UF-50尿沉渣分析仪结合相差显微镜鉴别血尿来源的应用价值

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇UF-50尿沉渣分析仪结合相差显微镜鉴别血尿来源的应用价值范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

【摘要】 目的 探讨uf-50尿沉渣分析仪与相差显微镜在血尿来源鉴别中的价值。方法 选取肾病内科住院病人血尿患者122例,分别用UF-50尿沉渣分析仪与相差显微镜检查分析尿液中红细胞的相关参数。结果 对于血尿来源,UF-50尿沉渣分析仪检查的敏感性（92.7%）高于相差显微镜检查的敏感性（81.7%）,P＜0.05;而相差显微镜检查的特异性（80.0%）高于UF-50尿沉渣分析仪检查的特异性（52.5%）,P＜0.05。结论 UF-50尿沉渣分析仪与相差显微镜结合使用是血尿来源鉴别的最好策略。

【关键词】 血尿 UF-50 相差显微镜 尿液 红细胞

血尿常见于泌尿系统疾病,其来源有肾脏、泌尿道等。故将其可分为肾性血尿、非肾性血尿及混合性血尿。肾小球源与非肾小球源血尿的准确定位将有助于其他诊断试验的选择、降低医疗费用和减轻病人的痛苦。

目前,在临床上较为经典鉴别血尿来源的方法一般以相差显微镜检查尿液红细胞形态作为鉴别指标［1］。近年来全自动尿沉渣分析仪的运用大幅度提高了尿沉渣计数的准确度、精密度,节省了劳动力,并提供了尿液中红细胞的相应参数,也可以作为评估血尿来源的指标［2,3］。本文收集我院肾病内科血尿患者尿液标本分别用UF-50全自动尿液沉渣分析仪和相差显微镜检查红细胞形态,评价UF-50与相差显微镜的分析效能，探讨二者相结合使用能否在血尿来源定位上提供更大的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 肾病内科住院病人122例。本组病人均为2005年4月～2006年4月本院住院病人,其中男55例,女67例,年龄14～70岁,平均（38.6±22.1）岁。其中82例经详细病史、临床血、尿生化检查与免疫学检查、肾活检证实为肾小球病变,包括IgA肾病（20例）、系膜增殖性肾小球肾炎（50例）、膜性肾小球肾炎（7例）、其他肾炎（5例）；另40例行造影或膀胱镜或B超确诊为非肾小球病变,包括膀胱炎（10例）、肾结石（12例）、输尿管结石（10例）、尿路感染（8例）。

1.2 仪器与试剂 UF-50全自动尿液沉渣分析仪及配套试剂（SYSMEX）,相差显微镜（OLYMPUS）。

1.3 试验方法

1.3.1 UF-50全自动尿液沉渣分析仪检查 取新鲜中段晨尿10 ml于专用测定管内。仪器在测定前用配套校准物校准,并在每次测定前用配套质控物进行室内质量控制,所有实验使用同一批号质控物,尿液标本在收集后2h内测试完毕。根据参考标准UF-50全自动尿液沉渣分析仪将红细胞信息分为三种情况：（1）Microcytic（小红细胞）：RBC直方图70%处前向散射光强度（RBC-P70fsc）<80 ch;RBC前向散射光分布宽度SD值（RBC-FSC-DW）>或<50ch即为肾源性红细胞。（2）Non classified （未分类或混合性红细胞）又分为两种情况：RBC-P70fsc>100ch；RBC-FSC-DW>50ch及RBC-P70fsc 80～100ch；RBC-FSC-DW>或<50ch这两种情况均视为混合性血尿。（3）Normocytic（正常红细胞）：RBC-P70fsc>100ch；RBC-FSC-DW<50ch即为非肾源性红细胞。

1.3.2 相差显微镜检查 上述标本做UF-50尿液沉渣检查时,取尿液10 ml离心1500 rpm,5 min,弃上清液,留0.5 ml混匀直接涂片:检查10个视野,100个红细胞,观察红细胞的形态。尿液标本在收集后2 h内测试完毕。多形红细胞>70%或多形红细胞<70%但棘形红细胞>5%,即为肾小球性血尿;多形红细胞<20%为均一性红细胞,即为非肾小球性血尿;介于二者之间为混合性血尿［4～6］。

1.3.3 统计学方法 对于UF-50尿液沉渣分析仪与相差显微镜检查两种方法之间敏感性与特异性的比较采用卡方检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。所有数据的录入及统计分析均采用统计软件SPSS 12.0进行。

2 结果

122例肾病内科住院病人尿液UF-50与相差显微镜检测结果见表1。以UF-50检测尿液为小红细胞为肾小球病变的诊断依据,肾病内科住院病人的敏感性为92.7%,特异性为52.5%。以相差显微镜检测尿液为多形性为肾小球病变的诊断依据,肾病内科住院病人的敏感性为81.7%,特异性为80.0%。表1 住院患者尿液UF-50与相差显微镜检测结果 注：两种检查方法敏感性与特异性比较，P＜0.05

