肝切除模型小鼠急性肝损伤研究

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【摘 要】目的 探讨小鼠肝切除急性肝损伤模型建立方法，研究肝切除急性肝损伤后肝功能变化情况。方法 对BALB/c小鼠实施部分肝组织切除手术，缝合后继续适应性饲养，取血清及肝组织匀浆检测ALT、AST、NO，并计算肝脏指数。结果 肝切除急性肝损伤小鼠与对照组比较，血清ALT、AST明显升高，肝组织匀浆ALT、AST明显降低，NO明显升高，肝脏指数明显增加。结论肝切除模型小鼠急性肝损伤肝后，功能明显下降，炎性作用突出，肝组织增生明显。

【关键词】肝切除；急性肝损伤；肝功能；一氧化氮

目前，对于肝占位性病变，对肝脏实施部分切除手术是主要的可能治愈方法之一，但手术本身对剩余的肝脏造成急性损伤，患者甚至会因肝衰竭而死亡。本研究通过建立肝切除急性损伤模型，探讨损伤后病变情况，为肝脏疾病的术后治疗提供实验数据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

BALB/c纯系小鼠，雄性，体重18-22g

1.2 主要试剂

（1）谷丙转氨酶（ALT）试剂盒、谷草转氨酶（AST）试剂盒、NO测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

（2）肝组织匀浆裂解液见表1。

（3）肝组织匀浆蛋白定量试剂盒购于

Dojindo Molecilar Technologies，INC.

1.3 方法

将BALB/c小鼠、雄性、体重18-22g，共40只，适应性喂养7天后，随机分为2组，Ⅰ组（模拟手术组），Ⅱ组（肝切除组），每组各20只。于超净操作台内，肝切除组小鼠开腹，切除一个肝小叶1/3后缝合；模拟手术组开腹，暴露部分肝组织后缝合。所有小鼠于术后第5天摘眼球放血处死并留取血液标本，4℃预冷PBS心脏灌流小鼠，收获肝脏组织。

小鼠血液标本离心后取血清待测。小鼠肝组织加入组织裂解液裂解，于高速分散器将组织打碎，离心后回收上清液待测。

ALT、AST、NO检测参见试剂盒说明书。

采用SPSS16.0、EXCEL软件进行数据处理，所得数据用 ±S表示，采用t检验进行统计学分析。

3 结果

转氨酶测定，与对照组比较，模型组小鼠血清转氨酶水平明显增高，p

4 讨论

研究发现，对小鼠实施肝组织部分切除后，小鼠肝组织急性损伤，肝功能严重破坏，血清转氨酶水明显上升，而肝组织匀浆转氨酶水平则相应下降，说明破坏的肝细胞将胞浆内ALT和线粒体内AST迅速释放入血，AST的明显升高更说明肝细胞线粒体的破坏，急性肝损伤模型建立成功。

通过对肝组织匀浆NO的测定显示损伤肝组织表达NO增加，已有研究表明，NO对肝细胞既有保护功能，又有杀伤毒性与促炎的双重作用。但在肝损伤特别是急性肝损伤时，细胞因子INF-γ、TNF-α、IL-lβ等可刺激诱导型NO合酶（iNOS）产生，iNOS一旦表达出活性，即可产生大量的NO，使得NO在肝脏中的浓度远高于其生理浓度，则损伤正常肝组织，导致肝细胞死亡。

急性肝损伤后，肝脏指数增加，表明肝切除后肝组织再生明显，在各种急性肝损伤过程中，都需要促进肝再生以利于肝功能的恢复。NO又可进一步促进肝组织炎症性肿胀，进而影响肝组织修复过程，因此肝脏急性损伤后再生修复的同时伴有严重的肝组织增生、肝细胞肿胀以及组织纤维化表现，进而影响肝脏功能恢复。

本研究通过建立肝切除肝损伤小鼠模型，从肝细胞破坏，肝组织炎症以及增生三方面探讨了急性肝损伤的特点，为肝切除术后治疗提供实验依据。

参考文献

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