沙棘、青海云杉、祁连圆柏总多酚含量的比较研究

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摘要：以没食子酸为对照品，采用Folin-ciocalteu比色法测定青海3种特色植物沙棘（Hippohae rhamnoides）、青海云杉（Picea crassifolia）、祁连圆柏（Sabina przewalskii）的根、茎、叶总多酚，并分析同一植物不同部位及不同植物同一部位的总多酚。结果表明，祁连圆柏叶总多酚含量最高；同一植物不同部位总多酚含量均差异显著；不同植物同一部位除沙棘与青海云杉叶总多酚差异不显著外，其他均差异显著。

关键词：沙棘（Hippohae rhamnoides）；青海云杉（Picea crassifolia）；祁连圆柏（Sabina przewalskii）；总多酚；Folin-cicalteu比色法

中图分类号：Q946.82；O657.32 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）11-2879-03

DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2016.11.042

植物多酚因含有多个酚基团而得名，可作为一种天然抗氧化剂，是植物体内最重要的次生代谢产物之一。植物体内多酚类物质是受生物（如病虫害、杂草等）和非生物胁迫（如紫外线、高光、低温、干旱等）诱导产生的，用以适应外界逆境环境[1]，存在于植物的根、茎、叶、花、果实等部位。多酚类物质可用于防治心脑血管疾病、抗氧化、抗癌、抗病毒、抑菌、抗紫外线等方面[2-6]。

青海省属于高原大陆性气候，紫外线较强，常年低温少雨，冬季严寒而干燥，就在这样恶劣的环境里也能生长沙棘（Hippohae rhamnoides）这种全身是宝的植物。关于沙棘体内次生代谢产物总黄酮的研究比较多[7-10]，也有关于沙棘叶总多酚的报道[11，12]，鲜见沙棘根茎叶总多酚含量比较的研究。除了沙棘，青海省还是青海云杉（Picea crassifolia）和祁连圆柏（Sabina przewalskii）这两种中国特有树种的主要分布区[13]。关于青海云杉的研究主要在青海云杉林的群落结构方面[14，15]，对于祁连圆柏则侧重于其叶中挥发性成分的分析[16、17]，鲜见涉及这3种植物根茎叶总多酚含量的比较研究。本研究以沙棘、青海云杉、祁连圆柏3种植物为材料，采用Folin-cicalteu法测定总多酚含量，并对同一植物不同部位及不同植物同一部位的总多酚进行分析，为合理开发利用提供依据。

1 材料与方法

1.1 植物样品

3种试验材料均于2014年10月中旬采集自青海省大通县天然林（海拔283 8 m，101°37′28.7″E， 36°56′18.3″N）。成年植株的茎叶采集于主干离地面1.5 m处，根从靠近地表处刨出，洗净分装，带回实验室分析。

1.2 试剂及仪器

主要试剂：福林试剂，20% Na2CO3溶液，0.1 mg/mL没食子酸，2 g/L单宁酸溶液，8.0 g/L氨（NH3）溶液，3.5 g/L柠檬酸铁铵溶液（铁含量17%～20%），75%二甲基甲酰胺溶液。

主要仪器：BS110S型电子天平，CS101型电热鼓风干燥箱，粉碎机，KQ-400DB型超声波清洗器，HYB2型回旋振荡器，离心机，往复式机械搅拌器，722分光光度计，721分光光度计。

1.3 测定分析方法

植物总多酚的测定采用Folin-Ciocalteu比色法，具体步骤和分析参照文献[18]的方法进行。

2 结果与分析

2.1 标准曲线的建立

以没食子酸浓度c（单位为mg/mL）为横坐标，吸光度A为纵坐标建立校准曲线（图1），回归方程为A=127.57c-0.006 3，相关系数R2=0.999，在0～0.005 mg/mL范围内有良好的线性关系。

2.2 精密度、稳定性、重现性、回收率试验结果

稳定性试验显示，吸光度分别为0.162、0.160、0.159、0.156、0.157、0.155，RSD为0.01%，表明10 h 内溶液稳定性好。精密度试验结果显示，吸光度分别为0.091、0.090、0.091、0.091、0.090、0.090，RSD为0.02%。重现性试验结果显示，吸光度为0.176、0.165、0.201、0.184、0.161、0.197、0.186、0.174、0.167、0.193，RSD为0.13%，具有良好的重现性。加样回收试验结果（表1）显示，回收率为99.31%～101.59%，平均加样回收率为100.54%，表明该方法准确度高。

2.3 同一植物不同部位总多酚含量比较

沙棘不同部位总多酚含量从高到低依次为根、叶、茎，青海云杉不同部位总多酚含量从高到低依次为叶、根、茎，祁连圆柏不同部位总多酚含量从高到低依次为叶、茎、根（表2）；沙棘、青海云杉、祁连圆柏3种植物的根茎叶总多酚含量差异显著（P

2.4 不同植物同一部位总多酚含量比较

不同植物同一部位总多酚含量有所不同（表2）。根总多酚含量为沙棘>青海云杉>祁连圆柏，三者之间有显著差异（P沙棘>青海云杉，三者之间差异显著（P沙棘>青海云杉，其中沙棘与青海云杉相比差异不显著（P>0.05），祁连圆柏与沙棘、青海云杉比较均存在显著差异（P

3 小结与讨论

总多酚含量祁连圆柏叶最高，其次是沙棘根、沙棘叶、青海云杉叶，含量最少的是青海云杉茎。总多酚含量沙棘根高于叶，原因可能是沙棘为落叶植物，沙棘进入深秋以后，叶子即将掉落，体内多酚从叶中向根和茎转移，以提高其根和茎的抗寒性[1]。祁连圆柏和青海云杉均为叶部总多酚含量最高，这可能与它们是常绿植物有关，在叶中维持较高的多酚含量，有助于提高叶片的抗寒性而顺利越冬。

沙棘、青海云杉、祁连圆柏3种植物不同部位的总多酚含量均存在显著差异，这与对木衣属植物[19]、石榴[20]等植物中多酚的研究结论相似。其中，青海云杉茎的总多酚含量最低，为（8.71±0.63）%，但是也高于黄香楝树皮（58.59 mg/g）[21]、竹叶（6.059 mg/g）[22]、莴苣（32.03 mg/g）[23]等植物中的多酚。3种植物含有丰富的多酚，而且青海云杉和祁连圆柏这2种植物的叶片一年四季均可采集，具有资源量大的特点，为提取多酚类物质拓展了新来源。本研究同时也为沙棘、青海云杉、祁连圆柏3种植物的进一步开发与利用提供参考。

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