3 讨论

临床上定位血尿来源比较复杂和困难。通常肾组织活检可确定肾脏内部出血；肾盂造影术、细胞学检查等可定位肾外出血的原因。但这些方法操作繁琐，对病人造成的痛苦也较大。据报道［1,4,5］,通过显微镜检查尿沉渣中的红细胞形态可以判断血尿的来源:肾外来源红细胞形态正常,而来源于肾实质的红细胞常出现形态异常。常用的方法包括普通光学显微镜法和相差显微镜法。欧洲临床实验室委员会尿液分析组（ECLM）认为［6］,普通光学显微镜未染色活体尿液沉渣检查是不够的,建议用活体染色或相差显微镜检查。相差显微镜是利用光的衍射和干涉现象照射标本,产生明暗不同的反差识别,有助于增强透明与半透明的有形成分的轮廓,尤其是透明管型、不典型红细胞、血小板的识别。因此在区分肾内与肾外血尿来源时,常用相差显微镜观察红细胞形态,计算异常红细胞的数量,它具有简便、有效且无需侵入性操作的优点。

UF-50尿沉渣分析仪应用了氩激光流式细胞和电阻抗分析的原理,尿液中细胞等经过荧光染色后,在鞘流液的作用下通过鞘流室，每个细胞都暴露在激光束下，形成的前向散射光和前向荧光经过光电转化，使细胞能够被检测。当仪器在捕获了荧光强度（Fl,fluoresence,表示着色强度）、荧光脉冲宽度（Flw,fluoresence pulse width,表示染色区域的长度）、前向散射光强度（Fsc,forward scatter,表示粒子的直径）、前向散射光脉冲宽度（Fscw,forward scatter pulse width,表示粒子的长度）和电阻率（Imp,impedance,表示细胞体积）,可以定量红细胞（RBC）、白细胞（WBC）、上皮细胞（EC）、小圆细胞（SRC）、管型（CAST）、病理管型（Path.CAST）、细菌（BAST）、类酵母菌（YLC）、结晶（X’TAL）以及（SPERM）,并提供电导率（conductivity）和红细胞信息（RBC-Info）等,红细胞信息（小红细胞、正常红细胞、未分类红细胞）提示由红细胞前向散射（Fsc）直方图来判断。与显微镜方法比较,大幅度提高了尿沉渣计数的准确度、精密度和工作效率,并提供了尿液中红细胞的均一性等相应参数,可以用作评估血尿来源。

本试验结果表明,在鉴别血尿来源方面,UF-50检测的敏感性（92.7%）高于相差显微镜（81.7%）;而相差显微镜的特异性（80.0%）高于UF-50（52.5%）。UF-50检测尿液红细胞受较多因素的影响,如尿渗透压、菌尿、尿pH值等均会导致尿液红细胞形态的改变。如高碱性尿液可使尿中红细胞膜脂质外层面积增加，出现锯齿型和棘型等多形态红细胞［7］。离体后尿液随时间的延长红细胞形态也会发生改变甚至破坏。故临床收集的标本必须新鲜，检测务必及时。未溶解红细胞绝对值>50/μl（未溶解红细胞百分比>20%）是红细胞信息分析的前提。据本文实验数据UF-50的假阳性率达到39.7%。原因是由于白细胞、细菌、结晶体等在形态、大小、染色性上与红细胞类似,仪器不能够完全排除这些因素对红细胞计数的干扰,造成散射图上有交叉分布,导致UF-50在红细胞计数与形态学鉴别上的假阳性率增高。

现今的血尿来源判断存在多种策略与方案。本实验结果再次证明:用相差显微镜定量尿液中的红细胞数量和形态学判断是准确、有效、特异性好的方法,能够协助临床医生定位血尿来源,但是其操作繁琐、精密度差、劳动力耗费较大、不能够自动化检测,另外样本中红细胞绝对数量的不足和操作者自身存在的主观性也是误差来源之一。与相差显微镜方法比较,尿沉渣流式分析仪UF-50显著提高了红细胞计数的准确度与精密度,而且大大节省了劳动力,也利于动态观察药物疗效和判断预后,然而它在临床应用过程中出现一个严重的缺陷:干扰因素太多、敏感性高、特异性差,而且缺乏一个在国际上广泛认可的测定程序［6］。因此在判断血尿来源时,未离心尿液体外活体相差显微镜检查仍然被认为是最佳的候选参考方法。

现今最流行的方法是在进行血尿来源初筛时将UF-50与干化学试纸条同时使用,尿液沉渣分析专家系统就是在用户自定义医学决定水平的基础上结合这两种方法初步判断红细胞信息,然后用相差显微镜确认。此方案的实行将在不减少临床应用价值的同时降低相差显微镜复查率、节省报告时间与医疗费用,同时可以被融合到临床实验室尿沉渣检查标准化程序中。

【参考文献】

1 Thomas J,Pillsworth JR,Virginia M,et al.Differentiation of renal from non-renal hematuria by microscopic examination of erythrocytes in urine.Clin Chem,1987,33（10）:1791-1795.

2 马骏龙,丛玉隆,陈淑云,等.全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞鉴别血尿来源的探讨.中华医学检验杂志,1997,20（5）:305.

3 高飞,陈伟,邓小丽,等.全自动尿沉渣分析仪对血尿定位诊断的评价.第三军医大学学报,2002,24（6）:740-742.

4 李幼姬,叶任高,李仕梅.诊断肾小球血尿的一种简便方法.中华内科杂志,1984,23（2）:99.

5 熊立凡,顾晓,董小蓓.尿棘形红细胞在肾性和非肾性血尿鉴别中的意义.上海医学检验杂志,2000,15（2）:74.

6 European Urinalysis Guidelines.Scand J Clin Lab Invest,2000,60 （Suppl 23）:1-96.

7 陈巧林,顾可梁,解冰，等.相差显微镜和UF100联合检测鉴别血尿来源.临床检验杂志,2005,23（4）:281-283.