.
[76] 蒋海峰，宿树兰，欧阳臻，等. 乳香、没药提取物及其配伍对血小板聚集与抗凝血酶活性的影响[J]. 中国实验方剂学杂志，2011，17（19）：160.
[77] 章靓，庞文生，胡娟，等. 药对柴胡一白芍对大鼠体内外血小板聚集的影响[J]. 中国民族民间医药， 2009 （21）：6.
[78] Liu L， Duan J A， Tang Y P， et al. Taoren-Honghu herb pair and its main components promoting blood circulation through influencing on hemorheology， plasma coagulation and platelet aggregation[J]. J Ethnopharmacol， 2012，139（2）：381.
[79] 张继平，林爱华，李蜀光，等. 补阳还五汤对脊髓损伤大鼠血浆血小板活化因子含量的影响[J]. 中国实验方剂学杂志，2009，15（4）：47.
[80] 张继平，宫丽，姚晖，等. 补阳还五汤大鼠含药血清对家兔血小板PAF受体活性的影响[J]. 临床医学工程，2009，16（9）：14.
[81] 张继平，宫丽，李齐欢，等. 补阳还五汤家兔含药血清对家兔血小板PAF受体活性的影响[J]. 中国中医基础医学杂志，2010，16（8）：688.
[82] 高莹，杨积武. 枯萎薤半夏汤合丹参饮对痰浊血瘀型冠心病患者血脂及血小板功能的影响[J]. 辽宁中医杂志，2011，38（2）：307.
[83] 江锦红，方炳木，刘永华，等. 观察增血汤联合生血散中药方对特发性血小板减少性紫癜患者GPIIb/IIIa及vWF的影响[J]. 中华中医药学刊，2011，29（6）：1244.
[84] 吴建霞，王婕，郭利平，等. 芪参益气滴丸对高血脂症家兔血小板胞内游离钙离子影响[J]. 山西中医，2011，27（2）：41.
[85] 王如伟，吕，黄黎，等. 银杏叶提取物制剂、阿司匹林及氯吡格雷抗血小板聚集作用比较及对血小板活化因子含量的影响[J]. 基础研究，2011，16（9）：998.
[86] 金成元，郑顺福. 银杏叶片、三七总皂苷及丁咯地尔对急性脑梗塞患者血小板活化功能的影响[J]. 医学信息，2011（5）：1861.
[87] 王靓，龙子江，施惠，等. 心康注射液对心肌缺血模型大鼠PGI2/TXA2平衡和血小板聚集的影响[J]. 中成药，2011，33（4）：581.
[88] 王勇. 搏心通胶囊对冠心病心绞痛患者血脂及血小板聚集率的影响[D]. 武汉：湖北中医学院，2009.
[89] 安贺军，王新月，于玫，等. 益气活血解毒法对溃疡性结肠炎血浆血小板活化的临床及实验研究木[J]. 天津中医药，2011，28（4）：281.
[90] 王健. 三芪口服液对糖尿病肾病患者血小板活性的影响[D]. 广州：广州中医药大学，2011.
[91] 何玉萍，方永奇，李翎，等. 醒神喷鼻液对脑出血大鼠血小板活化的影响[J]. 中药新药与临床药理， 2012，23（1）：33.
[92] 唐正龙，王兴，伊彪，等. 云南白药对血小板的释放与代谢反应的影响[J]. 贵阳医学院学报， 2009，34（3）：282.
[93] 张娴娴，肖璐，陈兰兰，等. 脑心通胶囊辅助治疗对颅内动脉粥样硬化性狭窄患者血小板膜糖蛋白及血小板参数的影响[J]. 江苏大学学报，2013，23（1）：65.
[94] Huang M W， Wang H， Zhong W J， et al. Chinese herbal medicine Naoxintong capsule combined with dual antiplatelet therapy in a rat model of coronary microembolization induced by homologous microthrombi [J]. J Integr Med， 2011，9（1）：38.
[95] 王敏，孙安盛，吴芹，等. 天贞子胶囊对血小板聚集和血栓形成的抑制作用[J]. 时珍国医国药， 2009，20（5）：1151.
