中药方剂肠痈Ⅱ号中总黄酮的含量测定
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摘要：利用分光光度法测定肠痈Ⅱ号中总黄酮的含量。以95%乙醇及各显色试剂为参比溶液，芦丁为对照品，确定最大吸收波长为508 nm，线性方程为y=0.012 4x—0.006 2（R2=0.999 7），测定肠痈II号中总黄酮含量为0.25%。研究结果为肠痈Ⅱ号的后续研究提供基础。
中图分类号：O657.32 文献标识码：A 文章编号：0439—8114（2012）19—4364—02
黄酮类化合物是植物的重要次生代谢产物， 也是中药材的有效成分之一[1]。常用定量方法[2—4]有HPLC法和分光光度法，考虑到方法的简便、快捷以及可行性，采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法测定了中药方剂肠痈Ⅱ号中总黄酮的含量。肠痈Ⅱ号为延安大学附属医院保密配方，由君药（败酱草、二华），臣药（地丁、丹皮、丹参），佐使药（制附片、薏米仁、皂刺、木香、穿山甲）等10味药材构成，具有消肿散瘀、排脓解毒之功效，效果甚佳，本研究为肠痈Ⅱ号的后续深入研究提供基础。
1 材料与方法
1.1 仪器
SY—1000E多用途恒温超声提取机（北京弘祥隆生物技术开发有限公司）；TU—1810紫外可见分光分度计（北京普析通用仪器有限公司）；SHB—Ⅲ型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；烧杯（江苏省泰兴市振科仪器厂）；量筒（江苏省泰兴市振科仪器厂）；回流提取装置（1 000 mL）（西安仪器厂生产）；FZ102微型植物试样粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；ME2353电子天平（北京赛多利斯仪器有限公司）。
1.2 试剂
芦丁（中国药品生物制品检定所提供），乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝（天津市化学试剂五厂，分析纯），中药方剂肠痈Ⅱ号药材（延安大学附属医院药剂科提供，经黄剑林教授鉴定）。
1.3 测定方法
1.3.1 最大吸收波长的确定及标准曲线的绘制[1] 准确称取芦丁5 mg置于25 mL容量瓶中，用95%乙醇定容备用，记为1号，用吸量管分别吸取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL于25 mL容量瓶内，记为2、3、4、5、6、7号，在2～7号中分别加入0.7 mL 15%亚硝酸钠溶液，摇匀，放置5 min；再加入7.0 mL 10%硝酸铝溶液，摇匀，放置10 min；再加入5.0 mL 1 mol/L氢氧化钠，摇匀，放置5 min，用95%乙醇定容至刻度。取5号标准品，扫描400～570 nm所对应的吸收波长，从而确定最大吸收波长为508 nm，结果见图1。固定吸收波长为508 nm，以2号为参比溶液分别测定3～7号标准溶液吸收波长，绘制工作曲线，结果见表1，图2。
1.3.2 肠痈Ⅱ号中样品的含量测定方法 准确称取样品10 g置于200 mL三角瓶中，加入10倍体积的95%乙醇，超声提取3次，合并滤液，减压浓缩至10 mL左右，移入25 mL容量瓶，用95%乙醇定容至刻度，用吸量管吸取3份0.5 mL样品，分别置于25 mL容量瓶内，记为样1、样2、样3，分别加入0.7 mL 5%亚硝酸钠溶液摇匀，放置5 min；加入7.0 mL 10%硝酸铝溶液，摇匀，放置10 min；再加入5.0 mL 1 mol/L 氢氧化钠摇匀，放置5 min，再用95%乙醇定容至刻度，待测。
总黄酮含量=（比色浓度×1 mL×稀释倍数/投样质量）×100%
2 测定结果
肠痈Ⅱ号样品中的黄酮含量测定结果如表2所示，总黄酮含量均为0.25%。
3 小结
通过比色法测定中药制剂肠痈Ⅱ号总黄酮的含量，其含量为0.25%，该结果为其后续研究与开发提供基础。
肠痈Ⅱ号为延安大学附属医院自主研制的中药配方，具有很好的疗效，但因其开发技术及设备局限，未得到很好的利用，今后应对肠痈Ⅱ号进一步深入研究，使肠痈Ⅱ号充分开发利用，从而造福于人。
参考文献：
[1] 郑杭生，李计萍，韩 炜，等.紫外—可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点[J].中成药，2008，30（9）：1364—1366.
[2] 魏永生，王永宁，石玉平，等.分光光度法测定总黄酮含量的实验条件研究[J].青海大学学报，2003，21（30）：61—63.
[3] 丁利君，吴振辉.金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究[J].食品科学，2002，23（2）：62—65.
[4] 王 峥，李绍顺.百蕊草药材及其制剂中总黄酮的含量测定研究[J].中成药，2007，29（1）：138.