[96] 李涛，范吉平，何丽清，等. 脑痛立停胶囊对血瘀证大鼠血液流变学及血小板聚集的影响[J]. 国际中医药杂志，2009，32（2）：107.
[97] 李传河. 祛风通络胶囊对血瘀型大鼠血小板聚集率及凝血因子的影响[J]. 求医问药，2012，10（7）：808.
[98] 李勤劳. 血塞通注射液对人体血小板聚集调节作用的实验研究[J]. 陕西中医，2010，31（8）：1062.
[99] 方朝晖，杨君平，张静游，等. 苁归益肾胶囊对早期糖尿病肾病患者血浆内皮素和血小板功能的影响[J]. 中医药临床杂志， 2010，22（8）：668.
[100] 周静，马兴苗，邱碧菡，等. 黄连解毒汤及其单昧药精制前后抗血小板聚集作用的研究[J]. 中成药，2013，35（6）：1312.
[101] 侯可强，何广云，王强庆，等. 丹红合剂对家兔血小板聚集的影响[J]. 国际中医药杂志， 2012，34（3）：214.
[102] 雷霆，陈志国，周军，等. 白及三七混剂对门脉高压性胃病大鼠模型血小板功能的影响[J]. 中国中医急症，2011，20（1）：83.
[103] 赵聪，葛长江，吕树铮，等. 心可舒联合脉血康对二磷酸腺苷诱导的血小板聚集率偏高的冠心病患者的疗效[J]. 中华临床医师杂志，2012，6（17）：5135.
[104] 姬晓鹏，蒋斌，潘琳，等. 复方丹参片与丹参片对冠状动脉粥样硬化患者血小板活化抑制作用的比较[J]. 中国药房，2010，21（19）：1805.
[105] Zong R K， Liu J. Effects of xinfeng capsules on expression of platelet granule membrane protein140 and platelet cluster of differentiation 40 ligand in peripheral blood of adjuvant arthritis rats[J]. Int J Rheumatol， 2012，doi：139696.
[106] 王宁. 心脑舒通胶囊对急性脑梗死病人GMP-140、D-二聚体及血小板聚集率的影响[J]. 中西医结合心脑血管病杂志， 2010， 8（7）：808.
[107] 沈欣， 李文， 殷晓杰， 等. 黄芪桂枝五物颗粒对光化学诱导脑血栓形成大鼠的影响[J]. 中国实验方剂学杂志， 2011，17（15）：227.
[108] 陈媛媛，郭姣. 细胞膜色谱技术在中药活性成分筛选中的应用进展[J]. 中草药，2012， 43（2）：383.
[109] Yu L， Li Y B， Fan H W， et al. Analysis of marker compounds with anti-platelet aggregation effects in Mailuoning injection using platelet binding assay combined with HPLC-DAD-ESI-MS and solid-phase extraction technique[J]. Phytochem Anal，2011，22（1）：87.
[110] Wang J， Huang Z G， Cao H， et al. Screening of anti-platelet aggregation agents from Panax notoginseng using human platelet extraction and HPLC-DAD-ESI-MS/MS[J]. J Sep Sci，2008， 31（6/7）：1173.
[111] 贾俊. 红花注射抗血栓药效物质基础初步研究[D]. 太原：山西大学，2010.
[112] 黄赵刚. 血小板生物亲和萃取结合HPLC法筛选三七抗血小板聚集活性皂苷成分[D]. 合肥：安徽医科大学， 2005.
[113] 樊宏伟，余黎，洪敏，等. 血小板细胞膜固相色谱法的建立及其对丹参效应物质的初步分析[J]. 中国药学杂志， 2004，39（5）：375.
[114] 吕瑞. 特异性相互作用毛细管电色谱法筛选中药活性成分[D]. 重庆：重庆大学，2011.
[115] 李静，陈超. 香椿子正丁醇提取物的抗血栓作用及其作用机制[J]. 四川中医，2009，27（5）：26.
[116] 华声瑜，曲凤，陈丽平，等. 人参皂苷Rg1对血小板聚集及环磷酸腺苷的影响[J]. 天津中医药大学学报，2012， 31（1）： 31.
[117] Chen C， Yang F Q， Zuo H L， et al. Applications of biochromatography in the screening of bioactive natural products[J]. J Chromatogr Sci，2013，51（8）：780.